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寻找:天然的基因工程. 农杆菌是一种生活在土壤中的微生物能侵染双子叶和裸子植物 , 农杆菌体内有 Ti 质粒 , 当植物受伤时 , 农杆菌会被植物分泌的酚类化合物所吸引而来 , 把自己的 Ti 质粒转移并整合到植物的 DNA 上去 , 并有 8 个左右的基因在植物细胞内表达 . 因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系,被誉为“自然界最小的遗传工程师”. 含重组质粒的农杆菌. 目的基因. 重组 质粒. 农杆菌. 导入. 筛选. 质粒. 离体的植物细胞. 愈伤组织. 胚状体. 转基因植物. 工具? 工具酶?. G. A. P. P. P. P.
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寻找:天然的基因工程 • 农杆菌是一种生活在土壤中的微生物能侵染双子叶和裸子植物 ,农杆菌体内有Ti质粒,当植物受伤时,农杆菌会被植物分泌的酚类化合物所吸引而来,把自己的Ti质粒转移并整合到植物的DNA上去, 并有8个左右的基因在植物细胞内表达.因此,农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系,被誉为“自然界最小的遗传工程师”
含重组质粒的农杆菌 目的基因 重组 质粒 农杆菌 导入 筛选 质粒 离体的植物细胞 愈伤组织 胚状体 转基因植物 工具? 工具酶?
G A P P P P P P P P P P P P A T 2 3 限制酶切割的是哪个部位的键? 1 C T T A T A C G
质粒(最常用的载体) 什么是质粒 • 存在于细菌以及酵母菌等生物中 • 细胞染色体外能自主复制的双链环状DNA分子 • 具有多个限制酶切点,以便与目的基因连接。 • 常有抗生素抗性基因,使细菌具有抗药性(可作标记基因)
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GATCT CTAGA GATCC A T G CCTAG TCTAG AGATC A T G 3’ 5’ GGATCC BamHI CCTAGG 3’ 5’ TCTAGA XbaI AGATCT AGATCT BglII TCTAGA
目的基因 G AATTC CTTAA G G AATTC GAATTC G CTTAA CTTAAG 目的基因 限制酶切割 GAATTC GAATTC CTTAAG CTTAAG 限制酶切割 质粒
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请选择有关的酶进行切割。下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请选择有关的酶进行切割。