Sistemul celular imunocompetent

1. Sistemul celular imunocompetent

2. ORGANELE LIMFOIDE După diferenţierea lor în organele limfoide primare, limfocitele B şi T migrează pe calea vaselor sanguine şi limfatice în organele limfoide secundare, care sunt ganglioni limfatici, splina, amigdalele şi ţesutul limfoid ataşat mucoaselor (MALT). Limfocitele imunocompetente care populează organele limfoide secundare sunt celule antigen-reactive. Deci spre deosebire de organele limfoide primare, unde instruirea se face în absenţa antigenului, în organele limfoide secundare prezenţa antigenului este obligatorie. • Limfocitele devin imunocompetente şi • dobîndesc repertoriul de recunoaştere a antigenelor • proprietatea de a deosebi “selful” de “non-self” în absenţa antigenelor din mediul extern. • În timus:proliferează limfocitele T, din care 10% dobândesc caracterul imunocompetent iar restul de 90% sunt distruse. • In măduva roşie la om se diferenţiază :limfocitele B,dar o parte rămân aici, măduva roşie fiind şi un organ limfoid secundar Ţesut adenoid Amigdale Timus Măduva roşie Ganglioni limfatici Spină Plăcile lui Peyer MALT Apendice Ganglioni limfatici ORGANE CENTRALE ORGANE PERIFERICE

3. Circulaţia limfocitelor Ganglioni limfatici

4. Ganglion limfatic Rol de filtru pentru antigenele sosite pe cale limfaticăşi care or fi preluate de CPA

5. Ganglion limfatic - sectiune Sub capsulă se află sinusul subcapsular, marginat de macrofage. Limfocitele şi Ag ajung aici prin intermediul vaselor limfatice aferente. Sinus subcapsular Cortex Capilare Vas limfatic eferent Sinus medular Arteră Venă Vas limfatic aferent Fiecare ganglion are o vascularizaţie proprie. Limfocitele circulante intră în ganglion prin venulele zonei paracorticale şi părăsesc ganglionul prin VLE. Pentru a ajunge din nou în circulaţie trebuie să străbată toată circulaţia limfatică până la vena subclaviculară.

6. Ganglion limfatic Zona medulară conţine LT, LB şi plasmocite dispuse sub formă de cordoane medulare precum şi macrofage. Prin trecerea limfei de la VLA la VLE, Ag sunt fagocitate de macrofegele din zona medulară. Zona paracorticală conţine LT aflate în contact cu CPA. Aria paracorticală > Limfocite T Foliculi limfoizi > Limfocite B Centru germinativ în timpul stimulării imune Zona corticală conţine LB organizate în foliculi limfoizi, care prezintă centrii germinativi.

7. Splina Rol de filtru pentru antigenele sosite pe cale sanguina care or fi preluate de CPA

8. Splina – structură histologică Pulpă roşie Pulpă albă • Pulpa roşie e implicată în distrugerea hematiilor îmbătrânite. • Pulpa albă reprezintă ţesutul limfoid al splinei. Este organizată sub forma unor arii limfoide periarteriolare în jurul arteriolei centrale.

9. Splina Arteriolă centrală Teacă limfocitară periarteriolară Zonă marginală macrofage Pulpă roşie • În zona adiacentă arteriolei – LT • În jurul acestei zone -LB sub formă de foliculi primari şi germinativi • În zona marginală a foliculilor – macrofage, celule dendritice • Splina nu dispune de drenaj limfatic, limfocitele intră şi părăsesc splina prin capilarele arteriolei centrale.

10. Importanţa MALT • Mucoasele reprezintă o arie mare vulnerabilă la colonizarea şi invazia cu diverse microorganisme • Totalul IgA secretor de pe mucoase excede concentraţia IgG serică • Antigenele de pe suprafaţa mucoaselor sunt separate de mediul intern prin bariera epitelială • Pentru a produce un răspuns imun, antigenele trebuie să traverseze epiteliul mucoasei şi să fie preluate şi procesate de celulele prezentatoare de antigen • MALT protejează mucoasele de colonizarea cu agenţi infecţioşi • Este organul ţintă al cercetării în producerea de vaccinuri • Are influenţă asupra imunităţii sistemice • Blochează sensibilizarea alergică. Numărul de celule ale MALT excede cu mult numărul total de celule ale măduvei roşii, timusului, splinei şi a ganglionilor limfatici.

