实验安全要求

1. 实验安全要求 教师在实验前应明确告知实验室规章制度和实验操作规范要求 实验者严格遵守浙江大学和基础医学实验中的实验室安全规章制度 严禁实验者未经许可操作各类设施和设备 禁止实验者在实验室内饮食 严格按教师的实验操作规范和要求进行实验操作 违反实验室规章制度和上述要求所引发的事故，当事人承担全部责任

2. 体液分布改变在急性失血中的代偿作用 Compensatory effect of body fluid redistribution in acute hemorrhage 陆源 浙江大学医学院

3. 实验目的 1.了解家兔急性失血模型建立的方法 2.了解家兔急性失血期间及停止失血后其动脉血压及血红蛋白浓度的变化 3.掌握家兔急性失血停止后其动脉血压、血红蛋白浓度的变化机理。

4. 1.材料 1.1 实验动物 家兔 1.2 微机生物信号采集处理系统，血压换能器，血球计数仪，放血瓶 。 1.3 20％氨基甲酸乙脂，1000U/ml 肝素，生理盐水。 2.方法 2.1 动脉插管与放血瓶相连，瓶内盛60ml生理盐水并放入肝素0.5ml ，排出放血管道内空气。记下瓶内液体量，调节放血瓶高度，使瓶内液平面距离颈心脏水平约65cm。血压换能器固定于铁支柱上，置与心脏在同一平面，压力换能器输出线接微机生物信号处理系统第1通道，仪器参数：时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz。

5. 65cm (50mmHg)

7. 2.2 氨基甲酸乙酯按1g/kg体重的剂量于耳缘静脉注射麻醉家兔，动物仰卧固定，暴露颈部气管、颈总动脉、颈静脉、分离左侧颈总动脉和两侧颈静脉，各穿一线备用。按1000u/kg体重静注肝素。左颈总动脉远心端结扎，近心端用动脉夹夹住，用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一“Ｖ”字形切口，将动脉套管向心方向插入颈总动脉内，扎紧固定，打开动脉夹。 沿股腹面正中线从腹股沟下缘向膝部切开皮肤4~5cm。分离皮下组织和肌肉。分离股动脉2~3cm，穿线，结扎远心端的血管，近心端用动脉夹夹闭血管。靠近远心端血管结扎线，用眼科角剪开血管直径的1/3，插入血管导管2~4cm，在近心端结扎血管导管。

8. 3.观察项目 3.1 记录正常血压，从颈静脉内取血0.5ml测定Hb浓度测定。 3.2 打开放血装置上的三通阀，使动脉血进入放血瓶，持续失血3分钟后关闭三通阀，终止失血。连续观察放血过程中血压动态变化，于失血停止后即刻、10min、20 min、30 min分别从颈静脉采血0.5ml，测定Hb浓度。

9. 4.结果 4.1 家兔失血前，平均动脉压为90mmHg，血红蛋白浓度为134g/L，急性失血3min后停止失血即刻的平均动脉压为65mmHg，血红蛋白浓度为134g/L，停止失血10、20、30min的平均动脉压和血红蛋白浓度分别为……，见表1和图1。

10. mmHg 100 0 图1 家兔急性失血后动脉血压的变化

11. 5.讨论 1. 家兔大动脉急性失血，其动脉血压并没有直线下降，而是缓慢下降。急性失血使动脉血压下降，血容量减少，在失血的瞬时，通过压力感受性反射和容量感受性反射，阻力血管、容量血管收缩、心脏活动增强以维持动脉血压， 急性失血引起交感-肾上腺髓质系统兴奋，导致儿茶酚胺大量分泌，出现血管的明显收缩。静脉系统属于容量血管，可容纳血液总量的60%~70%。静脉的收缩可以迅速而短暂地增加回心血量[1]。 2. 家兔急性失血停止后，血压逐渐升高，血红蛋白浓度逐渐降低。这说明有液体进入血管使血容量增加。急性失血可引起儿茶酚胺大量分泌，微动脉和毛细血管前括约肌比微静脉对儿茶酚胺更为敏感，导致毛细血管前阻力比后阻力升高更明显，毛细血管灌流不足，流体静压下降，使组织液进入血管，循环血量增加[1]。 3.抗利尿激素、血管紧张素Ⅱ、皮质激素的产生和分泌增加也参与急性失血的代偿[1] 。

12. 参考文献 1. 陈主初.病理生理学.第1版.北京：人民卫生出版社，2001：205～208

13. 实验报告要求 1．题目。 2．署名 作者姓名及单位。 3．实验目的。 4．材料和方法（省略） 主要实验材料，仪器装置连接和仪器参数。 5．观察项目及观察指标。 6．结果 列失血前后的平均动脉压，Hb浓度数据表格。用文字和数据描述实验结果。实验结果曲线剪贴并标注。 7．讨论 失血停止后动脉血压和Hb浓度变化的机制。

14. 思考题 1.测定动脉血压的方法有哪些？各有什么优缺点？ 2.用传感器记录血压应注意哪些事项？ 3.家兔正常血压曲线常有一级、二级、甚至三级波，其形成机制如何？ 4.失血停止后，动脉血压和血红蛋白浓度各发生什么变化？这些变化说明了什么？ 5.机体急性失血期间及失血停止后，机体通过哪些途径进行代偿？ 6.本实验，在家兔进行动脉放血时，动脉血压为什么呈持续缓慢下降？