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Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey
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Incidence of Clostridium botulinum spores in honey in Turkey. Leopoldo García B aeza. I ntroducción.

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Presentation Transcript


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

Incidence of Clostridium botulinumspores in honey in Turkey

Leopoldo García Baeza


I ntroducci n

Introducción

  • El botulismo alimentario es una de intoxicación alimentaria grave causada por la ingestión de alimentos que contienen la potente neurotóxinaformada durante el crecimiento de Clostridiumbotullinum.

  • Clostridiumbotulinumy sus esporas están ampliamente distribuidos en la naturaleza (Solomon y Lilly,2001 ) .

  • El botulismo infantil es la forma común de botulismo y la miel se ha identificado como una fuente potencial de infección ( Midura , 1996 ) .


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • La flora intestinal infantil inmadura permite que esporas ingeridas germinen , se multiplican y produzcan neurotóxinasdel botulismo en el lumen intestinal .

  • Los niños de entre 2 semanas y 1 año son los más susceptibles ( Arnón, Damus , y Chin , 1981 ) .

  • La miel se ha identificado tanto como la dieta factor de riesgo de botulismo infantil y como un reservorio natural de C. botulinum y esporas de tipo B ( Solomon y Lilly , 2001 ) .


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • La incidencia de las esporas de C. botulinum en la miel tiene , se ha estimado en varios estudios .

  • Sugiyama, Mills, y C athyKuo ( 1978 ) , usando un método de diálisis , informó que 18 de 241 muestras de miel contienen las esporas,

  • Midura, Snowden , Wood y Arnón ( 1979 ) , utilizando un método de dilución de centrifugación , encontraron 9 de 90 muestras de miel positivos.

  • Rall, Bombo , Lopes, Carvalho, y Silva ( 2003 ) aisló esporas de C. botulinum 3 de 100 muestras de miel .


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Solomon y Lilly ( 2001 ) reportó 13 % de las muestras fueron C. botulinumpositivo.

  • Por esta razón, la FDA y los CDC recomiendan que los niños menores de 1 año no consumir miel.

  • El propósito de este estudio fue determinar la incidencia de C. botulinumen mieles comerciales obtenidos en Ankara y para alertar a los pediatras.


Materiales y metodos

Materiales y metodos

  • 48 muestras de miel:

  • 6 panal de miel.

  • 34 flor de miel.

  • 8 de mielada.

  • Se obtuvo en los mercados de Ankara.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Se utilizaron:

  • Carne Cocida Medio (CMM, Merck) y Tripticasa Peptona Glucosa Yeastbroth (TPGY, Merck) (Solomon, Johnson, Bernard, Arnón, y Ferreira, 2001).

  • Método de DA (adición directa)

  • 10 g de miel se añade directamente a 90 ml de CMM y TPGY y se incubaron en un agua baño a 65 ° C durante 30 minutos para inactivar los no formadores de esporas.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • En el método DC (dilución centrifugación).

  • 25 g de miel se diluyeron en 100 ml de agua destilada estéril con 1% de Tween 80 (Merck, Darmstadt, Alemania) y se agitó hasta que la solución se volvió homogénea.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • La solución se mantuvo a 65 °C agua baño durante 30 minutos de centrifugado durante 30 minutos a 9 000 g

  • Los precipitados se transfirieron a 9mL de CMM y9 mLTPGY.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Método SF (sobrenadante filtración).

  • La filtración por membrana se combinó con la centrifugación.

  • Las esporas fueron capturados a partir del sobrenadante por filtración a través de un filtro de 0.45 μm.

  • El filtrado se inoculó en 9 ml de TPGY y 9 ml de CMM.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Cada muestras se ensayaron dos veces.

  • Todos los medios fueron cubiertos con aceite de parafina estéril.

  • CMM se incubó a 35 ° C y TPGY a 26 ° C durante 7-10 dias(Solomon et al., 2001).


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Después de 7 días de incubación, se examinó cada cultivo para la producción de la turbidez y de gas.

  • Los cultivos que mostraron ningún crecimiento significativo con en 7 días se volvieron a incubar durante 3 días para la tarde germinación de las esporas.

  • Después de 10 días de incubación, los cultivos sin signos de crecimiento se consideran negativos.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Células clostridiales típicos tienen un aspecto similar a una raqueta de tenis con la tinción de Gram.

  • Las muestras positivas se sembraron en medio anaeróbico Agar Yema de Huevo (AEY, Oxoid).

  • Las placas se incubaron anaeróbicamente a 35 °C durante 48 h.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Al final del tiempo de incubación fueron resembradas por duplicado en AEY agar.

  • Uno se incubó aeróbicamente y el otro anaeróbicamente a 35 ° C durante 48h.

  • Se consideraron colonias que crecieron sólo en condiciones anaerobias como cultivos puros.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • Las toxinas se detectaron utilizando el bioensayo en ratones. presencia de C. botulinum.

  • Se inocularon vía intraperitoneal (IP) 0.5 mL de centrifugado en dos ratones blancos.

  • La muerte de los ratones sin signo clínico en las primeras 24 h fue considerada por la falsa manipulación (Salomón et al., 2001).


Resultados

Resultados

  • Se aislaron 6 esporas de C. botulinum(4 de flor miel, 1 de miel de mielada, 1 de peine de la miel de la flor) a partir de 48 muestras.


Incidence of clostridium botulinum spores in honey in turkey

  • La miel se vende en los mercados de venta al por menor en Ankara esta significativamente (12,5%) contaminada con C. botulinum.

  • Siendo comúnmente consumida por todas las edades.


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