Enterobactérias

1. Enterobactérias Família Enterobacteriaceae

2. Enterobactérias • Bacilos Gram negativos • Maioria habita intestino do homem e de animais • Como flora normal • Ou como agentes de infecção • Podem ser encontrados numa grande diversidade de locais: água, plantas, solo • Mas é importante ressaltar: principalmente no intestino (entérica = trato intestinal)

3. Bactérias Enteropatogênicas • Quando são patogênicas – enteropatogênicas • Causam diarréia no homem e em animais • Importantes em diarréias e disenterias • Peculiaridades: • Todas são bacilos Gram negativos • Todas fermentam glicose

4. Escherichia Shigella Citrobacter Salmonella Enterobacter Edwardsiella Klebsiella Hafnia Serratia Proteus Yersinia Providencia Gêneros

5. Atributos • Flagelo – Ag H (motilidade) • Algumas são imóveis • Cápsula – Ag K • Pili – importante na recombinação • Fímbrias – aderência à mucosa • Ag O – polissacarídeo do LPS (Ag somático) • Lipídio A – parte tóxica do LPS

6. LPS - lipopolissacarídeo • LPS – lipídio em combinação com polissacarídeos e proteínas – formando a principal porção da parece celular de em Gram – • Polissacarídeo se divide em core e polissacarídeo O • Polissacarídeo O fica conectado ao core e é formado por seqüências repetidas de diferentes açúcares = responsável pela especificidade antigênica dos organismos

7. LPS • Porção lipídica (ácidos graxos) – principal componente responsável por manifestações de atividade endotóxica em pacientes com sepsis por bactérias Gram- (febre, choque, colapso vascular e hemorragia) • Endodotoxina também causa ativação do sistema Complemento e pode provocar coagulação intravascular disseminada

9. Enterobactérias • Algumas espécies são divididas em tipos sorológicos ou sorotipos, tomando-se por base a especificidade imunológica dos Ags O, K, H. • Na rotina: E. coli, Shigella, Salmonella, e Y. enterocolitica. • Além de ter finalidade epidemiológica, no caso de E. coli e Y. enterocolitica, serve para caracterizar sorotipos enteropatogênicos

10. Escherichia coli • Possui Ag O, H, K. • 181 grupos sorológicos diferentes de E. coli • O – 181 (sorogrupos) • H – 57 (sorotipos) • K – 100 (biosorotipos) – diferenças sorológicas e bioquímicas • Nem todas as E. coli são enteropatogênicas

11. E. coli enteropatogênicas • EPEC – lesões A/E • EIEC – invasão • ETEC – enterotoxinas e fímbrias de colonização • EHEC – Stx, Ehly lesões A/E

12. ETEC – Escherichia coli enterotoxigência • Fator de colonização • Produção e liberação de toxinas • Toxinas codificadas por plasmídios • Enterotoxinas: • LT (termo lábil – inativada a 60°C por 15´) • ST (termo estável – resistente a 60°C por 15´)

13. LT • LT – mais imunogênica que ST • No caso de diarréia geralmente as 2 estão associadas • LT-I – subunidades A e B – humanos e animais • LT-II – Subunidades A e B – animais e raramente em humanos • Subunidade B adere na membrana da célula. Toxina A entra no citoplasma, ativa adenil ciclase, aumentando AMPc. Isso provoca liberação de Na e retenção de K = diarréia aquosa

14. ST • STa e STb • Mesmo mecanismo de LT. Adere por Ag de colonização. Produz ST, que se liga à receptores na célula, aumenta GMPc, provocando diarréia aquosa. • STb – importância somente em animais • STa – importância para o homem e animais

15. Mecanismo de Ação • Amostra ETEC atravessa barreira gástrica, fixa-se à mucosa do intestino delgado através das fímbrias, prolifera e produz enterotoxinas (1 ou ambas). Toxinas determinam a diarréia aquosa. • Infecção por ETEC é superficial (bactéria não penetra no epitélio intestinal) – fezes de pacientes não apresentam leucócitos, sangue ou muco • Ocorrem tanto em crianças como em adultos • Diarréia dos viajantes

