Zdravotnická  škola, Hradec Králové
This presentation is the property of its rightful owner.
Sponsored Links
1 / 56

enzymy PowerPoint PPT Presentation


  • 89 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

Zdravotnická škola, Hradec Králové Stredná zdravotnícka škola, Bánská Bystrica. enzymy. klinicko-biochemická diagnostika a metody stanovení. první zmínky již v 18. století, byly spojovány s kvasnými procesy (název - fermenty). 1835, Berzelius. 1860, Pasteur. historie.

Download Presentation

enzymy

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


Enzymy

Zdravotnická škola, Hradec Králové

Stredná zdravotnícka škola, Bánská Bystrica

enzymy

klinicko-biochemická diagnostika a metody stanovení


Enzymy

první zmínky již v 18. století,

byly spojovány s kvasnými procesy

(název - fermenty)

1835, Berzelius

1860, Pasteur

historie

– schopnost sladu štěpit škrob,

první teorie katalýzy

– kvašení způsobeno fermenty,

spojeno s buňkou

en.wikipedia.org/wiki


Enzymy

1878, F. W. Kühne

1926, J. Sumner

historie

zaveden výraz enzym

(en zymé – řecky „v kvasnicích“

– odkud byly poprvé izolovány)

prokázána bílkovinná povaha enzymů

izolací ureázy ze sojových bobů

(první enzym v krystalické podobě)

en.wikipedia.org/wiki


Enzymy

rozvoj poznatků o struktuře enzymů

nastal až v letech 1960-1970,

kdy došlo k zdokonalení analytických metod

(kapalinová chromatografie, rentgenová strukturní analýza)

1986 - i-RNA může mít enzymatickou

(katalytickou) funkci (tzv. ribozymy)

dnes jsou známy tisíce enzymů,

v každé buňce je více než 3000 enzymů

historie


Enzymy

enzym

biokatalyzátor

- katalyzátor biochemické reakce

v živých organizmech, jeho struktura

je zakódována v DNA

biomakromolekula - proteiny

globulární struktura, Mr 104 – 106

jednoduché enzymy

tvořené jen bílkovinou

struktura


Enzymy

složené enzymy

tvořené bílkovinnou (apoenzym)

a nízkomolekulární částí (kofaktor)

pevně vázaný - prostetická skupina

slabě vázaný - koenzym

kofaktory často tvořeny

deriváty vitaminů (např. vit. B)

příklady kofaktorů: NAD+, FAD, koenzym A

kofaktory nedenaturují, určují, jaké atomy či skupiny se v reakci přenášejí

metaloenzymy - v aktivním centru

obsahují funkční kovové ionty (Mo, Cu, Zn, Fe ...)

struktura


Enzymy

reakce se neúčastní

celá molekula,

jen část – nazývá se

aktivní centrum

většinou

1 aktivní centrum

+ regulační místa

kofaktor

substrát

apoenzym

aktivní centrum – prostorové uspořádání aminokyselin (jamka, štěrbina), kam se váže substrát, např. vodíkovými můstky

kofaktory se váží také na aktivní centrum

struktura


Enzymy

stejné vlastnosti

zvyšují rychlost

snižují aktivační energii

neovlivní rovnováhu

srovnání s anorganickými katalyzátory

  • odlišnosti

  • účinnější (stačí menší látkové množství)

  • specifita – enzymy katalyzují jen určitou reakci

  • účinek enzymu lze regulovat

  • pracují za mírných podmínek vnitřního

  • prostředí organizmu


Enzymy vlastnosti

enzymy - vlastnosti

vysoká účinnost

rychlost reakcí vyšší o 6-12 řádů

vysoká specifita

vzhledem k určitému substrátu

- substrátová specificita(např. glukózooxidáza - GOD

– katalyzuje jen oxidaci glukózy, ne jiného sacharidu)

vzhledem k typu reakce – reakční specificita

schopnost katalyzovat reakci

v určitém místě substrátu – regiospecificita

ovlivnění optické aktivity – stereospecificita


Enzymy vlastnosti1

enzymy - vlastnosti

mírné reakční podmínky

teplota obvykle 20-40 °C

tlak 0,1 MPa

pH cca 7

regulace účinku katalýzy

asociace (vznik multienzymových)

komplexů


N zvoslov enzym

názvosloví enzymů

triviální – in

např. pepsin, fibrin

přípona – asa (-áza)

ke jménu příslušného substrátu(sacharasa/-áza)

k označení reakce, tj. působení enzymu

(reduktasa/-áza, transferasa/-áza)


