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痰标本的检验

痰标本的检验. —— 肠杆菌科细菌的分离与鉴定. 一 . 分布 9 版伯杰鉴定细菌手册分为 24 个属， 108 个种 现增加到 31 个属 , 常见的 14 个属 1. 占临床分离菌总数 50% 2. 占 G - 杆菌总数 80% 3. 占败血症 50% 4. 占尿路感染 70 %. 二 . 临床意义. 有些菌属对人类有明显的致病作用 1 、鼠疫耶耳森菌 -- 引起烈性传染病 2 、 埃希菌属 、 志贺菌属 、 沙门菌属 、 耶耳森菌属可导致腹泻 、 食物中毒 . 有些菌属与医院感染有关 1 、肺炎 2 、脑膜炎 3 、菌血症 4 、各种部位的感染

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痰标本的检验

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Presentation Transcript

  1. 痰标本的检验 ——肠杆菌科细菌的分离与鉴定

  2. 一.分布9版伯杰鉴定细菌手册分为24个属， 108个种现增加到31个属,常见的14个属1.占临床分离菌总数50% 2.占G-杆菌总数80%3.占败血症50%4.占尿路感染70 %

  3. 二.临床意义 • 有些菌属对人类有明显的致病作用 • 1、鼠疫耶耳森菌--引起烈性传染病 • 2、 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒. • 有些菌属与医院感染有关 • 1、肺炎 • 2、脑膜炎 • 3、菌血症 • 4、各种部位的感染 • 多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌

  4. 与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属，其中临床标本中常见的菌属有14种与人类感染有关的肠杆菌科细菌有31个菌属，其中临床标本中常见的菌属有14种 克雷伯菌属 爱德华菌属 多源菌属 变形杆菌属 普罗威登斯菌属 沙门菌属 耶尔森菌属 志贺菌属 沙雷菌属 肠杆菌属 埃希菌属 哈夫尼亚菌属 枸橼酸杆菌属 摩根菌属

  5. 三.微生物特性 • 1.G-杆菌 ， 多数有鞭毛、菌毛 • 2.发酵葡萄糖（O/F结果：F) • 3. 氧化酶阴性 4.还原硝酸盐为亚硝酸盐 5.营养条件不高，

  6. 涂片：G-杆 四、鉴定流程图 氧化酶试验 + － 肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌 非发酵菌、弧菌 双糖试验 O F 肠杆菌科细菌 不动、嗜麦芽 硝酸盐还原 苯丙,葡盐, 枸, 硝, 赖, 鸟, 氨山, 肌, 吲哚 － + 嗜麦芽 不动

  7. 种属鉴定 概述 硝酸盐还原＋ 葡萄糖发酵 科的特征 分子生物学鉴定 氧化酶 － 属间鉴定特征 属内种间鉴定特征 报告细菌种名 血清学分型 报告细菌血清型

  8. 五、肠杆菌科的初步分群 • 可用苯丙氨酸和葡萄糖酸盐试验将肠杆菌科分为四大组

  9. 菌 属 名 苯丙氨酸 葡萄糖酸盐 变形杆菌属 + － 普鲁维登斯菌属 + － 摩根氏菌属 + － 塔特姆菌属 + － 克雷伯菌属 － + 肠杆菌属 － + 多源菌属 － + 沙雷菌属 － + 西地西菌属 － + 哈夫尼亚菌 － + 埃希菌属 － － 志贺菌属 － － 沙门菌属 － － 枸橼酸杆菌属 － － 爱德华菌属 － － 耶尔森菌属 － － 克卢瓦菌属 － － 兰恩氏菌属+ +

  10. 六.苯丙氨酸阳性组的各属鉴别 • 试 验 变形杆菌属 普鲁维登菌属 摩根氏菌属 塔特姆属 • H2S + - - - • 枸橼酸盐 +/- + - - • 靛基质+/- + + -

  11. 1.变形杆菌属内各种的鉴别 试 验 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 潘氏变形杆菌 产粘液变形杆菌 靛基质+ - - - 鸟基酸- + - - 木糖 + + + -

  12. 2.普鲁维登菌属各种的鉴别 试 验 产碱 斯图 雷极 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌 普鲁维登斯菌 侧金盏花醇 + - + 甘露醇 + - -