11. MALT este format dinţesutul limfoid ataşat mucoaselor • gastrointestinală (GALT), • respiratorii (BALT) şi • urogenitale • şi reprezintă principala barieră antiinfecţioasă împotriva microorganismelor care pătrund pe cale digestivă, respiratorie sau urogenitală. • BALT este format din foliculi şi alte agregate limfocitare dispuse în sistemul bronşic, mai ales la nielul bifurcaţiilor bronşice. Dispune de o reţea de capilare, arteriole, venule, cu rol de filtru pentru Ag care ajung aici pe cale respiratorie , sau circulatorie. • GALT este alcătuit din plăcile Peyer intestinale şi limfocitele intraepiteliale. • Celulele M sau Owen sunt situate spre lumenul intestinal, au formă de potcoavă cu concavitatea spre plăcile Peyer şi sunt specializate în prelucrarea Ag din intestin.

12. MALT – ţesut limfoid asociat mucoaselor Plăcile lui Peyer

13. Plăcile lui Peyer Celule asemănătoare macrofagelor – celule M sau Owen Lumenul intestinal Arie LT Arie LT Centru germinativ

14. Soarta agentului infecţiosdepinde de calea de pătrundere • direct în circulaţie – va ajunge splină unde va iniţia un răspuns imunitar • prin piele (traumatism, iatrogen, insecte) - va fi transportat de la locul inflamaţiei prin limfă la ganglionii limfatici regionali, care vor servi ca sediu al răspunsului imun • dacă strabate mucoasa digestivă sau respiratorie va ajunge în ţesutul limfoid ataşat mucoaselor (MALT), unde se va produce şi răspunsul imun. O parte din limfocitele implicate în răspunsul imunitar vor migra la alte organe limfoide, astfel ca informaţia antigenică percepută prin MALT va ajunge în întreg organismul. De la organele limfoide o parte a limfocitelor se vor întoarce la MALT. Acesta este homing-ul limfocitar.

15. Limfocit – imunitate Macrofag Monocit PMN Neutrofil Eozinofil Bazofil Mastocit Fagocitoză Prezentarea Ag Fagocitoză Imunitate antibacteriană Imunitate antiparzitară ?Protecţia suprafe- ţelor mucoase? Protecţia suprafe- ţelor mucoase Progen limfoid comun Celulă stem Hematopoetică multipotentă Progen mieloid Celulele implicate în rezistenţa antiinfecţioasă

16. Celule implicate în răspunsul imun • Celule prezentatoare de antigen (CPA) • Limfocite T • Limfocite B Antigenul interacţionează pentru a produce un răspuns imunitar cu:

17. Celulele prezentatoare de antigen (CPA) • procesează şi prezintă AG limfocitelor Th • macrofage profesioniste: • celulele Langerhans din piele • celulele dendritice din ganglionii limfatici şi splină • monocite • macrofage alveolare • celulele Kupfer • microglia • osteoclaste • celule mezangiale renale • Prezintă la suprafaţă MHC II

19. PLC Limfocite T Limfocite B Precursor Comun limfoid T B Th CTL PC Activează limfocitele B şi macrofagele LIMFOCITE T - HELPER Lizează celule Infectate cu un virus LIMFOCITE T CITOTOXICE Produc anticorpi PLASMOCITE Subseturile de limfocite

20. Pâna în anii 1960 nu se cunoşteau funcţiile limfocitelor. Limfocitele T şi B sunt inactive pâna la întâlnirea cu un antigen. Ambele exprimăRECEPTORI PENTRU ANTIGEN L Receptorul limfocitului B este un anticorp legat de membrană - IMUNOGLOBULINĂ DE SUPRAFAŢĂ B Receptorul limfocitului T nu este un anticorp de suprafaţă ci o moleculă distinctă RECEPTOR PENTRU ANTIGEN - TCR T Receptorii pentru antigen ai limfocitelor Fiecare receptor pentru antigen se leagă de un ag diferit Fiecare celulă are o specificitate pentru un singur antigen

21. LIMFOCITELE B • Reprezintă 2-12% din limfocitele circulante. Ele au pe suprafaţa lor markerul CD19 şi antigene MHC de clasa II. • Când LB este stimulat corespunzător prin LT-helper, sau mai rar de antigene timoindependente, el începe să se dividă transformându-se în limfoblaşti care dau naştere la plasmoblaşti, apoi la plasmocite. Toate celulele provenite dintr-un singur LB aparţin unei singure clone celulare, producătoare a milioane de anticorpi identici care vor fi eliberaţi în mediul intern. • Pe suprafaţa LB se găseşte BCR, care este anticorpul ce permite celulelor B să recunoască Ag specifice şi pe care LB îl va produce. • Cele mai multe LB sunt sub control direct al LT-helper care stimulează activitatea lor şi T-supresoare care o deprimă. Există însă şi limfocite timoindependente, care nu necesită cooperarea cu limfocitele T reglatoare fiind stimulate direct de antigen.După stimulare antigenică, limfocitele se diferenţiază, • în afară de plasmocite secretoare de anticorpi, • şi în L B cu memorie, care sunt celule cu viaţă lungă,fiind responsabile de un răspuns umoral rapid la o stimulare ulterioară cu acelaşi antigen.