N zvoslov enzym1

klasifikace enzymové komise

(EC-Enzyme Comission)

uvádí označení každého enzymu

čtyřmístným číselným kódem

př. E.C. 1.1.1.27 znamená:

názvosloví enzymů

1

1

1

27

  • 1 na 1. místěoznačuje enzym 1. třídy, tj. oxidoreduktáza

  • 1 na 2. místěje podtřída způsobující oxidaci

  • primární alkoholové skupiny

1 na 3. místěznačí přítomnost

pyridinového koenzymu

27 je pořadové číslo enzymu,

tj. jedná se o laktát-dehydrogenázu


Klasifikace enzym

klasifikace enzymů

dnes je známo přes 3000 různých enzymů,

jsou klasifikovány podle reakcí, které katalyzují

do 6 enzymatických tříd, jež jsou dále děleny

na podtřídy, ty na skupiny a každý enzym

má své pořadové číslo

oxidoreduktázy

katalyzují oxidačně-redukční procesy

(tj. přenos kyslíku, vodíku, elektronů)

transferázy

katalyzují přenos funkčních skupin

(např. -CH3, -NH2, glukózu, fosfát)

z donorů na akceptory


Klasifikace enzym1

klasifikace enzymů

hydrolázy

za účasti vody štěpí vazby vzniklé kondenzací

(hydrolytické štěpení vazby, např. rozklad peptidových,

glykosidických, esterových, fosfodiesterových);

příkladem jsou trávicí enzymy

lyázy (syntázy)

katalyzují odštěpení malých molekul, nebo naopak

jejich vnášení (nehydrolytické štěpení vazeb)

izomerázy

uskutečňují vzájemné přeměny izomerů,

přenos skupin atomů v rámci jedné molekuly

ligázy (syntetázy)

vznik energeticky náročných vazeb za současného

rozkladu látky uvolňující energii, za rozpadu ATP


Rozd len enzym dle m sta p soben

rozdělení enzymů - dle místa působení

intracelulární

většina – jsou uvnitř buňky, ve které vznikly

působí uvnitř buněk, jsou obsaženy

v cytoplazmě nebo buněčných organelách

buněčné trávení – hydrolázy v lyzozomech

mitochondriální enzymy – např. při reakčním

cyklu kyseliny citronové (Krebsův cyklus),

odbourávání mastných kyselin

mikrosomální enzymy – v hladkém

endoplazmatickém retikulu

(detoxikační procesy)

extracelulární

jsou z buněk vylučovány do extracelulárních tekutin

(např. trávicí šťávy)


Rozd len enzym dle formy v skytu

rozdělení enzymů – dle formy výskytu

rozpuštěné

imobilizované

fixované na biologické struktury, např. buněčné membrány

asociované

tvoří multienzymové komplexy

nereaktivní proenzymy (zymogeny)

jsou vyráběny a vylučovány v neaktivní formě,

teprve v místě působení se proteinlýzou přemění

na aktivní formu

izoenzymy

katalyzují stejnou reakci, ale liší se v primární struktuře

bílkovinné části, tedy i fyzikálně-chemickými vlastnostmi

odliší se od sebe elektroforeticky, termostabilitou

a různým vlivem inhibitorů (např. tartarát u ACP)


Teorie katal zy i

teorie katalýzy I

nekatalyzované reakce

probíhají 104 až 106 krát pomaleji, důvodem je jejich

vysoká aktivační energie E*(energie, kterou musí

molekula dosáhnout, aby došlo k chemické reakci)

katalyzované reakce - probíhají ve dvou stupních

  • reakce substrátu s katalyzátorem (enzymem)

  • za vzniku aktivovaného komplexu

1.

+

S

E-S

  • rozpad aktivovaného komplexu na produkt

  • a obnova původního katalyzátoru (enzymu)

2.

