Testování produktů elektroforézou v agarózovém gelu
This presentation is the property of its rightful owner.
Sponsored Links
1 / 20

DNA-Fingerprint PowerPoint PPT Presentation


  • 56 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

Testování produktů elektroforézou v agarózovém gelu. DNA-Fingerprint. 1. 1. Příprava elektroforézní komory. DNA-Fingerprint. 2. 1. Příprava gelové vaničky. 1.1 Přidejte 1 g agarózy k 33 ml TAE- pufru do 100 ml Erlenmayerovy baňky 1.2 Svařte směs v mikrovlnce, potom

Download Presentation

DNA-Fingerprint

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


Dna fingerprint

Testování produktů elektroforézou v agarózovém gelu

DNA-Fingerprint

1


Dna fingerprint

1. Příprava elektroforézní komory

DNA-Fingerprint

2


Dna fingerprint

1. Příprava gelové vaničky

1.1 Přidejte 1 g agarózy k 33 ml TAE- pufru do 100 ml Erlenmayerovy baňky

1.2 Svařte směs v mikrovlnce, potom

protřepejte a znovu krátce povařte

1.3Nechte agarózový roztok zchladnout,

než dosáhne 55 °C (otestujte teplotu na

hřbetu dlaně) a přelijte gel

DNA-Fingerprint

3


Dna fingerprint

DNA-Fingerprint

4


Dna fingerprint

1. Příprava elektroforézní komory

1.4Poté, co gel ztuhne, odstraňte kovové

plíšky z gelovévaničky

1.5Přilijte 270 ml TAE-pufru, abyste

pokryli celý gel

1.6Vyjměte hřebínek

DNA-Fingerprint

5


Dna fingerprint

2. Příprava vzorků pro gelovou elektroforézu

DNA-Fingerprint

6


Dna fingerprint

2. Příprava vzorků pro gelovou

elektroforézu

2.1Vyndejete 6 PCR zkumavek z

termocykleru

2.2Vložte zkumavky do držáků

DNA-Fingerprint

7


Dna fingerprint

DNA-Fingerprint

8


Dna fingerprint

2. Příprava vzorků pro gelovou

elektroforézu

2.3Do každé ze zkumavek z PCR napipetujte10 µl Orange G nanášecího barviva (LD) a promíchejte jemným potřepáváním

DNA-Fingerprint

9


Dna fingerprint

3. Naplnění gelových

jamek

DNA-Fingerprint

10


Dna fingerprint

3. Naplnění gelových jamek

3.1Naneste do gelových jamek zleva doprava:

- 20 µl molecular weight ruler (MWR)

- 20 µl –GMO control s PMM (1)

- 20 µl –GMO control s GMM (2)

- 20 µl vzorku jídla (T) s PMM (3)

- 20 µl vzorku jídla (T) s GMM (4)

- 20 µl +GMO-DNA s PMM (5)

- 20 µl +GMO-DNA s GMM (6)

DNA-Fingerprint

11


Dna fingerprint

4. Průběh elektroforézy

DNA-Fingerprint

12


Dna fingerprint

DNA-Fingerprint

13


Dna fingerprint

4. Průběh elektroforézy

4.1 Zavřete elektroforézní komoru a

spusťte elektroforézu při 120 V

4.2 Elektroforézu zastavte, když se barevná linie přesune 1 cm před konec gelové vrstvy

DNA-Fingerprint

14


Dna fingerprint

5. Zviditelňovánífragmentů DNA

DNA-Fingerprint

15


Dna fingerprint

5. Zviditelňování DNA fragmentů

5.1 Otevřete elektroforézní komoru a

vytáhněte vaničku s gelem!

Pozor, gel je velmikluzký (slijte pufr, dá se opakovaně použít)

5.2 Přeneste gel na barvící podložku,

přidejte 70 ml barvicího roztoku (50x)

a dvě minuty jemně protřepávejte

DNA-Fingerprint

16


Dna fingerprint

5. Zviditelňování DNA zlomků

5.3Po dvou minutách slijte barvící roztok a gel odbarvěte jemným protřepáváním v teplé kohoutkové vodě(40 - 50 °C) po dobu dvaceti minut.Uschovejte barvivo pro opakované použití!

DNA-Fingerprint

17


Dna fingerprint

6. Vyhodnocení

DNA-Fingerprint

18


Dna fingerprint

6. Vyhodnocení

6.1S pomocí měřítka molekulových hmotností (MWR) s následujícími délkami100 bp, 200 bp, 500 bp, 700 bp a 1000 bp identifikujte proužky DNA v gelu

DNA-Fingerprint

19


Dna fingerprint

6. Vyhodnocení

6.2Je vaše testované jídlo geneticky modifikováno?

Připravte si krátké slovní hodnocení vašich výsledků!

DNA-Fingerprint

20


  • Login