  13. 生化反应 雷氏 斯氏 产碱 拉氏 海氏 吲哚产生 + + + + - 肌醇 + + - - V 海藻糖 - + - - - 戊五醇 + - + - +

  14. 3.摩根菌属种的鉴定 试验 摩根摩根菌 摩根菌(生物1群) 赖氨酸- + 动力 + -

  15. 4.塔特姆菌属的鉴定 苯丙氨酸 H2S 枸橼酸盐 鸟氨酸 靛基质 + - - - -

  16. 苯丙氨酸阳性 H2S + － 枸橼酸盐 靛基质 + + － － 鸟氨酸 靛基质 侧金盏花醇 普通变形杆菌 + － + + － － 甘露醇 摩 根 菌 潘氏变形杆菌 奇异变形杆菌 斯图普鲁维登斯菌 塔特姆菌 + _ 雷极普鲁维登斯菌 产碱普鲁维登斯菌 .苯丙氨酸阳性组菌属鉴别索引图 5

  17. 七.葡萄糖酸盐阳性组各属鉴别

  18. 分 类 克雷伯菌属 臭鼻亚种 鼻硬结亚种 • 原克雷伯菌属（klebsiella）有5个种，2个亚种 • 肺炎克雷伯菌（K. pneumoniae） • 产酸克雷伯菌（K. oxytoca） • 解鸟氨酸克雷伯菌（K. ornithinolytica） • 植生克雷伯菌（K. planticola） • 土生克雷伯菌（K. terrigena） This proposal is base on 16S rDNA and rpoB gene sequencing and carbon assimilation studies. 柔特勒菌属 (Raoultella) 解鸟氨酸柔特勒菌（R. ornithinolytica） 植生柔特勒菌（R. planticola） 土生柔特勒菌（R. terrigena）

  19. 培养特征 克雷伯菌属 • 血琼脂上菌落较大，呈黏液状，以接种环挑取时易拉成丝 • 在肠道培养基上呈发酵乳糖大菌落 • 在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见菌膜，管底有粘性沉淀物 K. pneumoniae菌落（血平板）

  20. 1.克雷伯菌属各种的鉴别

  21. 克雷伯菌和柔特勒菌种间鉴定表 克雷伯菌属

  22. S. marcescens菌落特征（普通营养平板） 沙雷菌属

  23. S. marcescens菌落特征（普通营养平板） 沙雷菌属

  24. 2.沙雷菌属各种的鉴别

  25. 原有7个种2个生物型 产气肠杆菌(E. aerogenes) 阴沟肠杆菌(E. cloacae) 杰高维肠杆菌 坂崎肠杆菌 泰洛肠杆菌 中间肠杆菌 聚团肠杆菌 河生肠杆菌生物群1 河生肠杆菌生物群2 后增加7个菌 阿氏肠杆菌 何氏肠杆菌 溶解肠杆菌 超压肠杆菌 克沃尼肠杆菌 考伯肠杆菌 帕瑞勒肠杆菌 分类：现有13个种2个生物型 肠杆菌属

  26. 3.肠杆菌属各种的鉴别 • 本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统 • 很难达到90％以上的鉴定正确率

  27. 肠杆菌属种间鉴定表 肠杆菌属

  28. 4.哈夫尼亚菌属鉴定 • 葡萄糖酸盐 枸橼酸盐 棉子 糖 • + － － • 5.多源菌属种的鉴定 试验 聚团多源菌 弥散多源菌 赖 氨 酸 - - 鸟 氨 酸 - - 水扬苷 + -

  29. + － + -- － + － + + + + － － － － － + － － － － + + + － + + － + － 葡萄糖酸盐+ 侧金盏花醇 赖氨酸 鸟氨酸 赖氨酸 鸟氨酸 丙二酸盐 山梨醇 枸橼酸盐 靛基质 阴沟肠杆菌 多源肠杆菌 产气肠杆菌 贩崎肠杆菌 阴沟肠杆菌 山梨醇 山梨醇 产酸克雷伯菌 臭鼻克雷伯菌 哈夫尼亚菌 鼻硬结克雷伯菌 阿拉伯糖 肺炎克雷伯菌 红色沙雷菌 格高菲肠杆菌 液化沙雷菌 粘质沙雷菌 5.葡萄糖酸盐阳性菌属鉴别双岐索引图