+

E-S

P

E

E


Teorie katal zy i1

teorie katalýzy I

rychlost enzymově katalyzované reakce závisí na:

množství substrátu a enzymu

fyzikálně-chemických vlastnostech prostředí

přítomnosti látek ovlivňujících činnost enzymů

(aktivátory a inhibitory)

  • dochází ke snížení aktivační energie

  • a tím ke zrychlení reakce

  • katalyzátory zvyšují rychlost reakce

  • v obou směrech

  • katalyzátor se při reakci nemění a nemá vliv

  • na chemickou rovnováhu reakce


Enzymy

teorie katalýzy II

aktivační energie

nekatalyzované reakce

E1*

snížená aktivační energie

při katalyzované reakci

E2*

reakční koordináta

nekatalyzovaná reakce

katalyzovaná reakce

energie

substrát

(výchozí látka)

substrát

(výchozí látka)

DGreakce

produkt

G-reakcezměna Gibbsovy energie

(vyjadřuje samovolnost reakcí za konst. teploty a tlaku)


Enzymy

teorie katalýzy II

změna Gibbsovy energie

nekatalyzované reakce

DG nekat.reakce

změna Gibbsovy energie

katalyzované reakce

DG kat.reakce

ES

EP

reakční koordináta

nekatalyzovaná reakce

katalyzovaná reakce

volná

energie

(Gibbsova)

substrát

(výchozí látka)

substrát

(výchozí látka)

produkt

ES - komplex enzym-substrát

EP - komplex enzym-produkt


Mechanizmus p soben enzymu

mechanizmus působení enzymu

teorie komplementarity (zámek a klíč)

tato teorie byla formulována r. 1894 Fisherem,

dnes již neplatí, uvádí se jen

pro zjednodušení

účinnost enzymu podmíněna

aktivním centrem

aktivní centrum svým tvarem

a funkčními skupinami umožňuje vazbu

určitého substrátu

enzym (zámek), substrát (klíč)

aktivní centrum umožní účinnou orientaci

reagujících látek


Mechanizmus p soben enzymu1

mechanizmus působení enzymu

teorie indukovaného přizpůsobení

(induced fit) – Koshland, 1959

aktivní centrum

tvaruje se až v kontaktu se substrátem

je tvarově poměrně přizpůsobivé

jeho tvar přesně odpovídá typu substrátu,

katalyzované reakce a obsahuje přesně

rozmístěné reakční skupiny

přirovnává se k „ruce v rukavici“

(tj. změna tvaru rukavice)


Faktory ovliv uj c enzymatick reakce

faktory ovlivňující enzymatické reakce

teplota

se vzrůstající teplotou roste i aktivita enzymů

až do teplotního optima(lidské enzymy 37 °C),

při vyšší teplotě dochází k inaktivaci a degradaci

pH

enzymy mohou přijímat nebo odevzdávat protony,

proto jejich aktivita závisí na pH; největší aktivita

je v oblasti tzv. pH optima, které je charakteristické

pro konkrétní enzym

u většiny enzymů je pH optimum 5-7 (u některých enzymů

se může tato hodnota lišit, např. pepsin 1-2, trypsin 8-11)

množství enzymu a substrátu

fyzikálně-chemické vlastnosti prostředí,

ve kterém reakce probíhá, a přítomnost modifikátorů


Enzymy

teplotní optimum

oblast destrukce enzymu

rel. aktivita

10

20

30

37

40

50

60

t [°C]

faktory ovlivňující enzymatické reakce- teplota


Enzymy

-AMS

pepsin

ALP

ACP

relativní aktivita

0

2

4

6

8

10

12

14

pH

faktory ovlivňující enzymatické reakce- pH


Efektory modifik tory

efektory (modifikátory)

jedná se o látky ovlivňující

enzymatickou aktivitu

aktivátory – pozitivní efektory

látky zvyšující enzymatickou aktivitu; mohou to být

organické látky nebo anorganické ionty (Ca2+, Mg2+, Zn2+)

tyto ionty nejsou pevně vázané na enzym,

jako je tomu u metaloenzymů


Efektory modifik tory1

efektory (modifikátory)

inhibitory – negativní efektory

látky snižující enzymatickou aktivitu

kompetitivní inhibitory (soutěživé - vratné)

- struktura inhibitoru je podobná substrátu,

inhibitor tedy konkuruje substrátu v reakci

nekompetitivní inhibitory (nevratné)- vážou se mimo

aktivní centrum a změní tak jeho vlastnosti

(tvar, rozmístění funk. skupin), funkční skupiny

jsou trvale zablokovány

(kationty těžkých kovů, katalytické jedy)

akompetitivní inhibitory – vážou se až po vazbě enzymu

na substrát, ten se pak nemůže rozpadnout

na produkt a enzym


Kinetika enzymatick ch reakc i

kinetika enzymatických reakcí I

×

[

]

V

S

max

=

v

0

+

]

S

K

[

m

maximální

rychlost

Vmax.

