1 / 28

Laboratoriemodel af trombocytopeni i fuldblod. Effekt af in vitro tilsætning af trombocytter og rekombinant faktor VIIa

Laboratoriemodel af trombocytopeni i fuldblod. Effekt af in vitro tilsætning af trombocytter og rekombinant faktor VIIa. Ole Halfdan Larsen, Jørgen Ingerslev, Niels Clausen, Lisbeth Norengaard, Kirsten Christiansen, Benny Sørensen Center for Hæmofili og Trombose

phuoc
Download Presentation

Laboratoriemodel af trombocytopeni i fuldblod. Effekt af in vitro tilsætning af trombocytter og rekombinant faktor VIIa

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Laboratoriemodel af trombocytopeni i fuldblod. Effekt af in vitro tilsætning af trombocytter og rekombinant faktor VIIa Ole Halfdan Larsen, Jørgen Ingerslev, Niels Clausen, Lisbeth Norengaard, Kirsten Christiansen, Benny Sørensen Center for Hæmofili og Trombose Aarhus Universitets Hospital, Skejby ole.halfdan.larsen@ki.au.dk

  2. Fodenden Professoren Store tanker – få m2

  3. BaggrundTrombocytopeni • Medfødt eller erhvervet • Forårsaget af • Utilstrækkelig produktion • Cytostatika • Øget forbrug/destruktion • Blødning • Immunologisk • Trombocytsygdomme

  4. BaggrundTrombocytopeni • Trombocytopeni associeret til blødningsrisiko

  5. BaggrundTrombocytopeni • Behandling af blødning ved trombocytopeni • Infusion af trombocytter • I enkelte tilfælde insufficient eller kontraindiceret • Risiko for: • Infektion • Allergiske reaktioner

  6. BaggrundRekombinant faktor VIIa - NovoSeven® • Registrerede indikationer • Hæmofili med inhibitorer / erhvervet hæmofili • Glanzmanns trombasteni • Faktor VII mangel • Off-license • Enkelte studier har antydet at rFVIIa kan have hæmostatisk potentiale ved trombocytopeni Kristensen J et al, Haemostasis 1996;26 Suppl 1:159-64. Tranholm M et al, Thromb Res 2003 Feb 15;109(4):217-23.

  7. Formål • Etablere en laboratoriemodel af trombocytopeni i human fuldblod • Visualisere koagulopatien ved trombelastografisk måling af dynamisk fuldblods koagulation • Evaluere det hæmostatiske potentiale af friske blodplader eller rFVIIa ved in vitro tilsætning

  8. Hypoteser • Trombocyt-tallet kan reduceres til < 60 x 109/L i fuldblod • Det reducerede trombocyt-tal vil medføre nedsat maksimal hastighed af fuldblods clot formation • In vitro tilsætning af friske trombocytter eller rFVIIa kan revertere den inducerede koagulopati

  9. Materialer og metoderFremstilling af trombocytopent fuldblod • Citrat fuldblod fra 13 raske frivillige

  10. Materialer og metoderFuldblods koagulations profiler • ROTEM Thrombelastographic Coagulation Analyzer • Dynamiske koagulations parametre blev beregnet i et software program • Analyse procedure: • 280 µl citrat fuldblod • 20 µl Buffer/Intervention • 20 µl tissue factor (Innovin®) – final TF dilution 1:17,000 + CaCl2 200 mM B. Sørensen et al., J Thromb Haemost 2003; 1(3): 551-58

  11. Kontinuerlig fuldblods koagulations analyse Trombelastografi

  12. Kontinuerlig fuldblods koagulations analyse Trombelastografi B. Sørensen et al., J Thromb Haemost 2003; 1(3): 551-58

  13. Materialer og metoderAndre parametre • Trombocyt-tal • Kontrol screening: • PT, APTT, TT, fibrinogen, AT og D-dimer • P-selectin • Leukocytter og erytrocytter • Total p-kalium • pH

  14. ResultaterEffekt af procedure på trombocyttal

  15. ResultaterEffekt af trombocyttal på MaxVel

  16. ResultaterTrombocyttal vs MaxVel • MaxVel aftager eksponentielt med trombocyt-tallet

  17. Resultater Tilsætning af trombocytter eller rFVIIa • Tilsætning: • Trombocytter  komplet revertering • RFVIIa  partiel revertering

  18. Resultater - Kontrol forsøgParametre før og efter maksimal manipulation • Koagulationsfaktorer • Andre blodceller • Trombocyt præaktivering • pH

  19. Konklusion • En brugbar laboratoriemodel af trombocytopeni i fuldblod er blevet etableret • Den inducerede koagulopati var primært karakteriseret ved en reduceret MaxVel • Tilsætning af friske trombocytter reverterede koagulopatien • Tilsætning af rFVIIa (1µg/mL) medførte en signifikant partiel korrektion

  20. Foreløbig anvendelse af modelSammenligning med patientgrupper • Trombocytopene børn • N=8, aldersgennemsnit 9 år (range 3-15) • Trombocyttal gns. 28x109/L (range 7-45) • Malign lidelse

  21. Ingen forøgelse af MaxVel ved tilsætning af rFVIIa 1 eller 4 µg/mL Trombocytopene børn (N=8) • In vitro tilsætning af rFVIIa og PRP

  22. Trombocytopene børn vs model • Vurdering af trombocyt-funktion • Aggregations analyse • Multiplate® Platelet function analyzer med Horm® kollagen (8 µg/mL) som agonist.

  23. Trombocytopene børn vs modelTrombocyt aggregation • Samme gennemsnitlige trombocyttal i grupperne Den reducerede effekt af rFVIIa observeret kan skyldes kvalitative ændringer i børnenes trombocytter

  24. Konklusion • Ved de undersøgte tilstande af trombocytopeni fandt vi at intervention med raske trombocytter reverterer koagulopatien • Ved trombocytopeni med normal trombocytfunktion fandt vi signifikant hæmostatisk effekt af rFVIIa • Der findes særlige tilstande af tromboctopeni hvor man må forvente reduceret effekt af rFVIIa

  25. Perspektiver • Finde årsager til reduceret trombocyt-funktion hos børn som har fået kemoterapi • Antibiotika • Effekten af kombination af raske trombocytter og rFVIIa

  26. Benny Sørensen • Acknowledgement • Vejledere Jørgen Ingerslev Niels Clausen • Forsknings bioanalytikere: • Kirsten Christiansen • Lisbeth Norengaard • Mange hjælpsomme mennesker på CHT Tak for opmærksomheden

More Related