Download
1 / 16
160 likes | 346 Views
היערכות המעבדות לשפעת עולמית H1N1-2009. פרופ' אלה מנדלסון המעבדה המרכזית לנגיפים משרד הבריאות המרכז הרפואי שיבא תל השומר. בדיקות לאבחון השפעת. הבדיקה המקובלת כמהירה, הרגישה והספציפית ביותר היא בדיקה מולקולרית מסוג Real-time PCR
E N D
היערכות המעבדותלשפעת עולמית H1N1-2009 פרופ' אלה מנדלסון המעבדה המרכזית לנגיפים משרד הבריאות המרכז הרפואי שיבא תל השומר
בדיקות לאבחון השפעת • הבדיקה המקובלת כמהירה, הרגישה והספציפית ביותר היא בדיקה מולקולרית מסוג Real-time PCR • בדיקות בשיטות אחרות (בידוד בתרבית, זיהוי אנטיגן בקיט מהיר) הן • איטיות מדי, או • בעלות רגישות נמוכה מדי.
לביצוע הבדיקה המולקולרית נדרש מערך בדיקות הנשען על: • 1. ידע • 2. מכשור וציוד ייחודיים • 3. ניסיון בתחום אבחון וירולוגי • בנוסף נדרש גם מערך דיווח • 1. לשמירת נתונים • 2. לדיווח תוצאות לרופא • 3. לדיווח תוצאות למערכת הבריאות.
היערכות המעבדה המרכזית לנגיפים • בדיקות לזיהוי הנגיף בוצעו במעבדה המרכזית לנגיפים של משרד הבריאות החל מאפריל 2009. • לפני פיתוח בדיקת הייחוס הנוכחית בוצעו בדיקות בשיטות גנריות תוך השענות על יכולות ייחודיות של המעבדה המרכזית לנגיפים. • הבדיקות כללו הגברה בשיטת PCR וריצוף, תוך שימוש בבסיסי נתונים בינלאומיים של רצפים גנטיים. • כל אבחון נמשך מספר ימים • האבחון בשיטת Real Time PCR נמשך מספר שעות והזמן מקבלת הדגימה להוצאת תשובה: עד 24 שעות
עם פרסום הרצפים הייחודיים של הנגיף, פותחו ויושמו מבחני המעבדה מסוג Real time PCR . • מאז יישום שיטות אלו בוצעו במעבדה לנגיפים 8427אבחנות לחולים מכל רחבי הארץ. • החל מחודש יוני בוצעו במעבדה הוירולוגית בהדסה במקביל כ-900 בדיקות אבחנתיות לחולים מהדסה ובתי חולים אחרים בירושלים.
סוגי הנבדקים • במעבדה בוצעו בדיקות לחולים משלושה סוגים: • חולים מאושפזים (החל מתחילת ההתפרצות ועד היום) • חולים ממרפאות בקהילה ובצה"ל- בדיקות אבחנתיות (פרק זמן מוגבל בלבד, נמשך רק לגבי התפרצויות במוסדות). • חולים ממרפאות סקר- בשת"פ עם המרכז הלאומי לבקרת מחלות מופעלות מרפאות "זקיף" שמטרתן ניטור התחלואה בשפעת. (מתבצע מדי שנה בחורף, והשנה נמשך גם בקיץ בהיקף מוגבר).
התפלגות הבדיקות לפי חדשים סה"כ נבדקו במעבדה לנגיפים 8427 חולים מתוכם 2914 חיוביים (35%) מספר נבדקים ומספר חיוביים %חיוביים
העברת בדיקות למעבדות נוספות • לקראת החורף: • צפוי גל תחלואה מוגברת שיכלול גם אשפוזים רבים. • תופיע גם שפעת עונתית. • המשימות העומדות בפני מערך המעבדות: • 1. המשך אבחון חולים מאושפזים והתפרצויות בקהילה • 2. ניטור התפשטות הנגיף בקהילה באמצעות סקר השפעת וסקר סרולוגי • 3. מעקב אחרי נגיפי השפעת העונתיים זיהוים ואיפיונם, מידת התאמה לתרכיב • 4. מעקב אחרי התפתחות עמידות • מעקב אחר התגובה לחיסון (כאשר יתקבל החיסון).
לאור: • העומס המתמשך על המעבדה לנגיפים • המשימות הנדרשות מהמעבדה לנגיפים בחורף • הצורך לשפר את זמינות הבדיקה לחולים המאושפזים • הוחלט להקים מערך מעבדות לזיהוי הנגיף, בפריסה ארצית.