½ Vmax.

KM

Michaelisova konstanta

[S]

koncentrace substrátu

závislost rychlosti enzymatické reakce

na koncentraci substrátu

Rovnice Michaelise a Mentenové:

ověřovali štěpení sacharózy pomocí fruktofuranózy – efekt konst. konc. S

za změn množství enzymu a konst. množství enzymu za změn S; rovnice

vyjadřuje závislost rychlosti enzymatické reakce na koncentraci substrátu

(dosáhne-li substrát dostatečné koncentrace, aby vznikl komplex ES, je další

krok určující rychlost reakce necitlivý k dalšímu zvyšování množství S

(Vmax – enzym nasycen S)


Enzymy

kinetika enzymatických reakcí II

rychlost enzymatické reakce závisí

na koncentraci substrátu

(za konstantní koncentrace enzymu)

Michaelisova konstanta Km(mol/l)

udává koncentraci substrátu, při níž je rychlost reakce

poloviční limitní rychlosti reakce (Vmax)

tato konstanta nezávisí na koncentraci enzymu

je mírou afinity daného enzymu k substrátu

(čím je Km nižší, tím je afinita E k S vyšší)

je to hodnota rozpadu komplexu ES

závisí na koncentraci substrátu, pH, teplotě a modifikátoru

slouží pro odhad koncentrace substrátu užívaného

při stanovení enzymů


Enzymy

kinetika enzymatických reakcí III

v0

kinetická rovnice

0. řádu

kinetická rovnice

I. řádu

[S]

saturační graf

při nízké konc. S nepracují všechna aktivní centra enzymu

a v0 roste s rostoucí konc. S až do obsazení všech aktivních center,

poté reakční rychlost závisí na rychlosti vzniku a uvolnění P,

tedy k měření katalytické aktivity se používá koncentrace substrátu

v nadbytku


Vyj d en mno stv enzymu v biologick m materi lu

vyjádření množství enzymu v biologickém materiálu

nepřímé stanovení

katalytická koncentrace mkat/l

stanoví se produkt enzymatické reakce

většina klinicky významných enzymů


Vyj d en mno stv enzymu v biologick m materi lu1

vyjádření množství enzymu v biologickém materiálu

přímé stanovení

hmotnostní koncentrace mg/l

stanoví se molekula enzymu jako antigen

(imunochemicky)

jen některé enzymy v extrémně malých

koncentracích (např. tumorové markery)

stanoví se i molekuly, které ztratily katalytickou

aktivitu (např. CK-MB)


Katalytick aktivita enzymu

katalytická aktivita enzymu

zavedená jednotka katal, 1 kat [mol/s]

jeden katal představuje katalytickou reakci enzymu,

při které se za jednu sekundu přemění jeden mol

substrátu (v praxi se používají mkat, nkat), u tělních tekutin

je aktivita enzymu vztažena na 1 litr tekutiny, tj. mkat/l

mezinárodní jednotka IU (international unit)

1IU [1mkat/min.]

1[mkat] = 60 [IU]


Metody stanoven katalytick koncentrace enzymu

metody stanovení katalytické koncentrace enzymu

kinetická metoda

(předpokladem je lineární přírůstek produktu

či úbytek substrátu)

průběžně se měří [S], popř. [P], např. po 10 s

řada měření

zjistí se v0 z kinetické křivky

přesná metoda

reakce

měření

reakce

měření

reakce

měření

reakce

měření


Metody stanoven katalytick koncentrace enzymu1

metody stanovení katalytické koncentrace enzymu

metoda konstantního času

(end point)

měří se [P] po proběhnutí reakce

jedno měření

zjistí se průměrná rychlost [P]/ t

méně přesná metoda

reakce

měření


M en katalytick aktivity

měření katalytické aktivity

katalytická aktivita

se nejčastěji měří spektrofotometricky

v závislosti na čase se sleduje A (absorbance)

produktu (která je přímo úměrná jeho koncentraci, viz

Lambert-Beerův zákon)

při měření je důležitá temperace

(teplota se musí pohybovat v teplotním optimu enzymu)

D

D

c

A

=

=

kat

[

]

