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食品微生物感染疾病 II Foodbrone Microbial Infections II

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第五部份:食品與病害. 食品微生物感染疾病 II Foodbrone Microbial Infections II. 黃顯宗 東吳大學 M202. 教學目標. 瞭解食品中微生物感染的疾病 腸炎弧菌以其他. 腸炎弧菌 Vibrio parahaemolyticus. 1950 年在日本發現,首宗發現, 272 病人, 20 人死亡 最初命名為 Pasteurella haemolyticus , 1963 年列為是弧菌 海水生,夏天多,冬天隱存於泥沙等附著物上;海產多帶有此菌,台灣許多非海產也有發現. 腸炎弧菌 Vibrio parahaemolyticus.

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Presentation Transcript
slide2
教學目標
  • 瞭解食品中微生物感染的疾病
    • 腸炎弧菌以其他
vibrio parahaemolyticus
腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticus
  • 1950年在日本發現,首宗發現,272病人,20人死亡
  • 最初命名為Pasteurella haemolyticus,1963年列為是弧菌
  • 海水生,夏天多,冬天隱存於泥沙等附著物上;海產多帶有此菌,台灣許多非海產也有發現
vibrio parahaemolyticus1
腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticus
  • 在日本約半數細菌性中毒的菌體引起,台灣也是非常重要
  • 臨床的VP菌95%以上是KP+食物中的VP菌只有約1%是KP +
  • KP +是Kanagawa phenomenon指在Wagatsuma agar上有beta溶血,有耐熱的溶血素,TDH, Thermostable direct hemolysin
vibrio parahaemolyticus2
腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticus
  • TDH可耐攝氏一百度的高溫,有心臟毒性,亦有腸毒性,腸毒性比霍亂毒素弱
  • 除TDH外,尚有許多種異型,不過耐熱性較差,如TDH-related hemolysin, TRH
  • 少數KP- 可以引起腸炎
  • 尚有其他毒素如其他非耐熱溶血素、死亡毒素等
  • Lipopolysaccharides (LPS)也具有毒性
  • Urease
  • Type III secretion system
  • 生長需要0.5~10% NaCl,3%最適,37度最適生長,有些可在低溫生長
  • 潛伏期15~18小時或更短,症狀:發熱、腹痛、下痢或下血痢、嘔吐等
typing of old o3 k6
Typing of Old O3:K6

M R A3A3 A3 A3 A1 A1 A3 M M A2 A3

typing of new o3 k6
Typing of New O3:K6

M I5 I6 I7 I8 I1 I1 I4 I2 I3

genome of new o3 k6
Genome of New O3:K6

http://www.biken.osaka-u.ac.jp/act/images/hondaB.png

slide13
討論
  • 1992開始有霍亂弧菌O139
  • 1996開始有腸炎弧菌O3:K6
  • 為何?
v vulnificus
V. vulnificus 創傷弧菌
  • 傷口感染,食用海產感染,「海洋弧菌」
slide15
創傷弧菌

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Vibrio_vulnificus_01.png

slide16
創傷弧菌

Hsueh et al., 2004

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創傷弧菌

台灣每年感染病人數(cases)與百萬人口的盛行數(prevalence)

Hsueh et al., 2004

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創傷弧菌
  • 存在於台灣的近海海域中
  • 分離弧菌中,創傷弧菌佔5.7%
  • 91%屬於人類致病的biotype I

Hsueh et al., 2004

slide19
創傷弧菌
  • 創傷弧菌為伺機性致病菌,具有強大的致病力
  • 傷口浸泡到海水而進入體內,食用未煮熟的海產而感染
  • 造成原發性敗血症,高燒及寒顫,很快導致休克。傷口感染會導致蜂窩組織炎,有時會有出血性水泡,並可能由表皮發炎向下層蔓延而導致筋膜發炎
  • 腸胃症狀方面症狀則是嘔吐、腹痛或腹瀉
  • 嚴重時會造成死亡,與海產有關的死亡案件中佔95%
slide20
易感染者
  • 酒精性肝硬化。
  • 原有肝病(包括原因不明的肝硬化),以及慢性肝炎。
  • 酗酒,但沒有肝病紀錄。
  • 遺傳性血色(鐵)沉著病
  • 有慢性疾病,包括糖尿病、風濕性關節炎、地中海型貧血、慢性腎衰竭、淋巴瘤。
slide21
創傷弧菌感染台美有別

http://www.virginmedia.com/homefamily/fooddrink/food-poisoners.php?ssid=4

slide22
其他致病性弧菌
  • V. mimicus
  • V. fluvialis
  • V. furnissii
  • V. hollisae
  • V. vulnificus 創傷弧菌
  • V. damsela
tcbs thiosulfate citrate bile salts sucrose agar
TCBS (Thiosulfate-Citrate-Bile Salts-Sucrose) Agar
  • 弧菌檢驗的標準培養基
  • Sucrose的利用與否

