Aislamiento y cribado de polihidroxialcanoatos que producen bacterias

1. BIOTECNOLOGIA AISLAMIENTO Y CRIBADO DE POLIHIDROXIALCANOATOS QUE PRODUCEN BACTERIAS A PARTIR DE DESECHOS DE LA INDUSTRIA DE LA PULPA, EL PAPEL Y EL CARTÓN Varsha Goyal Anita Yadav AnishKumariBhuwal Gulab Singh Neeraj Kumar Aggarwal ALUMNO: VELASQUEZ PAUCAR, Brush Noel DOCENTE: Dr. SOTO GONSALES, HebertHernan

2. Completamente degradados dentro de un año, por variedad de microorganismos en CO y agua Biodegradables AISLAMIENTO Y CRIBADO DE POLIHIDROXIALCANOATOS QUE PRODUCEN BACTERIAS A PARTIR DE DESECHOS DE LA INDUSTRIA DE LA PULPA, EL PAPEL Y EL CARTÓN Son Los Respetuosos con el medio ambiente PHA OBJETIVO Bioplásticos biocompatibles ser Utilizar lodos y aguas residuales de la industria de la pulpa, el papel y el cartón para el aislamiento y cribado de bacterias que acumulan polihidroxialcanoatos (PHA) y la producción de PHB rentable utilizando aguas residuales de la industria del cartón Pueden Utilizado universalmente INTRODUCCIÓN MATERIAL Y MÉTODOS Causan graves problemas ambientales Plásticos no degradables Lodos activados y aguas residuales de la industria de fabricación de pulpa Los PHA son polímeros de reserva de carbono y energía Los Agua esterilizada (PHB) es el polímero más común y una alternativa prometedora a los plásticos sintéticos no degradables MATERIAL Plásticos Placas agar nutritivo con glucosa al 1% La empresa norteamericana WR Grace Co. hizo el primer intento de producir PHB MÉTODOS Solución alcohólica al 0,02% de negro B Las aguas residuales de la pasta química y mecánica contienen 12-25 kg de DBO / t de ADP El nitrógeno y el fósforo también están presentes en las aguas residuales Análisis de polímeros Análisis FT-IR Análisis GC-MS Extracción y análisis cuantitativo de PHA Tratamiento previo de aguas residuales de la industria del cartón Caracterización morfológica e identificación bioquímica de bacterias productoras de PHA Detección de bacterias productoras de PHA Aislamiento de bacterias productoras de ácidos polihidroxialcanoicos (PHA) Se disolvió en 2 mL de cloroformo y luego se agregaron 2 mL de metanol y se acidificó con H SO4 al 3% (v / v) y se calentó a 100 ° C durante 3.5 h Se analizaron en un espectrómetro Bruker Avance II 500 a 22 ° C con un ancho de pulso de 7,4 ms Se llevó a cabo en MB-3000, espectrofotómetro ABB FTIR en el rango 4000-600 cm Se observa la morfología de las colonias bacterianas cultivadas en agar nutritivo se almacenó a 4 ° C hasta su uso para el análisis aislamiento de las bacterias productoras de PHA Se obs. en un matraz Erlenmeyer que contenía 50 mL de aguas residuales Tinción con azul de Nilo A Este tinte en concentraciones de solo 0.5 μg / mL Las muestras se almacenaron a temperatura ambiente Se realizaron diversas pruebas bioquímicas en bacterias productoras de PHB seleccionadas Después de 72 h de incubación a 37 ° C El efluente se filtró través de la tela de muselina y luego con papel de filtro Repetición de pulso de 1 s, ancho espectral de 10,330 Hz y 65,536 puntos de datos Estimación de la presencia de PHA en colonias viables Se centrifugó a 8000 rpm durante 15 min disolvió 1 g de muestra de lodo Se siguió la utilización fermentativa de varios carbohidratos durante 48 horas a 37 ° C inoculando El extracto celular se centrifugó a 12000 rpm durante 30 min se aplicó una solución alcohólica al 0,02% de negro B

3. Aproximadamente el 35% de las bacterias aisladas produjeron PHA RESULTADO Y DISCUSIÓN CONCLUSIÓN Un total de 42 aislamientos mostraron una coloración negro-azul cuando se tiñeron Se probó el agua residual barata de la industria del cartón como fuente de carbono para producir PHA Un total de 15 aislamientos mostraron un resultado positivo con la tinción de azul Nilo A Aislamiento y selección de bacterias productoras de PHA El PHA de los aislados se extrajo mediante el método de hipoclorito y cloroformo Los aislados bacterianos NAP11 y NAC1 pueden considerarse como cepas potenciales para la conversión de aguas residuales de la industria del cartón en PHB Los aislados NAP11 y NAC1 mostraron máxima producción de PHA 79.27% y 77.63% Producción, extracción y estimación de PHA con aguas residuales de la industria del cartón como única fuente de carbono La materia orgánica de los desechos y las aguas residuales tiene altos valores de DBO y DQO El licor crudo apoyó la producción de solo 0.43 g / L de PHA Los aislamientos NAP11 y NAC1 pueden considerarse buenos candidatos para la producción industrial de PHB a partir de aguas residuales de la industria del cartón.Enterococcussp. y Brevundimonassp. Se cuantificó el PHA extraído de aislados seleccionados y se compararon sus eficiencias con el estándar Los aislados seleccionados NAP11 de lodo de pulpa han producido 79,27% p / p de PHA NAP11 y NAC1 se encontró que eran Enterococcussp., Y Brevundimonassp., Respectivamente Las especies predominantes encontradas en las aguas residuales crudas fueron Enterococcushirae, Enterococcusfaecium y Enterococcusfaecalis PHA era alta (40,3% del peso de células secas (DCW )), condiciones bajas en nitrógeno (45,1% DCW) y bajas en fósforo (54,2% DCW) Caracterización morfológica y bioquímica de aislados seleccionados Se observó el PHA obtenido a partir de NAP11 y NAC1 tiene propiedades similares al de PHB estándar Los espectros de H RMN de los PHA extraídos de Enterococcussp. NAP11 Los PHA extraídos de Brevundimonassp. NAC1 Los espectros de H RMN de las muestras y el estándar son casi idénticos Análisis de polímeros por espectroscopia de H-RMN Espectroscopía Infrarroja por Transformada de Fourier (FTIR) El polímero extraído de NAP11 y NAC1 se utilizó para registrar los espectros de IR en el rango de 4000 a 600 cm-1 Las bandas de absorción a 2932 y 2954 cm-1 se deben a las vibraciones de estiramiento C – H de los grupos metilo, metileno Los resultados de TGA de NAM5 mostraron que la Tmes 171,33 ° C y la entalpía de la fusión de PHA es 85,56 J / g Análisis termogravimétrico (TGA) El PHB se metanolizó en presencia de ácido sulfúrico y metanol El 3HB metanólico se analizó luego por GC-MS Pico predominante de éster metílico del dímero 3HB a los 13,63 a 13,667 min El peso molecular de PHB obtenido a partir del aislado NAP11 es de 256 kDa y del aislado NAC1 es de 242 kDa Análisis GC-MS de PHA extraído