D

e

×

×

D

t

l

t


Vyu it enzym v klinick biochemii

využití enzymů v klinické biochemii

enzym jako indikátor patologického stavu

při poškození buněk se zvyšuje aktivita

intracelulárních enzymů

v extracelulární tekutině

enzymy jako analytická činidla

Př: glukózaoxidáza pro stanovení

koncentrace glukózy

lipáza pro stanovení triacylglycerolů

ureáza pro stanovení močoviny


Klinicky v znamn enzymy

klinickyvýznamnéenzymy


Lakt tdehydrogen za ld

laktátdehydrogenáza (LD)

  • oxidoreduktáza

  • katalyzuje reakci přeměny kys. pyrohroznové (pyruvátu)

  • na kys. L-mléčnou (laktát)

  • (tj. poslední rovnice anaerobní glykolýzy)

    • LD má 2 podjednotky H (heart) a M (muscle),

    • je to tetramer, tvoří 5 izoenzymů:

      • LD1 (4 podjednotky H)

      • LD2 (3H 1M)

      • LD4 (1H 3M)

      • LD5 (4 podjednotky M)

      • LD3 (2H 2M)

typ enzymu:


Lakt tdehydrogen za ld1

laktátdehydrogenáza (LD)

  • infarkt myokardu, nádorové onemocnění,

  • jaterní onemocnění, hemolytická anemie, leukemie

klin. význam:

fyziol. hodnoty:

do 4,2 kat/l (37 °C)

biol. materiál:

krevní sérum

interference:

  • hemolýza

v buněčné cytoplazmě všech tkání

vysoká aktivita v játrech (LD5), ledvinách, srdci (LD1),

kosterním svalstvu (LD5), erytrocytech a nádorových buňkách

lokalizace:


Alaninaminotransfer za alt

alaninaminotransferáza (ALT)

  • cytoplazmatický enzym

  • játra, ledviny, srdce, kosterní svalstvo, pankreas,

  • slezina a plíce

lokalizace:

  • poškození jater (hepatopatie)- infekční virová hepatitida,

  • infekční mononukleóza (až 20x vyšší aktivita),

  • chronická onemocnění jater

  • poškození svalstva (úrazy, záněty)

  • dekompenzované srdeční vady

klin. význam:

typ enzymu:

  • transferáza

  • katalyzuje přenos aminoskupiny na 2-oxoglutarát

  • za vzniku pyruvátu a glutamátu


Alaninaminotransfer za alt1

alaninaminotransferáza (ALT)

muži <0,75 kat/l

ženy <0,58 kat/l

fyziol. hodnoty:

krevní sérum

biol. materiál:

interference:

  • hemolýza


Aspart taminotransfer za ast

aspartátaminotransferáza (AST)

  • 65 % v cytoplazmě (cytoplazmatický izoenzym)

  • 35 % v mitochondriích (mitochondriální izoenzym)

  • játra, srdce, kosterní svalstvo, ledviny, erytrocyty

lokalizace:

typ enzymu:

transferáza

katalyzuje přenos aminoskupiny na 2-oxoglutarát

za vzniku oxalacetátu a glutamátu


Aspart taminotransfer za ast1

aspartátaminotransferáza (AST)

<0,58 kat/l (37 °C)

fyziol. hodnoty:

biol. materiál:

sérum, krevní plazma

interference:

hemolýza

  • onemocnění srdce - nekrózy provázející infarkt myokardu

  • onemocnění jater- infekční hepatitida (AST<ALT),

  • toxická forma hepatitidy (AST>ALT)

  • onemocnění kosterního svalstva: úrazy,

  • degenerativní svalové onemocnění

  • poměr AST/ALT – tzv. De Ritisův koeficient

  • pro infarkt myokardu

  • - do 0,7 (nekomplikovaný lehký průběh)

  • - nad 0,7 – nekróza, dále tento poměr

  • určí závažnost léze hepatocytů

klin. význam:


G glutamyltransfer za gmt

g-glutamyltransferáza (GMT)

  • játra, epitel žlučových cest, ledvinové tubuly

lokalizace:

  • jaterní onemocnění (poruchy cytoplazmatické membrány),

  • výrazné zvýšení aktivity GMT při poškození jater

  • alkoholem (cirhóza, steatóza jater)

  • maligní nádorová onemocnění – karcinomy pankreatu, jater

klin. význam:

<1.20 kat/l

fyziol. hodnoty:

biol. materiál:

krevní sérum, plazma (protisrážlivé činidlo EDTA)

transferáza

katalyzuje přenos -glutamylového zbytku na jiný peptid

typ enzymu:


