TRADUCCIÓN

1. TRADUCCIÓN SÍNTESIS PROTÉICA Dra. Judith de Rodas Salón 207

2. No ocurre traducción sin previa transcripción ADN posee el gen de la proteína Híbrido ADN-ARN Posee todos los genes Posee copia de Expresión del genes de un gen gen .

3. En que sitio celular ocurre la traducción (síntesis protéica) En el citoplasma (citosol), consiste en el ordenamiento lineal de aminoácidos Moléculas que intervienen: • Ribosomas: Une al ARNt, ARNm y enzimas. • ARN de transferencia (ARNt): Transporta un aminoácido y posee un triplete de nucleótidos o anticodón. • ARN mensajero: Es una secuencia de nucleótidos que lleva la información codificada de cada aminoácido en tripletes de nucleótidos o codón. • Enzimas: participan uniendo los aminoácidos, incorporando energía, y dándole la conformación final de acuerdo a la estructura protéica.

4. En la traducción participan: 7 metilGuanosina Cola poli A 64 codones • El Ácido RiboNucleico mensajero (ARNm) es el molde para la construcción de la proteína.  • El Ácido RiboNucleico ribosómico (ARNr) • se encuentra en el sitio donde se construye • la proteína: el ribosoma.  • El Ácido RiboNucleico de transferencia • (ARNt) es el transportador que coloca • el aminoácido apropiado en el sitio • correspondiente. Subunidad pequeña

5. El ARN mensajero: lleva la información para la síntesis de proteínas (64 CODONES), es decir, determina el orden en que se unirán los aminoácidos. El ARNt: forma de trebol, transporta el aa correcto al ribosoma, tiene 61 anticodones que acoplan con los codones del ARNm. Codon mRNA 5’ --- 3’ Anticodon tRNA 3’ – 5’ Para el codón AUG, el anticodón complementario es UAC. Reconocenmás de un codón para un mismo aminoácido (hipótesis del balanceo)

6. Los Ribosomas • Son los orgánulos que sintetizan proteínas. • En procariotas la subunidad pequeña es (30S) y la pesada (50S), el ARNr difiere en cada uno de ellos.  • En eucariótas la subunidad grande es 60S y la pequeña de 40S. • Las dos subunidades solo se unen luego del ingreso mRNA • rRNA lleva muchas de las funciones de los ribosomas La subunidad pequeña tiene el sitio para que se una el ARNm, su rol es crucial en la decodificación del ARN pues monitorea el apareamiento de bases entre el codón del ARNm y el anticodón de ARNt.

7. Sitio de unión mRNA y 3 sitios que puede unir tRNA. Sitio A: aminoacil, donde se une cada nuevo tRNA que llega portando aa. Sitio Peptidil: dónde reside tRNA que lleva cadena polipeptidica en formación Sitio E: de salida, donde tRNA abandona el ribosoma después de haber descargado el aa.

8. Por ejemplo, la glicina es codificada por los codones GGU, GGC, GGA, y GGG. Si un codón muta por ejemplo de GGU a CGC, se especifica el mismo aminoácido. Metionina un solo codón AUG. Glicina, treonina, serina 4 codones. 3 codones de paro: UGA, UAG, UAA

9. Existen diferencias en: procariotas y eucariotas La traducción incluye Cuatro procesos importantes:1. *Activación de aminoácidos *Formación del complejo de Inicio *Alargamiento de la cadena polipeptídica *Terminación Elevación a un alto nivel de energía AMINOACILO-aminoaciladenilado- “el AMP lo proporciona la hidrólisis de ATP” 2. Tener unido un RNAt específico a su extremo 3’-OH Reacciones catalizadas por la: aminoacilARNtsintetasa.

10. Aminoacil-tRNA Aminoacil ARNt Sintetasas (20 tipos): antes que un aa sea llevado por un RNAt se unen a éste de forma covalente, estas enzimas. Realizan la activación de los aa formando un enlace éster entre el carboxilo de un aa y el 3;OH de tRNA Aminoacil-tRNA transferasas: reconocen los nucleótidos al menos en dos regiones distintas de las moléculas de RNAt. Después de unir el aa otra aminoacil revisa el producto final y si no es correcto lo hidroliza

11. Iniciación Terminación Elongación El ribosoma se une al ARNm en un codón de inicio La cadena polipeptídica crece al añadirle sucesivos aminoácidos Cuando se encuentra un codón de terminación, el polipeptido se libera y el ribosoma se disocia