22. RECUNOAŞTEREA ANTIGENELOR DE LIMFOCITELE B BCR (receptorul pentru ag al limfocitului B) este o imunoglobulină de suprafaţă Imunoglobulinele de suprafaţă a limfocitelor B precum şi anticorpii din ser şi umori se leagă direct de antigenele native

23. Limfocitele T - 69-80% din limfocitele circulante • Limfocitele T helper (Th) - după interacţiunea cu antigenul stimulează • limfocitele B în elaborarea unui răspuns imun umoral în anticorpi • limfocitele Tc pentru obţinerea unui răspuns celular • activează macrofagele. Markerul de suprafaţă a limfocitului Th este molecula CD4+. • Limfocitele T supresoare (Ts) • limitează expansiunea clonală a limfocitelor B şi T stimulate antigenic participând la reglarea intensităţii răspunsului imun (CD8). • Limfocitele T citotoxice (Tc) - stimulate prin antigene care sunt exprimate la suprafaţa celulei gazdă ca, de pildă, celule infeectate cu virusuri, cu microbi cu habitat intracelular sau celule tumorale pe care sistemul imun nu le mai recunoşte ca self. Markerul de suprafaţa este tot CD8+. • Limfocitele Tdh - au pe suprafaţa lor marker CD4+ fiind responsabile de producerea hipersensibilităţii de tip întârziat . Ele secretă după stimulare antigenică limfokine care activează macrofagele ce adăpostesc bacterii cu habitat facultativ sau obligator intracelular.

24. Limfocitele Th – CD4 Limfocite T CD4 / helper REAMINTIM !!!!! TCR Ag  1 MHC II 2  MC / macrofag

25. Limfocite T CD8 citotoxice TCR Ag 2 1  3 MC – celule nucleate

26. RĂSPUNSUL IMUN UMORAL Interrelaţiile dintre limfocitele B şi T

27. ANTICORPII Anticorpii sunt proteine serice care migrează în cîmpul electric cu gamaglobulinele, dar prezenţi şi în alte umori sau secreţii, cu o structură capabilă să le asigure legarea fermă şi specifică de antigen.

28. Ac – molecule bifuncţionale • Fab – situsul de legare cu Ag • Fc – situs citofil (PMN, macrofage) cu efecte biologice secundare STRUCTURA DE BAZĂ A ANTICORPILOR Situs de legare cu antigenul - Fab Antigenul Lanţuri grele Lanţuri uşoare Situs citofil - Fc

29. Lanţurile grele H • gama (g) - IgG • miu (m) - IgM • alfa (a) - IgA • delta(d) - IgD • epsilon(e) - IgE Structura anticorpilor • Lanţurile uşoare • kappa (k) • lambda(l) Fab – situs de legare cu antigenul 2 lanţuri grele identice H 50000-70000 daltoni 2 lanţuri uşoare identice L 25000 daltoni Ig - 150000 H L Regiune balama C Punte disulfurică

30. Tipurile de anticorpi

31. Relaţia dintre structura şi funcţie anticorpilor sub acţiunea pepsinei digestia proteolitică sub acţiunea papainei - NH2 AA 234 H AA 224 H F(ab’)2 2Fab Fc Fc

32. Relaţia epitop - paratop Paratop • Paratopul • situsul de interacţiune cu epitopul • format din regiuni hipervariabile şi variabile ale lanţurilor H şi L • fiecare imunoglobulină conţine doi paratopi identici ce se află în regiunea hipervariabilă a lanţurilor H şi L • anticorpul este bivalent • 1 regiune variabilă VH şi VL • 3 regiuni constante C1,C,2,C3 H şi repsectiv 1 regiune CL

33. Relaţia epitop - paratop

34. Aceste regiuni sunt stabilizate prin punţi disulfurice intracatenare şi se numesc domenii De domeniile CH2 se leagă lanţuri oligozaharidice Regiunea balama - un segment al lanţurilor grele localizat între CH1 şi CH2 şi ea schimbă unghiul dintre Fab şi Fc după legarea anticorpului cu antigenul. Astfel, Fab este perpendicular pe Fc, imaginea tridimensională a imunoglobulinelor amintind de litera T • Fragmentul Fc, situat la extremitatea -COOH terminală a moleculei, poartă • situsuri citofile (prin care unele imunoglobuline se pot fixa de anumite celule ca, de pildă, neutrofile, macrofage, bazofile), • situsuri de fixare a complementului • markerii izotipici şi alotipici al lanţurilor H Regiunea balama Fc

36. În momentul combinării anticorpului cu antigenul, acest unghi se schimbă, molecula luând forma unui Y. Prin această modificare se dezveleşte situsul de combinare al Fc cu factorul C1q al complementului şi se declanşează activarea acestuia pe cale clasică.

