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TNF- and IL-1 inhibit through different pathways IFN- -induced antigen presentation, processing and MHC class II surface expression on astrocytes, but not on microglia. O. Gresser · A. Hein · S. Riese · A. Régnier-Vigouroux Cell Tissue Res (2000) 300:373–382. Andréia, Claudiney e Hugo.
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TNF- and IL-1 inhibit through different pathways IFN--induced antigen presentation, processing and MHC class II surface expression on astrocytes, but not on microglia O. Gresser · A. Hein · S. Riese · A. Régnier-Vigouroux Cell Tissue Res (2000) 300:373–382 Andréia, Claudiney e Hugo
Introdução • Astrócitos e micróglia • 2 populações de céls. gliais do SNC; • Função como APC in vivo: obscura. • Estudos prévios mostraram que: • IL-1 é capaz de inibir a expressão de MHC II induzida por IFN- em astrócitos murinos, mas não na micróglia; • CSF-1 inibe a expressão de MHC II induzida por IFN- na micróglia, mas não em astrócitos de camundongos; • Durante o curso de doenças que afetam o SNC astrócitos e micróglia são expostos à várias citocinas que podem afetar sua competência imunológica e portanto influenciar o curso da doença.
Objetivos Investigar e comparar os efeitos in vitro de duas combinações de citocinas, IFN /IL-1 e IFN-/TNF-, sobre a estimulação de células T primadas e sobre a expressão total e de superfície de MHC II, ICAM-1 e B7-1/2 por culturas de astrócitos e micróglia de camundongo.
Caracterização dos aspectos imunológicos básicos de culturas de astrócitos e micróglia Contraste de Fase Imunofluorêscia Astrócitos (Pureza: 90 – 95%) Anti-GFAP Captação de Dil-ac-LDL Micróglia (Pureza: 99%) Fig.1 - Pureza de culturas de astrócitos e micróglia. GFAP – Glial Fibrilar Acidic Protein (marcador de astrócito); Dil-ac-LDL – liga-se específica// a receptores presentes na micróglia.
Astrócitos Micróglia Expressão constitutiva e iduzida de MHC II, ICAM-1 e B7-1/2em astrócitos e micróglia Fig.2 – Astrócitos e micróglia foram estimulados c/ diferentes doses de IFN- por 48 h. A expressão de MHC II, ICAM-1, B7-1 e B7-2 foi analizada por ELISA.
Tratado c/ IFN- Não-tratado c/ IFN- Apresentação de apamina por astrócitos e micróglia estimulados por IFN- Fig.3 – Astrócitos e micróglia tratados ou não c/ IFN- por 48 h foram incubados por 24 h c/ hibridoma de céls. T específicos p/ apamina em s [ ]s de apamina. EC50 p/ astrócitos = 3.7 0.5 M e p/ micróglia = 5.1 0.9 M. EC50 = [apamina ] necessária p/ se alcançar ½ da resposta máxima.
