Maldi tof
Sponsored Links
This presentation is the property of its rightful owner.
1 / 25

ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΜΑΖΑΣ MALDI – TOF PowerPoint PPT Presentation


  • 123 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΜΑΖΑΣ MALDI – TOF. Μαργαρός Γιάννης. Προσδιορισμός Πολυμερούς Υλικού. Προσδιορισμός Μοριακού Βάρους Χρωματογραφία Διήθησης Πηκτής Διάθλαση Φωτός Ωσμομετρία Ιξωδομετρία Προσδιορισμός Ακολουθίας Μονομερών Μονάδων Φασματοσκοπία ΝΜ R Προσδιορισμός Τελικών Ομάδων Τιτλοδότηση

Download Presentation

ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΜΑΖΑΣ MALDI – TOF

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΜΑΖΑΣ MALDI – TOF

Μαργαρός Γιάννης


Προσδιορισμός Πολυμερούς Υλικού

  • Προσδιορισμός Μοριακού Βάρους

    • Χρωματογραφία Διήθησης Πηκτής

    • Διάθλαση Φωτός

    • Ωσμομετρία

    • Ιξωδομετρία

  • Προσδιορισμός Ακολουθίας Μονομερών Μονάδων

    • Φασματοσκοπία ΝΜR

  • Προσδιορισμός Τελικών Ομάδων

    • Τιτλοδότηση

    • Φασματοσκοπία NMR

    • Φασματοσκοπία FT - IR

  • Προσδιορισμός Καθαρότητας

    • Στοιχειομετρική Ανάλυση

    • Φασματοσκοπία NMR

    • Φασματοσκοπία FT - IR


Προσδιορισμός ΜΒ με Φασματοσκοπία Μάζας (Mass Spectroscopy)

Χρησιμοποιείται στην ανάλυση ΜΒ τα τελευταία 50 χρόνια

  • Απλή σχετικά οργανολογία

  • Μεγάλη ακρίβεια

  • Γρήγορη

    αλλά...

Η ΕΦΑΡΜΟΓΗ ΤΗΣ ΕΙΝΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΕΝΗ ΣΕ ΣΥΝΘΕΤΙΚΑ ΠΟΛΥΜΕΡΗ ΚΑΙ ΜΕΓΑΛΑ ΒΙΟΜΟΡΙΑ!

  • Λόγω Χαμηλής Πτητικότητας ή

  • Θερμικής Αστάθειας των ενώσεων αυτών


Βελτιώσεις και παραλλαγές της τεχνικής MS.

Τεχνικές Ήπιου Ιονισμού

  • Chemical Ionization

  • Secondary-Ion Mass Spectroscopy

  • Field Desorption

  • Fast Atom Bombardment

  • Matrix-assistedLaserDesorption/Ionization - MassSpectroscopy


Μέθοδος MALDI:

Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization

Ανιχνευτής TOF-MS:

Time Of Flight

Επιτρέπει τον προσδιορισμό μαζών συνθετικών

πολυμερών με

  • ΜΒ > 200.000 Daltons(Da) μέσω ιονισμού και ατμοποίησης,

  • χωρίς όμως την αποικοδόμηση τους,

  • γρήγορα

  • με ακρίβεια

  • προσδιορισμός μεγάλου αριθμού χαρακτηριστικών του πολυμερούς


Τεχνική ήπιου ιονισμού MALDI

  • Ανάμιξη ένωσης - μήτρας και πολυμερούς σε κατάλληλο διαλύτη*.( Cmatrix = 100 x Cpolymer )

  • Απομάκρυνση διαλύτη, δημιουργία ομογενούς κρυστάλλου με ομοιόμορφή διασπορά μορίων πολυμερούς

  • Μεταφορά της ενέργειας του παλμού της ακτίνας laser στην μήτρα, μερική ατμοποίηση της με ακόλουθη μεταφορά άθικτων μορίων πολυμερούς στην αέρια φάση και παραγωγή φορτισμένων αλυσίδων πολυμερούς.


Αρχή Λειτουργίαςφασματογράφου MALDI - TOF


Σκοπός χρησιμοποίησης μήτρας

  • Απορρόφηση της ενέργειας της ακτίνας του laser, και επομένως αποφυγή αποικοδόμησης του πολυμερούς.