עקרונות הפעלת המעבדות הנוספות • המעבדות הנוספות: • הדסה עין כרם, ירושלים- מעבדה וירולוגית • מ"ר רמב"ם, חיפה- מעבדה וירולוגית • מ"ר סורוקה, באר שבע- מעבדה וירולוגית • מ"ר סוראסקי, תל אביב- מעבדה מולקולרית. • תיתכן הוספת מעבדה נוספת.
עקרונות ההפעלה: ציוד ושיטות • המעבדה המרכזית לנגיפים תשמש כמעבדת הייחוס ותקבע את פרוטוקול הבדיקה. • המעבדות הנוספות תשתמשנה בפרוטוקול לאחר שעמדו במבחן בקרת איכות וקיבלו הרשאה. • פנל של בקרת איכות יועבר תקופתית לבדיקת מיומנות. • המעבדות תצוידנה על ידי משרד הבריאות במכשור סטנדרטי התואם לציוד במעבדה המרכזית לנגיפים. (הציוד הוזמן, חלק הגיע). • המעבדות תקבלנה ממשרד הבריאות תקציב לאיוש כוח אדם ולרכישת ריאגנטים • כל מעבדה תשרת את בית החולים שלה ובתי חולים נוספים באזור על פי הנחיות המחלקה למעבדות.
דגימות מחולים • הדגימות תמשכנה להיות משטחי גרון ואף במדיום העברה וירולוגי. • המעבדה המרכזית לנגיפים תפסיק לספק מבחנות בחינם לבתי החולים. • להגברת רגישות הבדיקה חשוב ביותר שכל שלושת המטושים יהיו במבחנה אחת • מבחנות "וירוקולט" אינן מומלצות מכיוון שאינן מאפשרות יותר ממטוש אחד. הן מהוות גם בעיה לוגיסטית. • קיימת אופציה לרכוש מבחנות מחברת "גאמידור" ואופציות נוספות בבדיקה הן רכישה מחברת "טאייקו" ורכישה מהמעבדה לנגיפים.
תמונת המצב העכשווית • ריאגנטים לביצוע 500 בדיקות ופרוטוקול ביצוע חולקו לכל המעבדות ובוצעה הדרכה. • מעבדת מ"ר רמב"ם מבצעת בדיקות לרמב"ם כבר שבועיים. • מעבדות איכילוב וסורוקה הריצו מבחנים ניסיוניים בהצלחה. • מפגש של מנהלי כל המעבדות להסדרת נושאים מקצועיים ותקציביים צפוי ב-13.09.
הבדיקות במהלך החורף • המעבדה המרכזית לנגיפים פיתחה מבחן חד-שלבי לאבחנה בו-זמנית של: 1. שפעת עונתית (A+B ) 2. שפעת H1N1. המבחן מזהה כל אחד מסוגי נגיפים אלה. • מבחן זה המכונה "טריפלקס" יימסר לכל המעבדות לקראת הגעת השפעת העונתית.
בדיקות הניטור- סקר שפעת • מספר הדגימות השבועיות ממרפאות הסקר הולך ועולה. • סוכם על 200 בדיקות לשבוע בפריסה ארצית של מרפאות. • בסקר השפעת תיושם בדיקת הטריפלקס החל מתחילת אוקטובר. • הוספת בדיקת לנגיף RSV תלויה בעומס ועלויות. • המעבדה בשלבי פיתוח אחרונים של מבחן סרולוגי לצורך מעקב סרו-אפידמיולוגי אחרי התפשטות הנגיף באוכלוסיה. • המבחן הוא מסוג נויטרליזציה . • מבחן זה יוכל לשמש גם להערכת יעילות החיסון: מחוסנים יתרמו דם לצורך בדיקת רמת הנוגדנים שפיתחו בעקבות החיסון.
מעקב אחרי השתנות הנגיף ועמידות לתרופות • יש צורך לעקוב אחרי השתנות הנגיף כולל האפשרות שייצור שילובים עם נגיפי השפעת העונתיים או יפתח עמידות לתרופות אוסלטמיביר ורלנזה. • לצורך מעקב זה מפתחת המעבדה לנגיפים מספר מבחנים ספציפיים: • 1. ריצוף הגנים האחראיים לשונות האנטיגנית ולעמידות לתרופות • 2. מבחן מסוג Real time PCR לזיהוי מהיר של עמידות שמקורה במוטציה בגן הנויראמינידאז. ניתן יהיה לבדוק מאות דגימות בדומה למבחן המשמש לאבחון חולים. • 3. בידוד וגידול הנגיף בתרביות רקמה לצורך בדיקת עמידות בתרביות ובעכברי ניסוי.