  30. 八.苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性组的各属鉴别

  31. 分 类 枸橼酸杆菌属 枸橼酸杆菌属（Citrobacter）包括11个种 弗劳地枸橼酸杆菌 (C. freundii) 差异枸橼酸杆菌（C. diversus） 无丙二酸盐枸橼酸杆菌 (C. amalonaticus) （C. koseri） 布拉吉枸橼酸杆菌 （C. braakii） 雷登枸橼酸杆菌 （C. rodentium） 塞拉克枸橼酸杆菌 （C. sedlakii） 魏克曼枸橼酸杆菌 （C. werkmanii） 扬哥枸橼酸杆菌 （C. youngae） 吉乐枸橼酸杆菌 （C. gillenii） 穆利枸橼酸杆菌 （C. murliniae） 法玛丽枸橼酸杆菌 （C. farmeri）

  32. 1.枸橼酸杆菌属各种的鉴别 • 注意：很多鉴定系统的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料

  33. 枸橼酸杆菌种间鉴定表 枸橼酸杆菌属

  34. 2.爱德华菌属各种的鉴别

  35. 3.埃希菌属种的鉴别

  36. 临床意义(Clinical Significance) E.coli以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染 埃希菌属 E.coli中的致病菌株能引起各种类型的腹泻，根据其不同的血清型别、毒力和临床症状 致泻性E.coli分为5类： 肠毒素型大肠埃希菌 (ETEC) 肠致病性大肠埃希菌 (EPEC) 肠侵袭型大肠埃希菌 (EIEC) 肠出血型大肠埃希菌 (EHEC) 肠凝聚型大肠埃希菌 (EAggEC)

  37. 鉴定要点 埃希菌属 • 大肠埃希菌 在中国兰平板上为蓝色菌落 • 大肠埃希菌 在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落 • 大肠埃希菌 在麦康凯和SS平板上为红色菌落

  38. 培养特征 四沙门菌属 • 兼性厌氧菌 • 营养要求不高 • 菌落呈中等大小、无色、半透明、光滑 • 在SS平板上，因产生H2S可形成黑色中心的菌落 伤寒沙门菌菌落形态（SS平板）

  39. 血清学分型 沙门菌属 • 常用血清：O多价血清（含A～F群） O、H、Vi抗原因子血清 方法：从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符合沙门 菌属生物学特性，则 采用A-F多价血清初步确定是否为Salmonella 1. 如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型 2. 如阴性：应考虑是否有Vi抗原? 加热或传代 凝集：做O多价和单价凝集 去除Vi抗原 不凝集：可能为A～F以外

  40. ③如是双相菌，进一步用复合血清1、2、5检查第2相抗原。③如是双相菌，进一步用复合血清1、2、5检查第2相抗原。

  41. 培养特性 志贺菌属 • 兼性厌氧菌 • 营养要求不高 • 普通平板：中等大小、半透明、光滑 • 鉴别培养基：乳糖不发酵的菌落 菌落形态（麦康凯平板）

  42. 种属鉴定 志贺菌属 • 菌属特征 • 发酵葡萄糖产酸不产气 • 赖氨酸（－） • H2S（－） • 尿素（—） • 动力（—）

  43. 5.志贺菌属的鉴定 • 先用志贺多价血清与菌种凝集，如多价血清凝集为志贺菌，多价里不包含鲍氏C16-20再进一步用因子血清凝集而定群。

  44. 6.耶尔森菌属各种的鉴别

  45. 苯丙氨酸、葡萄糖酸盐 － - 甘露醇 ONPG + － + + － － 动 力 H2S 枸橼酸盐 + + + － － － 沙门菌属 志贺菌属 甲基红 侧金盏花醇 赖氨酸 迟缓爱德华菌 － + + － + － 鸟氨酸 保科爱德华菌 鲶鱼爱德华菌 葡萄糖产气 异型枸橼酸杆菌 耶尔森菌属 + － + － 丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌 费劳地枸橼酸杆菌 大肠埃希菌 大肠埃希菌（不活泼株） 7、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性组菌属鉴别 双歧索引图

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