12. Diferencias entre la Traducción procariotas y eucariotas INICIACIÓN ARNm procariota Múltiples sitios de inicio de la traducción ARNm eucariota Único sitio de inicio de la traducción

13. Union IFs a la Subunidad 30S Union IFs a la Subunidad 30S Unión IFs a la Subunidad 30S Sitio unión ribosoma Unión tRNA Iniciador y mRNA Subunidad 30S En Procariotas: • Hay 3 factores de iniciación IF 1,2 y 3, se unen a unidad < con GTP unido IF2 • RNAm y RNAt se unen a unidad menor y RNAm se une a secuencia shine-D (AGGA) poco adelante codón de iniciación. Esto coloca al codón de iniciación AUG del mRNA en el sitio P donde se puede unir al anticodon del tRNA adecuado • Se une la La subunidad mayor al • complejo de iniciación 70S tiene • f MET-tRNAfmet en el sitio P del ribosoma. • RNAtfmet (AUG) ppermite que Met forme Nformilmetionina luego de la union a RNAt bloqueando el grupo amino y dejando libre el carboxilo.

14. INICIACIÓN DE LA TRADUCCIÓN EUCARIOTA • Unión de la subunidad 40s al ARNm, el ribosoma se une al ARNm al reconocer el cap (7 metil guanosina). • 2. Unión del ARNt con el aminoácido Metionina al codón de inicio AUG. 9 factores de inciación denominados eIF1, eIF2, y un iniciador especial tRNAMet eIF2-GTP se une metionil tRNAMet y estos a la unidad < formando complejo que se une a mRNA. El tRNA lo rastrea buscando AUG (kozac) o de iniciación común, entonces la > se une al complejo

15. El F2-GTP se une metionil tRNAMet y estos a la sub unidad mayor, formando complejo que se une a mRNA. El tRNA lo rastrea buscando AUG (kozac) o de iniciación común, entonces la > se une al complejo Elongación 1.El SITIO A: Sitio de Entrada del aminoácido 2.EL SITIO P: Sitio peptidilo CADA RIBOSOMA posee dos sitios

16. Se forma un enlace peptídico,mediante la transferencia de la cadena del polipéptido naciente desde el ARNt en el sitio P al ARNt del sitio A. En el proceso de alargamiento se necesitan 3 enlaces de alta energía por cada aminoácido añadido. a. En la formación del aminoacilRNAt b. En el peque del aminoacilRNAt al sitio A 1. Antes que empiece el alargamiento, todos los los demás aminoacil-RNAt deben combinarse con EF-Tu (30s) y la hidrólisis de un GTP. El siguiente aminoacil-RNAt complementario al segundo codón entra en el sitio vacío del ribosoma, sitio A se enlaza y se libera GDP y Tu. 2. El factor de elongación EF-Ts regenera al factor EF- Tu para que pueda seguir añadiendo más ARNt

17. Expulsión del RNAt • no cargado se mueve el ribosoma con el • dipéptido proceso • denominado: • TRASLOCACIÓN • El factor de elongación EF-G o translocasa (50s) y un GTP, el ribosoma se desplaza dejando libre el sitio aminoacil para la incorporación de otro aminoácido.

18. El proceso de traducción puede ser llevado a cabo por conjuntos de ribosomas o polirribosomas INHIBIDOR QUÍMICO: la estreptomicina, penicilinas, cefalosporinas etc. provoca que el aminoacil-RNAt met sea liberado del complejo de inicio por lo que se disocia el RNA m, y los ribosomas e impiden de esta forma la síntesis protéica. Ciprofloxacina inhibe la acción de la translocasa No se forman nuevas cadenas polipeptídicas y se da la muerte celular

19. En eucariotas las funciones de los factores EF-Tu y EF-Ts la realiza el factor eEF1 y la función del EF-G el factor eEF-2. • En eucariotas las funciones de RF1 y RF2 sólo la ejerce el factor eRF

21. G C U A A U Finalización I:Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm. P A ARNm 3’ AAAAAAAAAAA 5’ A U GC A A U G C U A G C G A U U A Arg-Leu-Cys-Gln-Met

22. A A A A A A U U G U G C C U U C G G Finalización II:Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del hialoplasma. ARNm 3’ AAAAAAAAAAA 5’ Se separan las subunidades ribosomales, se desintegra el ARNm y los factores de finalización le dan la conformación final a la proteina en su nivel de estructura. Muchas gracias……