  • Ισχυρή απορρόφηση στο μήκος κύματος λειτουργίας του laser, στο οποίο ο αναλύτης δεν απορροφά σημαντικά.

  • Απομόνωση του ενός μορίου του πολυμερούς από τα άλλα.

  • Ελαχιστοποίηση των διαμοριακών αλληλεπιδράσεων πέρα από αυτές μήτρας – αναλύτη, άρα μείωση ενέργειας εξαέρωσης.

  • Συμμετέχει στην δημιουργία των ιόντων είτε σαν μέσο πρωτονίωσης(ανίχνευση κατιόντων) ή μέσο αποπρωτονίωσης (ανίχνευση ανιόντων).

  • Ανίχνευση συγκεντρώσεων της τάξης των picomoles ή και μικρότερες.


Ιδιότητες Ένωσης - Μήτρας

  • Να είναι διαλυτή σε διάλυμα με τον αναλύτη*.

  • Να έχει μεγάλο συντελεστή απορρόφησης στο συγκεκριμένομήκος κύματος λειτουργίας του laser.

  • Η μήτρα θα πρέπει να μην εμφανίζει χημική δραστικότητα με τον αναλύτη.

  • Να έχει μικρή τάση εξάχνωσης


Μήτρες MALDI


Μήτρες MALDI


Μήτρες MALDI


Διαδικασία Ιονισμού Δείγματος


Φασματογράφος Μάζας Χρόνου Πτήσης (TOF – MS)

Στηρίζει την λειτουργία του στη σχέση μεταξύ λόγου μάζας προς φορτίο ενός φορτισμένου σωματιδίου και χρόνου που απαιτείται για να διανύσει μια συγκεκριμένη απόσταση όταν επιταχυνθεί δια μέσου σταθερού ομογενούς πεδίου.

Όπου m = μάζα σωματιδίου, e = ηλεκτρικό φορτίο, E = ένταση ασκούμενου ηλεκτροστατικό πεδίο, d = μήκος περιοχής επιτάχυνσης L = μήκος περιοχής ελεύθερης ηλεκτρικού πεδίουκαι Vo = εφαρμοζόμενο δυναμικό.


Πλεονεκτήματα ανιχνευτή TOF – MS

  • Θεωρητικά έχει άπειρο εύρος τιμών ανιχνευόμενων μαζών.

  • Ιδανικός όπου έχουμε ιονισμό προκαλούμενο από παλμό ή αυτός είναι χωροταξικά περιορισμένος.

  • Ολοκληρωμένο φάσμα μαζών για κάθε περίπτωση ιονισμού.

  • Υψηλή ακρίβεια λόγω υψηλής ταχύτητας μετάβασης ιόντων προς τον ανιχνευτή.

  • Δεν υπάρχει ανάγκη σάρωσης της ακτίνας ιόντων.

  • Το φάσμα λαμβάνεται και με εξαιρετικά μικρές ποσότητες δείγματος(<10-18 mole στα πιο σύγχρονα όργανα).

  • Σχετικά χαμηλό κόστος.


Αρχή λειτουργίας TOF-ΜS ευθύγραμμης κίνησης


Σφάλματα στην TOF – MS ευθύγραμμης κίνησης

  • Κατανομή στο χρόνο.

  • Κατανομή στο χώρο.

  • Κατανομή κινητικής ενέργειας.


Ελαχιστοποίηση σφάλματος

Ανιχνευτής ανάκλασης ιόντων

  • Απλού πεδίου

  • Διπλού πεδίου

  • Τετραγωνικού πεδίου


Μετατροπή Φασμάτων MALDI-TOF MS


Πολυμερές:PPG

MW=5.300

Μn=51.57

Μw=52.27

I=1.01

Εξαγωγή και επεξεργασία δεδομένων


Πολυμερές:Πολυστυρένιο

MW=20.000

Μn=19.337

Μw=19.509

I=1.01

Εξαγωγή και επεξεργασία δεδομένων


Πολυμερή Συμπύκνωσης


Δm=217gr/mol

Δm=134gr/mol

Πολυμερή Συμπύκνωσης


Δm=217gr/mol

Δm=134gr/mol


THE END


  • Login