1 / 64

นางสาวดรุณรัตน์ แก้วมูล รหัสนักศึกษา 51312305 สถานที่ทำงาน โรงพยาบาลศิริราช

นางสาวดรุณรัตน์ แก้วมูล รหัสนักศึกษา 51312305 สถานที่ทำงาน โรงพยาบาลศิริราช ภาควิชานิติเวช สาขาวิชานิติพิษวิทยา ตำแหน่ง ผู้ปฏิบัติงานวิทยาศาสตร์การแพทย์. อาจารย์ที่ปรึกษา อาจารย์ ดร. ศุภชัย ศุภลักษณ์นารี. Long-term stability of various drugs and metabolites in urine, and

wyatt
Download Presentation

นางสาวดรุณรัตน์ แก้วมูล รหัสนักศึกษา 51312305 สถานที่ทำงาน โรงพยาบาลศิริราช

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. นางสาวดรุณรัตน์ แก้วมูล รหัสนักศึกษา 51312305 สถานที่ทำงาน โรงพยาบาลศิริราช ภาควิชานิติเวช สาขาวิชานิติพิษวิทยา ตำแหน่ง ผู้ปฏิบัติงานวิทยาศาสตร์การแพทย์

  2. อาจารย์ที่ปรึกษา อาจารย์ ดร. ศุภชัย ศุภลักษณ์นารี

  3. Long-term stability of various drugs and metabolites in urine, and preventive measures against their decomposition with special attention to filtration sterilization.

  4. ความคงตัวระยะยาวและMetabolite ของยาในปัสสาวะและมาตรการป้องกัน ไม่ให้ยาเกิดการสลายตัวโดยเฉพาะด้วย การกรองแบบปราศจากเชื้อ

  5. Author • Kei Zaitsu • Akihiro Miki • Munehiro Katagi • Hitoshi Tsuchihashi

  6. ปัญหาในการตรวจวิเคราะห์ยาและสารเสพติดในสิ่งส่งตรวจประเภทปัสสาวะปัญหาในการตรวจวิเคราะห์ยาและสารเสพติดในสิ่งส่งตรวจประเภทปัสสาวะ -การปนเปื้อนแบคทีเรียและการเสื่อมสภาพของปัสสาวะ - วิธีการเก็บรักษาสภาพสิ่งส่งตรวจประเภทปัสสาวะ - การสลายตัวของยาและสารเสพติดในปัสสาวะ การพัฒนาวิธีการเก็บสิ่งส่งตรวจประเภทปัสสาวะเพื่อตรวจวิเคราะห์ยาและสารเสพติด - Aseptic Collection Kit - การเติม Sodium azide (สารกันบูด) - อุณหภูมิ

  7. ความเป็นมา ผู้ต้องหา/ผู้เสียหาย มีสิทธ์ร้องขอให้มี การตรวจวิเคราะห์ซ้ำ

  8. การตรวจวิเคราะห์ซ้ำ ครั้งแรก = ครั้งหลัง ผลการตรวจวิเคราะห์น่าเชื่อถือ

  9. การตรวจวิเคราะห์ซ้ำ ครั้งแรก=ครั้งหลัง ผลการตรวจวิเคราะห์ไม่น่าเชื่อถือ

  10. Forensic Urine sample Unknown Drug / Concentration Contaminate More/Less Infection/natural Collect Non aseptic Transport Expose to ambient temperature

  11. Expose to ambient temperature Effect bacteria ผลการตรวจ ครั้งแรก = ครั้งหลัง

  12. การตรวจวิเคราะห์ซ้ำ ครั้งแรก=ครั้งหลัง ผลการตรวจวิเคราะห์ไม่น่าเชื่อถือ Critical Cut off

  13. 2 1 ng / ml 1

  14. Drug • Methamphetamine (MA) • Cocaine (COC) • Estazolam (EZ) • 6-acetylmorphine (6AM) • 7-aminoflunitrazepam (7AF) • Amphetamine (AP) • Nitrazepam (NZ)

  15. Drug detected in urine unchanged forms MA COC EZ

  16. Drug metabolites of grate forensic proof of intake of their parent drugs AP 6AM and 7AF

  17. Drug readily decomposed by bacteria indicator of bacteria propagation NZ

  18. Drug common ester-type drug และ metabolite ที่จะ hydrolyzed ได้ COC and 6AM

  19. Shimadzu LCMS-QP2010 HPLC quadrupole mass spectrometer

  20. Experimental

  21. เก็บปัสสาวะจากอาสาสมัคร 24 คน ชาย =12 หญิง =12 (18 – 58 ปี) ตรวจนับจำนวน bacteria Standard Methods of Analysis in Health Scienc

  22. Sample หญิง 29 ปี 10,000,000 cell ชาย 27 ปี 1900 cell ปนเปื้อนน้อย ปนเปื้อนรุนแรง

  23. Sample ความเข้มข้น 500 ng/mL • MA • AP • NZ • EZ • 7AF • COC • 6AM

  24. Sample กรอง 25˚C NaN3 0.5 wt% 6 เดือน MA AP - NZ - EZ - 7AF - COC - 6AM 4˚C กรอง+NaN3 -20˚C ไม่ใส่ เฉพาะ EZ, NZ และ 7AFเก็บไว้ในที่มืด

  25. ชุดกรองปัสสาวะปราศจากเชื้อชุดกรองปัสสาวะปราศจากเชื้อ

  26. ทดสอบประสิทธิภาพชุดกรองปัสสาวะปราศจากเชื้อทดสอบประสิทธิภาพชุดกรองปัสสาวะปราศจากเชื้อ ปัสสาวะ 24 คน กรองด้วยชุดกรอง LB (Luria-Bertani) media ไม่พบ Bacteria

  27. Sample IS 10 ug/mL DBA ปริมาณ 30 ul ปัสสาวะ 600 ul กรองผ่าน membrane 0.45 um

  28. Results

  29. SelectivityTable 1.doc Fig 2 obtained by the automated on-line extraction LC–MS of seven drugs and metabolites in urine at 500 ng/mL each

  30. Stability of MA and AP Fig. 3. Time-course changes in the concentrations of MA and AP in the severely contaminated urine under various storage conditions ((●) with filtration, at 25 °C; (♦) with NaN3, at 25 °C; (■) without any preservative measures, at 25 °C; (○) with filtration, at 4 °C; () with NaN3, at 4 °C; (□) without any preservative measures, at 4 °C).

