PENILAIAN TAHAP KESELAMATAN
Download
1 / 10

PENILAIAN TAHAP KESELAMATAN PADA PERINGKAT SEL (I N-VITRO ) MAKMAL SITOTOKSISITI, - PowerPoint PPT Presentation


  • 89 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

PENILAIAN TAHAP KESELAMATAN PADA PERINGKAT SEL (I N-VITRO ) MAKMAL SITOTOKSISITI, PROGRAM TUMBUHAN UBATAN FRIM. TOKSISITI. SELAMAT/TIDAK SESUATU PRODUK. IN VITRO. IN VIVO. HAIWAN MAKMAL. SEL. APA ITU ANALISIS SITOTOKSISITI?.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha

Download Presentation

PENILAIAN TAHAP KESELAMATAN PADA PERINGKAT SEL (I N-VITRO ) MAKMAL SITOTOKSISITI,

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


PENILAIAN TAHAP KESELAMATAN

PADA PERINGKAT

SEL (IN-VITRO)

MAKMAL SITOTOKSISITI,

PROGRAM TUMBUHAN UBATAN

FRIM.


TOKSISITI

SELAMAT/TIDAK SESUATU PRODUK

INVITRO

IN VIVO

HAIWAN MAKMAL

SEL


APA ITU ANALISIS SITOTOKSISITI?

  • Pengukuran sesuatu agen kimia atau apa jua bahan yang berkebolehan untuk merosakkan dan/atau membunuh sesuatu jenis sel.

  • Untuk membantu mengenalpasti substans yang toksik terhadap sel.

  • Merupakan satu kaedah alternatif memandangkan kajian mengenai toksisiti biasanya menggunakan bilangan haiwan makmal dalam kuantiti yang agak banyak.

  • Dilakukan secara in-vitro (untuk ujian saringan) – dapat mengurangkan bilangan penggunaan haiwan di dalam kajian toksikologi, cepat, menjimatkan masa dan kos. Sekiranya sesuatu sampel/produk didapati berpotensi mempunyai kesan toksik kepada sel yang diuji, kajian secara in-vivo wajar dilakukan.


KAEDAH ANALISIS

  • 2 jenis sel yang terlibat ialah VERO (normal kidney cell- ATCC No CCL-81) dan WRL-68 (normal liver cell- ATCC CCL-48). Sel yang digunakan mestilah bebas daripada jangkitan bakteria, yis, kulat, mikoplasma dan virus. Sekiranya terdapat kontaminasi di mana-mana peringkat perkembangan sel, sel tersebut tidak harus digunakan untuk analisis.

  • Mengapa kidney & liver : Kidney & livermerupakan organ utama metabolisme & perkumuhan sesuatu bahan.

  • Sistem bioasai yang digunakan : Sulforhodomine B (SRB) Assay (Skehan et. al, 1990; Voight, 2005) dengan protokol berikut :

    • Tahap kepadatan sel – 2000 sel/well

    • Tempoh inkubasi – 72 jam

    • Jumlah replikasi – 3well/kepekatan, 3 independent eksperimen

    • Paclitaxel, digunakan sebagai kawalan positif.

    • *Peratusan kadar survival relatif kepada kawalan positif didapati dari bacaan spektrofotometer, dan nilai IC50 kemudiannya diperolehi dari lengkung tindakbalas dos.


RINGKASAN KAEDAH

SEEDING 2000cells/well, 5%CO2 and 90% relative humidity in a CO2 incubator, 24 hrs.

TREATMENT 5 different concentration : (0.1, 1. 10, 100 & 1000 µg/ml) for sample and (0.0001, 0.001, 0.01, 0.1 & 1µg/ml) for Paclitaxel, 72hrs incubation period

ASEPTIC

  • % viability

  • IC50 values

SRB ASSAY -fixation - Solubilisation -read absorbance (515nm)

Growth in presence of test material

% viability =

X 100

Growth in absence of test material


KEPUTUSAN ANALISIS

Gambarajah 1 : Tahap ketoksikan untuk 11 produk yang di analisa


Jadual 2 : Nilai Kepekatan Perencatan Median (IC50)

*Nilai IC50 ditentukan daripada lengkung tindakbalas dos


Kriteria pengelasan aktiviti :

Sekiranya nilai IC50 adalah kurang atau bersamaan dengan 20µg/ml untuk sampel yang diuji, sampel tersebut dianggap aktif dan hendaklah diteruskan untuk analisa yang lebih tepat. Sekiranya nilai IC50melebihi 20µg/ml, sampel tersebut di anggap tidak aktif dan selamat.

.


Sebagai kesimpulan, objektif utama penyaringan sitotoksisiti ini adalah untuk mendapatkan pemahaman yang lebih mengenai potensi ketoksikan dan tahap keselamatan sesuatu produk yang digunakan dalam keadaan sebenar.

Walaupun sesuatu sampel/produk menunjukkan keputusan tidak aktif/tidak toksik, namun harus diingat bahawa pengambilan secara berlebihan sesuatu produk/sampel melebihi dos yang disarankan boleh mengakibatkan ketoksikan kepada sel di dalam sistem tubuh badan kita


TERIMA KASIH


ad
  • Login