Kreatinkin za ck

kreatinkináza (CK)

  • cytoplazma a mitochondrie buněk kosterního svalstva,

  • srdce a mozku

lokalizace:

typ enzymu:

  • transferáza

  • katalyzuje vratnou fosforylaci kreatinu

    • za vzniku kreatinfosfátu a ADP (dle potřeb organizmu)

    • je aktivována Mg 2+ ionty

  • izoenzymy CK:

    • tvořen ze dvou podjednotek:

      • svalové M (muscle)

      • mozkové B (brain)

    • CK-MM: svalový, obsažen v kosterním svalstvu

    • CK-MB: srdeční (myokardní) hlavně v srdci

    • CK-BB: mozek

  • u zdravých osob v séru 95 % CK-MM

  • a 5 % CK-MB (CK-BB) se nevyskytuje


Enzymy

kreatinkináza (CK)

  • ♂ <3.2 kat/l (37 °C)

  • ♀<2,4 kat/l (37 °C)

  • CK-MB 6 % celkové aktivity CK

fyziol. hodnoty:

biol. materiál:

krevní sérum, plazma (heparin)

biologický CK-MB mass (g/l) – hmotnostní koncentrace celého proteinu,

na rozdíl od běžného principu stanovení katalytické konc.

CK MB je stanovení hmotnostní koncentrace CK MB mass

v plazmě specifické právě pro izoenzym CK MB

stanovováno u infarktu myokardu

klin. význam:

  • onemocnění srdce: infarkt myokardu: po 4-8 hod. dochází

  • ke zvýšení aktivity CK-MB (důsledek nekrózy srdečního svalu)

  • k normálním hodnotám se vrací po 3-5 dnech;

  • pro diagnózu IM nemá význam celková aktivita CK,

  • protože převládá CK-MM, stanovuje se proto CK-MB

  • onemocnění svalů: úraz, zánět - zvýšená aktivita CK-MM

  • onemocnění CNS: aktivita CK-BB se zvyšuje úměrně

  • s poškozením CNS


Alkalick fosfat za alp

alkalická fosfatáza (ALP)

  • izoenzymy ALP se nacházejí ve všech tkáních,

  • jsou složkou buněčných membrán

lokalizace:

  • produkován osteoblasty při kostní mineralizaci

  • cholestáza - při stagnaci žluči (uzavření žlučových cest),

  • ALP ve žluči až 100x vyšší než v séru

  • nádorová onemocnění jater – výskyt atypických forem ALP

  • zánětlivá střevní onemocnění

  • kosterní procesy spojené s vyšší aktivitou osteoblastů

klin. význam:

  • děti (1-10 let) 1,10-6,20 kat/l

  • děti (10-15 let)1,40-7,50 kat/l

  • dospělí 0,70-2,20 kat/l

fyziol. hodnoty:

biol. materiál:

krevní sérum, plazma (heparin)

typ enzymu:

  • hydroláza

  • v alkalickém prostředí katalyzují hydrolýzu organických

  • monoesterů kyseliny fosforečné

    • ALP má 3 izoenzymy:

      • placentární

      • střevní

      • izoenzym v játrech, kostech a ledvinách


Kysel fosfat za acp

kyselá fosfatáza (ACP)

typ enzymu:

  • hydroláza

    • katalyzuje v kyselém prostředí odštěpení fosfátu z organic.

    • esterů kyseliny fosforečné, ACP má pH optimum 5-6

    • izoenzymy - dle rezistence k tartarátu

      • tartarát stabilní – kostní a trombocytární izoenzymy

      • tartarát labilní – prostatický izoenzym

  • nejvyšší aktivita ACP je v prostatě, kostech, játrech, slezině,

  • erytrocytech a trombocytech

lokalizace:

  • karcinom prostaty: zvýšená aktivita prostatického ACPp

  • metastáze zhoubných nádorů do kostí

  • rozsáhlé trombózy a embolie

  • zvýšená aktivita příštitných tělísek

  • produkován osteoklasty při kostní resorpci

klin. význam:

  • ♂ <108nkat/l (37 °C)

  • ♀< 92 nkat/l (37 °C)

  • prostatický izoenzym ACPp ♂ <43 nkat/l (37 °C)

fyziol. hodnoty:

krevní sérum, plazma (EDTA), kostní dřeň

(stabilizace séra na pH 6 – 10% kys.octovou nebo NaHSO4)

biol. materiál:


