TÉCNICAS BASADAS EN EL GAMMA-INTERFERON EN REBAÑOS CON INFECCIÓN RECURRENTE A M.bovis

1. CONCLUSIONES: En establos con un historial de positividad reiterada a IDTB a lo largo de los años, la IDTB simple muestra limitaciones en la detección de animales con baja respuesta inmunitaria a la tuberculosis, especialmente animales anérgicos. La inclusión en estos establos de la técnica del gamma interferón en paralelo a la IDTB simple, produjo un aumento superior al 1500% en los casos confirmados en laboratorio mediante RT-PCR. Sin la prueba de gamma interferón mas del 60% de estas explotaciones habrían dejado de ostentar la calificación de Positivas, teniendo animales infectados, con el consiguiente riesgo para el resto de ganaderías de la Comunidad. El uso del gamma interferón , constituye una herramienta diagnóstica de gran ayuda en la lucha contra la tuberculosis bovina, demostrando especialmente su idoneidad en establos con infecciones crónicas a tuberculosis. TÉCNICAS BASADAS EN EL GAMMA-INTERFERON EN REBAÑOS CON INFECCIÓN RECURRENTE A M.bovis MARQUÉS PRENDES, S.; GRAU VILA, A.; MÍNGUEZ GONZÁLEZ, O.; DIEZ GALLEGO, M. INTRODUCCIÓN: Uno de los principales problemas con los que se encuentran los programas de erradicación de tuberculosis es la persistencia de la enfermedad en rebaños denominados “positivos históricos o recurrentes”. En este tipo de rebaños la enfermedad se acantona debido a múltiples causas, entre las que destaca la posible existencia de animales anérgicos. En muchas ocasiones la única solución disponible después de varios años de infructuosos intentos de erradicación es la realización de un vaciado sanitario. La autorización para su uso en los Programas Nacionales de Erradicación de tuberculosis bovina (PNETB) de una técnica basada en la detección de gamma-interferón abre nuevas posibilidades de lucha contra la enfermedad, especialmente en este tipo de rebaños. Desde el año 2006, Castilla y León viene aplicando en cumplimiento de los distintos PNETB la técnica del gamma interferón en aquellas explotaciones en las que ,mediante microbiología , se confirme la infección tuberculosa por M.bovis El uso de esta técnica vendrá siempre enmarcado en un análisis individualizado de las explotaciones, de su historial con respecto a la enfermedad, de su localización geográfica y demás circunstancias epidemiológicas especificas de interés , tal y como viene recogido en el “uso estratégico del gamma interferón” en los distintos PNE de la tuberculosis bovina. Así mismo se realiza un análisis de los posibles factores de entrada de la infección en la explotación, mediante la utilización de las bases de datos de movimiento pecuario que registran los flujos comerciales y de reposición de cada explotación de forma individualizada. • MATERIAL Y MÉTODOS: • Se realizó un estudio utilizando los datos de microbiología, intradermotuberculinización simple (IDTB) y gamma interferón , de los años 2007-2008, en 17 explotaciones con positividad reiterada a IDTB a lo largo de los últimos 5 años como mínimo (positivas o recurrentes históricas). • EXPLOTACIONES: • El estudio se realiza sobre 17 explotaciones con un censo analizado ( mayores de 6 meses ) total de 2660 animales. • Las analíticas corresponden en todos los casos a los primeros resultados ( 1º y 2º revisión) tras su inclusión en el programa de gamma interferón, correspondiendo a 27 saneamientos o revisiones ( 1.6 revisiones por explotación ) • Se consideran como “positivos recurrentes “ aquellos con positividades reiteradas a IDTB y con antecedentes a tuberculosis que se remonten como mínimo 5 años atrás. • MUESTREO Y ANALÍTICA LABORATORIAL: • Las muestras de sangre para las analíticas basadas en el gamma interferón se recogen en el marco de las actuaciones de las campañas de saneamiento ganadero y de forma simultánea a la realización de la IDTB en los animales. El uso en paralelo de ambas técnicas, siguiendo las directrices marcadas por el PNETB, implica que todos los animales positivos, tanto a IDTB como a gamma interferón (cuyo punto de corte, 0.05 D.O, es el autorizado en el expediente de registro del kit por el MARM ), son sacrificados en un plazo de 15 días en mataderos de Castilla y León . • Se procede posteriormente a la recogida de muestras especificas para la detección de tuberculosis en bovino (ganglios retrofaríngeos, mediastínicos y bronquiales, así como de lesiones compatibles si se observan en la canal ).Dichas muestras son remitidas al Laboratorio Regional de Sanidad Animal donde se procede al aislamiento mediante cultivo microbiológico (BACTEC-MGIT-960) e identificación de M.bovis por RT-PCR. Posteriormente, se remiten las muestras PCR+ al Laboratorio Europeo de Referencia para la confirmación de la especie y determinación del spoligotipo de la micobacteria aislada. En el presente estudio se utilizará como técnica de referencia para la confirmación de la enfermedad o “gold-standard” la citada RT-PCR. No obstante hay que tener en cuenta que la limitada sensibilidad del cultivo (BACTEC-MGIT-960) previo a la RT-PCR producirá una disminución de los casos tuberculosos confirmados respecto a los reales. RESULTADOS: • Se han recogido muestras de un 77.6% de los positivos a tuberculosis en estas 17 explotaciones. Un 77.4% de los positivos a gamma interferón y un 56.1% en el caso de positivos a IDTB. • El nivel de confirmación laboratorial por PCR+ del conjunto de muestras pertenecientes a positivos a gamma interferón es del 64%. • El nivel de confirmación laboratorial por PCR+ del conjunto de muestras pertenecientes a positivos a IDTB es del 40% • Las muestras de animales sacrificados por su positividad a IDTB , aportan únicamente el 5.6% de los aislamientos positivos, correspondiendo el 94.4% restante a muestras de animales sacrificados exclusivamente por gamma interferón. • En 11 de las 17 explotaciones , no se habrían diagnosticado animales positivos si exclusivamente se hubiera realizado la IDTB simple.