37. Imunoglobulina G - reprezintă 70% - 80% din Ig serice. Concentraţia normală este atinsă la vârsta de 5-8 ani 8-16mg/ml. • opsonină specifică • are receptor pt.complement şi PMN • favorizează înglobarea bacteriilor de către PMN • potenţează fagocitoza. • activează complementul pe cale clasică • Clasa IgG cuprinde, în afară de anticorpi opsonizanţi, şi anticorpi neutralizanţi (antitoxine), precipitanţi (precipitine) şi aglutinanţi (aglutinine). • IgG trec prin placentă de la mamă la făt, asigurând rezistenţa antiinfectioasă a sugarului în primele luni după naştere. IgG Porţiune variabilă Punte disulfurică Lanţ uşor Lanţ greu Porţiune constantă

38. IgA 17% din totalul imunoglobulinelor • În ser ca monomer - nu fixează complementul, reacţionează cu antigenele din sânge. AG din intestin care au pătruns prin bariera intestinală şi au ajuns în sânge sunt fixate de IgA şi eliminate prin ficat. • Extravascular - sub formă de dimer - IgA secretor (S-IgA) - în secreţiile epiteliilor (lacrimi, salivă, mucus bronşic etc.) şi la suprafaţa mucoaselor • S - IgA este alcătuită din 2 molecule de IgA, legate printr-un lanţ J (join) glicolipidic şi o componentă secretorie polipeptidică (CS). Componenta secretorie se adaugă dimerului în celula epitelială şi facilitează transportul IgA prin epitelii şi secreţia sa în salivă, lacrimi, lapte şi protejează S - IgA de acţiunea enzimelor digestive. • Fixeazăbacterii şi virusuri prin Fab formând complexe imune şi împiedică astfel fixarea acestor agenţi infecţioşi de celulele epiteliale ale mucoaselor. Această “neutralizare” este cea mai importantă funcţie antiinfecţioasă a S-IgA pe mucoase. • Concentraţia normală de S-IgA este atinsă la vârsta de 10-11 ani, ceea ce explică frecvenţa infecţiilor respiratorii la copii.

39. IgM • IgM se prezintă sub forma unei structuri mari (IgM-macroglobulină) pentamerice cu o GM de 900.000 Da. Cei 5 monomeri de IgM sunt legaţi între ei printr-un lanţ J. • Datorită GM, IgM nu trece prin placentă. • Reprezintă 6-7% din totalul imunoglobulinelor serice. • Concentraţie normală este atinsă la vârsta de 1 an. Timpul de înjumătăţire a IgM este de 6 zile. • În contextul răspunsului imun, IgM este clasa de anticorpi care apare în răspunsul primar. Prezenţa anticorpilor IgM faţă de un anumit agent infecţios indică o infecţie acută, recentă. Mare parte din “anticorpi naturali”, ca de exemplu isoaglutininele de grup (anti-A, anti B), sunt IgM. • IgM are 10 situsuri de combinare cu o configuraţie care permite legarea preferenţială de antigenele corpusculare şi deosebit de eficace în legarea microorganismelor, producând aglutinarea acestora. Prin fixarea complementului se realizează concomitent opsonizarea bacteriilor. IgM activează complementul pe cale clasică favorizând deci şi bacterioliza.

40. Nu fixează complementul • Se găseşte în cantităţi mici în serul persoanelor sănătoase • în concentraţii crescute la persoane alergice • sunt anticorpi citofili, care se leagă prin Fc de receptorii specifici de pe suprafaţa leucocitelor bazofile şi a mastocitelor • În contact cu alergenul specific, care are loc degranularea acestor celule cu eliberarea unor mediatori chimici (histamină, serotonină, leucotriene, prostaglandine), responsabili de manifestările alergice de tip I anafilactic. IgE

41. IgD • IgD a fost evidenţiată ca un anticorp legat de suprafaţa membranei celulare a 90% din limfocitele B. • În ser se găsesc doar urme. • Nu se cunoaşte exact rolul acestei Ig, dar se presupune că ar constitui un receptor pentru antigene la suprafaţa limfocitelor B.

42. Anticorpi faţă de fimbrii, acizi theicoici, capsule Rolul anticorpilor Ataşare Activarea complementului Anticorpi care blochează mecanisme de transport Înmulţire Anticorpi faţă de imunorepelenţi Evitarea fagocitozei Leziunile Anticorpi neutralizanţi Anticorpi faţă De Enzime invazive toxice invazive

43. Sistemul limfatic Vena suclaviculară stângă Ductul toracic Ganglioni limfatici Ganglioni limfatici Vase limfatice