http://www.troybio.com/images/Product_Images_BBL/TCBS-VCHO.gif

aeromonas
Aeromonas
  • 在水、汙泥、污水等處常常見到
  • 部份能在冰箱中生長,如A. hydrophila
  • 也常在食物中發現,並大量具有溶血性與細胞毒性
  • 活動性的三種:A. hydrophila、A. sobria、A. caviae,前兩種較具有毒性
  • 病人檢體中常會發現,正常人身上亦有
aeromonas2
Aeromonas
  • 產生多種毒素
    • 腸毒素,與霍亂毒素相似與其非相似者
    • Heat-stable enterotoxins
    • Hemolysins,如 Aerolysin
    • Protease 協助毒性變成有活性
plesiomonas shigelloides
Plesiomonas shigelloides
  • 水生,水產食物常見,也發現在動物上
  • 可生長在3% NaCl
  • G- rods,polar flagella,facultatively anaerobic
  • 常與水產食品中毒有關但認為是opportunistic pathogen
campylobacter jejuni
Campylobacter jejuni
  • 早期名為Vibrio fetus,屬於動物病菌,1970年中期才有乳品與水污染中毒發生
  • 主要是兩種C. jejuni,C. coli及大多數中毒為前者(95%)
  • G-,vibriod,microaerophilic,在21%O2下不長,最適生長溫度42度,生長範圍在25~50度,菌體小,生長慢
  • 禽類普遍可分離到
campylobacter jejuni1
Campylobacter jejuni
  • 培養時空氣成份是5%O2、10%CO2、85%N2
  • 在美國地區發生率高,幾乎與Salmonella、Shigella相當
  • 潛伏期2~5天,症狀:發熱,下痢,腹痛,血便
yersinia enterocolitica
Yersinia enterocolitica
  • 以Montreal的統計Yersinia 2.8% Shigella 1.1% Salmonella 4.4% Campylobacter4.3%
  • 80年代非常受到重視
  • 主要寄存在動物上,特別是豬的扁桃腺、豬舌頭,在水中亦廣泛存在
  • 食物的污染主要是乳品,肉品,但魚蝦海產、蔬菜等發現
yersinia enterocolitica1
Yersinia enterocolitica
  • 可長在E.coli,Salmonella,Shigella,等培養基上,分離困難,目前已發展alkaline處理,2次enrichment有效選擇性培養基等
  • 引起腸胃炎,症狀:下痢,發熱,腹痛,嘔吐或類似Pseudoappendicitis、 arthritis等,嚴重等,類似肺結核等侵害肺,脾,等內臟
  • 有明顯的血型分布O:8在美國,加拿大西部、O:3則分布於其他區
yersinia enterocolitica2
Yersinia enterocolitica血清型

Swaminathan et al., 1982

yersinia enterocolitica5
Yersinia enterocolitica 致病性
  • 1980 Zink發現致病是由於42 MDa的plasmid的存在,現已知40~48 MDa的plasmid與致病性相關
    • 對Ca需要
    • ST耐熱腸毒素
    • Autoagglutination在tissue culture medium中培養,37度會自我凝集,22/25度不會。
    • 由於表膜的P1蛋白質
    • Congo red,crystal violet的binding能力
    • 以上的特性也是用作判別致病菌性的依據
yersinia enterocolitica6
Yersinia enterocolitica 致病性
  • 關於致病的plasmid的分離研究很多,與Y. pestis、Y. pseudotuberculosis致病plasmid有許多相同處
  • Sereny test
listeria monocytogenes
Listeria monocytogenes
  • 李斯特菌是80年後期的熱門中毒菌
  • 主要是在美國有幾大件中毒案,死亡慮高,歐洲的統計案件正增加中
  • 本菌原本是動物的病菌(牛、羊等)
  • 在環境,動物以及各食物的發現率很高,特別是畜產品,可以說很常見
  • 傳統胞內感染疾病,研究胞內生長的工具
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美國爆發集體感染
  • 美國以外的國家(?)

Wehr, 1987

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流行病學推估
  • 英國估計每年每10萬人口會有0.3案例(case)
  • 台灣應該每年會有69個病人(?)

McLauchlin, 1987

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加拿大感染增加情形

Schlech et al., 1983

listeria monocytogenes2
Listeria monocytogenes
  • 從前分離需要前cold enrichment數星期,目前已有很好的增菌與分離培養基,也有方便的鑑定套組
  • 較易感染孕婦、胎兒、新生兒等症狀有死胎、流產、septicemia meningitis,meningoencephalitis等
  • 毒素有溶血素 listeriolysin,能入侵白血球,在內繁殖
  • 菌體不耐熱,控制不難
  • 有其他非致病的Listeria菌,增加分離困難
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討論
  • 為何李斯特菌和E. coli O157:H7沒有在台灣產生流行?
slide45
請思考
  • 既然是豬有關,吃豬肉的地方如台灣,為何那麼少發生Yersinia enterocolitica感染?
  • 西元六七十年代Campylobacter等幾種腸道病菌才引起注意,為何那麼晚?之前這些菌不存在嗎?
  • 如何證實致病性質體(virulence plasmid)?
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