Lab: Serología Hospital Severo Ochoa
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Lab: Serología Hospital Severo Ochoa. CONCEPCION BELLIDO MARTIN 2º LDC. Técnicas de diagnóstico serológico. AGLUTINACIÓN---- RPR--reagina plasmatica rapida BRUCELLA-- Rosa de. Bengala ELISA----------------- -- E.de Chagas Tripanosomas cruzi

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Lab serolog a hospital severo ochoa

Lab: Serología Hospital Severo Ochoa

CONCEPCION BELLIDO MARTIN

2º LDC


T cnicas de diagn stico serol gico

Técnicas de diagnóstico serológico

  • AGLUTINACIÓN---- RPR--reagina plasmatica rapida

    BRUCELLA-- Rosa de. Bengala

  • ELISA------------------- E.de ChagasTripanosomas cruzi

  • INMUNOFLORESCENCIA—LEISMANIA-- Leismaniosis

    BORDETELA PERTUSI -- tosferina

    PARVOVIRUS B 19-- detección ac IgG,IgM

  • INMUNOGROMATOGRAFÍA—VIRUS de Epstein Baar (Mononuclosis infecciosa)

    HP( Helicobaster Pyroli)

  • HEMAGLUTINACIÓN---PTHA--prueba de aglutinación de Treponema palldun

    QH-----quiste hidatilico

  • WESTEM BLOT---VIH confirmación

  • CENTAURO,este aparato hace difirentes tecnicas:ac y ag de VHB,C,D,VHA Mononucleosis,

    Rubeola,Toxoplasmosis y Cargas Virales.


Lab serolog a hospital severo ochoa

RPR Reagina plasmatica rapida

NEGATIVO

Tecnica para la detección cualitativa y semicuantitativa

de anticuerpos de la sífilis en suero o plasma humano

por aglutinación.

La RPR es una prueba no treponemica por que los an

ticuerpos que detecta no son especificos del T pallidum,

aunque la presencia de los anticuerpos que detecta en

el suero o plasma esta fuertemente asociada con la in

fección de ese organismo.

Este tipo de prueba mide ac(IgG y IgM) producidos

como respuestaal material lipoideo liberado de células

anfitrionas dañadas,asi como material tipo lipoproteina

liberado por las espiroquetas.

La tecnica usa partículas de carbono recubiertas con

una mezcla de aníigenos lipídos que se combinan con

el anticuerpo presente en el suero o plasma las partícu

las se suspenden en un medio que contiene componen

tes para eliminar reacciones no específicas.Las reac

cíones positivas se muestran mediante el agregado

macroscópico de las partículas.

POSITIVO


Lab serolog a hospital severo ochoa

ELISA T.Inmunoensayo enzimático E. de Chagas

Test de ELISA para la detección de anticuerpos contra

Trypanosoma cruzi en suero o plasma.

Enfermedad cronica parasitaria tambien puede ser con

genita o por transfusión de sangre o trasplantes de orga

nos. .

Metodo inmunoenzimatico en el que se recubren pocillos

de una placa de microtitulación con antigenos de T. cruzi

a los pocillos se les añade las muestras a analizar si en es-

ta hay anticuerpos especificos frente aT.cruzi se formara

un complejo estable con el antígeno que recubre el pocillo

despues se lava y extrae el material no unido se añaden

IgG de conejo anti-IgGy anti-IgM humanas marcadas con

perosidasa y, si el complejo An/Ag enzimatico y cromóge

no. Esta solución desarrollara un color azul si la muestra

es positiva,este cambia a amarillo despues de parar la rea

ción con acido sulfúrico.La intensidad del color es propor

cional a la concentración de anticuerpos anti-T.cruzi los po

cillos que contengan muestras negativas no desarrollaran

color.


Lab serolog a hospital severo ochoa

Tecnica de inmunofluorescencia

Las leishmaniosis son un grupo de enfermedades

parasitarías provocada por un protozoo flajelado

perteneciente al género Leishmania

Para hacer esta técnica hay que atemperar los los reactivos y marcar los portas,

Las inmunoglobulinas séricas humanas anti-leishmania

Infantun presentesen la muestra se fijan a los parásitos

depositados sobre los portas, los elementos no fijados

son eliminados con los lavados.

Las inmunoglobulinas se revelan por las inmunoglobuli

nas de cabra anti-inmunoglobulina humanas marcadas

con fluorescencia.Los elementos no fijados son elimina

dos con los lavados

La lectura de resultados se hace con un microscopio de

epifluorescencia.


