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B - La microscopie électronique

B - La microscopie électronique. Améliorations récentes congélation 3D Conditions de qualité le microscope résolution théorique = 0,2 nm résolution biologique = 2 nm. 0,61 . N sin . Le microscope électronique. Résolution = Résolution = 100 résolution MO. Fig 9-21. 0,2 nm.

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Presentation Transcript

  1. B - La microscopie électronique Améliorations récentes congélation 3D Conditions de qualité le microscope résolution théorique = 0,2 nm résolution biologique = 2 nm

  2. 0,61  N sin  Le microscope électronique • Résolution = • Résolution = 100 résolution MO

  3. Fig 9-21 0,2 nm Feuille d ’or en microscopie électronique

  4. Fig 9-22

  5. The Transmission Electron Microscope (TEM)

  6. Siemens 1964

  7. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l’échantillon : fixation, inclusion, coupe, étalement, coloration. Cryo-ultrotomie

  8. Fig 9-23

  9. Fig 9-24

  10. Fig 9-25

  11. Immuno enzymo ME

  12. Fig 9-26

  13. Fig 9-26 Localisation de protéines en ME

  14. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage

  15. Bozzola,JJ2001EncyclpediaNature(fig1)

  16. SEM Block diagram of a typical SEM

  17. MEB ME à balayage

  18. Bozzola,JJ2001EncyclpediaNature(fig3)

  19. Bozzola,JJ2001EncyclpediaNature(fig4)

  20. Fig 9-27

  21. Fig 9-28

  22. Fig 9-29

  23. Fig 9-30

  24. Congélation rapide suivie de microscopie électronique à balayage Fig 9-31

  25. MEB Une puce Une puce

  26. MEBBozzola,JJ2001EncyclpediaNature(fig4)

  27. MEB

  28. MEB Model - 438VPSpecimen = Insect (uncoated)Detector = VPSEMode = Variable PressurePressure = 186 PaOriginal Magnification = 437 XAccelerating Voltage = 25 kV

  29. MEB Model - 438VPSpecimen = Insect LegDetector = VPSEMode = Variable PressurePressure = 104 PaOriginal Magnification = 100 XAccelerating Voltage = 30 kV

  30. Model - 435VPSpecimen = Paper with size 4 laser printDetector = QBSDMode = Variable PressurePressure = 1.87e-001 TorrOriginal Magnification = 1.07 kXAccelerating Voltage = 25 kV MEB

  31. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM)

  32. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets

  33. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique)

  34. Fig 9-32

  35. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation)

  36. Fig 9-33

  37. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation) Cryodécapage

  38. Cryofracture

  39. Cryofracture + décapage

  40. Cryofracture + décapage

  41. Fig 9-34

  42. Elektronenmikroskopische Aufnahme der geschichtet gebauten Zellwand eines Gameten. Das Präparat wurde nach einem von J. E. HEUSER erarbeiteten

  43. Orci,L2002(fig3).jpg Bordure en brosse d'une cellule épithéliale de tubule proximal de rein

  44. La microscopie électronique Conditions de qualité le microscope : résolution = 2 nm l ’échantillon : fixation, inclusion,coupe, étalement, coloration. Congélation Le microscope électronique à balayage Le Microscope Électronique à Haut Voltage (HVEM) Ombrage petits objets gros objets (réplique) Cryofracture (= fracture congélation) Cryodécapage Coloration négative

  45. Fig 9-35 Filaments d’actine en coloration négative

  46. Fig 9-36 (AB)

  47. Fig 9-36 (C)

  48. Structure 3-D de la sous-unité 70 S du ribosome de E coli en TEM (Tomographie Electron Microscopy) Fig 9-37

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