A amyl za a ams

a-amyláza (a-AMS)

  • pankreat (pankreatický izoenzym)

  • slinné žlázy (slinný izoenzym)

lokalizace:

  • akutní zánět pankreatu, zánět příušních žláz,

  • onemocnění jater, nádorová onemocnění,

  • ledvinové nedostatečnosti

klinický význam:

  • v séru: 0,47-1,67 kat/l

  • v moči: <7,67 kat/l

  • pankreatický izoenzym

    • v séru: 0,22-0,88 kat/l

    • v moči: <5,8 kat/l

  • fyziol. hodnoty:

    krevní sérum, plazma (heparin), moč

    interference: hemolýza

    biolog. materiál:

    typ enzymu:

    hydroláza

    katalyzuje (za přispění vody a aktivací ionty Ca2+ a Cl-)

    štěpení -1,4-glukosidických vazeb škrobu a glykogenu


    Lip za lps

    lipáza (LPS)

    • pankreatická lipáza – vylučována pankreatem do duodena

    • jaterní lipáza

    • lipoproteinová lipáza – tvořená v cévním endotelu

    • lipáza – citlivá na hormony v tukových tkáních

    lokalizace:

    • onemocnění pankreatu

    klin. význam:

    • v séru <3,2 kat/l (turbidimetrické stanovení)

    • v séru <1,00 kat/l (fotometrické stanovení)

    fyziol. hodnoty:

    krevní sérum, plazma

    biol. materiál:

    typ enzymu:

    • hydroláza

    • katalyzuje hydrolýzu triacylglycerolů v tenkém střevě

      • na 1. a 3. uhlíku glycerolu, nutná přítomnost žluči a iontů Ca2+

      • sekreční enzym


    Cholinester za chs

    cholinesteráza (CHS)

    lokalizace:

    • vzniká v hepatocytech, je ukazatelem proteosyntézy

    • snížená aktivita:

      • onemocnění jater (např cirhóza)

      • nedostatek bílkovin v potravě (proteinová malnutrice)

      • otravy organofosfáty

      • zvýšená aktivita:

      • nekrotický syndrom

    klin. význam:

    • v séru: 87-190 kat/l

    fyziol. hodnoty:

    krevní sérum, plazma

    biol. materiál:

    typ enzymu:

    • hydroláza

      • skupina enzymů hydrolyzujících štěpení esterů cholinu


    Dynamika enzymatick ch aktivit p i infarktu myokardu

    dynamika enzymatických aktivit při infarktu myokardu

    relativní

    aktivita

    (koncentrace)

    myoglobin

    100

    CK

    AST

    10

    LD

    1

    5

    0

    1

    2

    3

    4

    6

    7

    8

    9

    10

    dny po IM

    pro srovnání je uveden plazmatický myoglobin užívaný pro včasný záchyt IM


    Enzymy

    1. Bílkovinná část enzymu se nazývá (8)

    2. Nebílkovinná část enzymu se nazývá (8)

    3. Nebílkovinná část enzymu vázaná slabou

    vazbou se nazývá (7)

    4. Nebílkovinná část enzymu vázaná pevnou

    vazbou se nazývá (11) . . . . . . skupina

    5. Biokatalyzátory se též nazývají (6)

    6. Funkční část enzymu se nazývá (7)

    ……. centrum

    7. Látky urychlující reakci se nazývají (10)

    8. Látky zpomalující či zastavující reakci

    se nazývají (10)

    9. Jedna z druhů inhibicí (12)

    10. Jednotka aktivity enzymu definovaná

    jako přeměna 1 molu látky za sekundu

    se nazývá (5)

    11. Jednotka aktivity enzymu vztažená

    na objem tekutiny (6)

    12. Jedna z metod stanovení enzymů (8)

    13. Jedna z metod stanovení enzymů (9)

    14. Enzymy přenášející aminoskupinu

    na ketokyseliny se nazývají (12)

    15. Zkratka ALT je (6) ……aminotransferáza

    16. Zkratka AST je (8) ……aminotransferáza

    17. Zkratka konstanty, která udává koncentraci substrátu, při níž je rychlost reakce poloviční

    limitní rychlosti reakce (2)

    18. Při koncentracích vyšších než Michaelisova konstanta se reakce chová jako reakce

    - kolikátého řádu(1),tj. rychlost reakce se stává nezávislá na koncentraci substrátu


  • Login