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Tecnica de inmunocromatocrafia Mononucleosis infecciosa

La mononucleosis infecciosa enfermedad autolimitante

causada por el virus de Epstein Barr,aparece más fre

cuentemente en paises desarrollados entre adoescen

tes de los 14 a los 18 años.

.

Esta técnica detecta los anticuerpos IgM en suero y plas

ma o sangre entera, en esta técnica se utiliza un extracto

de eritrocitos de bovino.En el pocillo de muestra hay una

membrana cubierta con microesferas de latex conjugadas

a anti-cuerpos de cabra anti-IgM en la segunda fase (ven

tana de resultados)hay dos agentes inmovilizados las es

feras de latex y los eritrocitos de bovino, en la tercera fa

se hay un agente capaz de unirse al complejo de anticuer

pos -latex .

se pone la muestra en el pocillo se añade el rebelador el

liquido pasa por capilaridad se une al anticuerpo -latex y

se desplaza hasta la zona con los eritrocitos de bovino Ag

inmobilizado si los anticuerpos anti-MI estan presentes en

la muestra se forma un sandwich de fase solida /anticuer

po anti-MI/anticuerpo latex esto hace que aparecan dos li

neas verticales si el resultado es positivo y una linea si el

resultado es negativo.


Lab serolog a hospital severo ochoa

Tecnica de Biología Molecular

  • B. MOLECULAR---DNA--- VHB

    RNA---VHC genotipo

    RNA—VIH

    PCR --T.real RNA

En mi rotación por el departamento de serología

me comentaron que se hacian las técnicas antes

expuestas pero no tuve la oportunidad de ver nin

guna por eso no las expongo.

VHB


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PTHA -T. de hemaglutinación

Test de hemaglutinación pasiva para la detección

de anticuerpos especificos anti-Treponema palli

dum en suero o plasma humano.

Los hematies de pollo estabilizados se sensibili

zan con un extracto antigénico de Treponema pa

llidun (cepa Nichols). Estos hematies aglutinarán

con los anticuerpos específicos presentes en el

suero o plasma de pacientes afectados por sífilis.

Las reacciones no especifícas se detectan con el

reactivo control no sensibilizado.

Los anticuerpos del grupo Treponema no especiíi

cos no especificos de la sífilis se absorben con un

extracto de Treponema Reiter.

NEGATIVOS

POSITIVO

POSITIVO

POSITIVO

POSITIVO


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Westerm Blot

Los virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 y tipo 2 (VIH-l y VIH-2) han sido claramente identificados como la causa principal del sindrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).

La técnica "western blot" , es una de las más ampliamente utilizadas para confirmar resultados positivos en las pruebas de depistaje de Ac VIH, ya que permite una discriminación puntual de las especificidades de reactividad de anticuerpos frente a las distintas proteínas del virus.

Las tiras de nitrocelulosa en las que se han transferido las proteínas del virus contienen, generalmente, casi todas las proteínas estructurales del VIH, algunas proteinas precursoras de aquellas, y además otros antígenos celulares contaminantes que proceden de las células infectadas empleadas para la obtención del Ag vírico . Algunas tiras de WB comercializadas para VIH- 1 incluyen, además, algún péptido sintético, correspondiente a glicoproteínas específicas de VIH-2, a efectos de identificación de la infección VIH con una sola tira de reactivo.

La técnica de WB consiste, básicamente, en la incubación de una de esas tiras con el suero problema durante un tiempo que oscila entre 2 a 4 horas hasta 18 horas, tras lo cual se revela la presencia de anticuerpos frente a las diferentes proteinas del virus mediante reacciones inmunoenzimáticas de distinta configuración dependiendo del fabricante. El resultado es la aparición de bandas coloreadas de mayor o menor intensidad, en el lugar de la tira de nitrocelulosa en el que están situadas las proteinas del VIH contra las cuales existen anticuerpos en el suero problema.


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Centauro

Este aparato,llamado Centauro 2000 es el encar

gado de hacer muchas de las técnicas que se

hacen en la sección de serología lo unico que ne

cesita es un Tecnico especialista de laboratorio que

le programe todos los dias y atienda sus necesi

dades de H2O, calibradores, cubetas,puntas y con

troles, ya, comienza a trabajar haciendo técnicas

como: Rubeola, toxoplasmosis,VIH, agVIHs,acVHB

VHC,Core, Delta,


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