  31. Stability of MA and AP AM ลดลง 44 % MA ลดลง 32 % Fig. 3. Time-course changes in the concentrations of MA and AP in the severely contaminated urine under various storage conditions ((●) with filtration, at 25 °C; (♦) with NaN3, at 25 °C; (■) without any preservative measures, at 25 °C; (○) with filtration, at 4 °C; ( ) with NaN3, at 4 °C; (□) without any preservative measures, at 4 °C).

  32. ยับยั้งการสลายตัวของMAและAMยับยั้งการสลายตัวของMAและAM aseptic collection kit NaN3

  33. ศึกษาเพิ่ม เก็บที่ 25C/150 วัน 5 ราย 1 ราย MA 60 % AM 23 % 4 ราย ไม่มีการเปลี่ยนแปลง

  34. ยับยั้งการสลายตัวของสารยับยั้งการสลายตัวของสาร aseptic collection kit NaN3

  35. ทดสอบ MA เปลี่ยนฟอร์มเป็น AM ร่างกายรับ MA เข้าไป AM Enzyme

  36. ศึกษาเพิ่ม ความเข้มข้น 500 ng/mL LC-MS No trace AM • MA เก็บที่ 25˚C 30 วัน

  37. Stability of MA and AP การลดลงของ MA และ AM เกิดจาก Bacteria ทำปฏิกิริยา reductive กับ Nitrogen biological แยก carbon – carbon bonds Amine

  38. Stability of MA and AP ดังนั้นการสูญเสีย MA และ AM เป็นไปได้ว่าเกิดจากการ Break carbon – carbon bonds โดย Bacteria

  39. ผลการวิจัย Clauwaert et al 3,4-methylenedioxy derivatives of MA and AP Urine without preservative room temperature MA and AP มีความคงตัวอยู่ได้ถึง 21 weeks

  40. Stability of NZ and EZ Fig. 3. Time-course changes in the concentrations of NZ and EZ in the severely contaminated urine under various storage conditions ((●) with filtration, at 25 °C; (♦) with NaN3, at 25 °C;(■) without any preservative measures, at 25 °C; (○) with filtration, at 4 °C; () with NaN3, at 4 °C; (□) without any preservative measures, at 4 °C).

  41. Stability of NZ and EZ -20˚C / 150 วัน /All NZ and EZ ไม่เปลี่ยนแปลง ปนเปิ้อนรุนแรง /25˚C / 14 วัน / no preserve ตรวจไม่พบ NZ ปนเปิ้อนเล็กน้อย/ 25˚C / 14 วัน / no preserve NZ ค่อยๆลดลงช้าๆ ช้ากว่า 5 เท่า

  42. Oxygen-sensitive enzyme จาก Bacteria จะทำปฏิกิริยา reducing กับ nitroaromatic compounds amine NZ เป็นสารพวก nitrobenzodiazepienes เปลี่ยนรูปเป็น 7-amino-metabolites โดย bacteria ( bacteria in the gastrointestinal tract reduction nitrobenzene ) Stability of NZ and EZ

  43. Stability of NZ and EZ detected 7- aminonitrazepam in all the samples in which losses of NZ were detected.

  44. Stability of NZ and EZ • Robertson and Drummer reported NZ was stable up to 24 months when samples were stored at 4 C

  45. ป้องกันการสลายตัวของ NZ aseptic collection kit NaN3

  46. Stability of 7AF Fig. 5. Time-coursechanges in the concentration of 7AF in the severely contaminated urine under various storage conditions (●) with filtration, at 25 °C; (♦) with NaN3, at 25 °C; ( ) with filtration and NaN3, at 25 °C; (■) without any preservative measures, at 25 °C; (○) with filtration, at 4 °C; (♦ ) with NaN3, at 4 °C; ( ) with filtration and NaN3, at 4 °C; (□) without any preservative measures, at 4 °C).

  47. Stability of 7AF - 20˚C / 150 วัน /7AF ไม่เปลี่ยนแปลง ปนเปื้อนรุนแรง/ ปนเปื้อนเล็กน้อย / 150 วัน/ สูญเสีย 7AF เล็กน้อยเหมือนกัน กรอง / สูญเสีย 7AF เล็กน้อยเหมือนกัน NaN3 / สูญเสีย 7AF ปานกลางเหมือนกัน NaN3 + กรอง / ยับย้งการสลายตัวของ 7AF ได้ดีที่สุด

  48. ทดสอบ การ Adsorption 7AF บนผิวหน้าของ Vessel

  49. ทดสอบ Adsorptions 7AF แต่ละความเข้มข้น (250 – 2000 ng/mL) A B C D กรองด้วยชุดกรอง เก็บไว้ 30 วัน

  50. ทดสอบการ Adsorption 7AF ลดลงในประมาณ 100 ng/mL ในทุกความเข้มข้นของสารแต่ละความเข้มข้น (A B C D) 7AF ลดลง ไม่ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของสาร

More Related