16. Fonte de infecção e transmissão • As ETEC que causam infecção no homem têm como reservatório o próprio homem • Transmissão pela ingestão de água e alimentos contaminados • Evidências de transmissão por contato pessoal, em berçários e enfermarias de pediatria

17. Diagnóstico • Através da pesquisa de enterotoxinas LT-I e STa nas amostras de E.coli isoladas das fezes do paciente. • Testes imunológicos – precipitação em gel e aglutinação de hemácias • Testes genéticos: PCR e sondas

18. EPEC – Escherichia coli enteropatogênica • Agentes mais freqüentes de diarréia infantil no Brasil – até + ou – 6 meses • Somente sorotipos determinados são relacionados à diarréia. • No Brasil os mais freqüentes são: O111:H-, O111:H2 e O119:H6 • Não produzem toxina • Aderem de forma localizada em linhagens celulares

19. Patogenicidade • Devida principalmente à produção das lesões A/E (attaching and effacing) • Bactéria se adere à célula, de maneira localizada, entregando à mesma diversas proteínas que provocam desarranjo no citoesqueleto celular. • Estes desarranjos resultam na destruição das células intestinais, provocando assim a diarréia.

20. Patogenicidade

21. Fonte de infecção e transmissão • O reservatório parece ser o próprio homem, porém estudos recentes apontam amostras EPEC em animais domésticos, como por ex, os cães • Transmissão: em hospitais e berçários a bactéria é transmitida por contato pessoal • Crianças com diarréia representam a principal fonte de infecção. • Infecção parece ser mais grave em crianças que não se alimentam de leite materno • Mecanismo de transmissão na comunidade ainda não foi estabelecido

22. Diagnóstico • Isolamento de EPEC das fezes em meio MacConkey • Identificação através de provas bioquímicas e pela sorologia (OH) • PCR e sondas

23. EIEC – Escherichia coli enteroinvasora • Biosorotipos bem definidos • Capacidade de penetrar e proliferar no interior da célula e provocar doença parece ser dependente de genes plasmidiais e cromossômicos

24. Patogenicidade • Semelhante a de Shigella • Infecção intestinal consiste de inflamação e necrose da mucosa do íleo terminal e do cólon. • Teste de Sereny – inoculação no olho de cobaio albino – I=prolifera provocando cerato-conjuntivite - cura espontânea em 2 ou 3 semanas

25. Teste de sereny

26. Fonte de infecção e transmissão • As infecções por EIEC são mais comuns na criança, maior de 2 anos e no adulto • Reservatório é o próprio homem. • Infecção adquirida por ingestão de água e alimentos contaminados e por contato pessoal

27. Diagnóstico • Coprocultura • Meio MacConkey e SS e caracterização de biosorotipos • Sondas e PCR • Teste de Sereny reservado para amostras duvidosas

28. EHEC – Escherichia coli enterohemorrágica • Provoca diarréia sanguinolenta (CH) e pode evoluir para síndrome hemolítica urêmica (SHU), levando à falência renal • Cerca de 5% dos casos de SHU chegam à morte do indivíduo • Descrita primeiramente nos EUA e Canadá, associada a ingestão de hambúrgueres contaminados com O157:H7. Hoje sabe-se de outros sorotipos envolvidos (O111:H-, O26:H11, O118:H16 e outros descritos como EHEC não O157)

29. Patogenicidade • Toxina Stx – Semelhante à toxina de Shigella. • Stx1 e Stx2 – induz acúmulo de fluido devido à morte seletiva de células absortivas das vilosidades, diminuindo a absorção intestinal e secreção de fluídos. Estas mudanças desregulam o balanço da absorção, favorecendo a secreção de líquidos – diarréia • Lesões A/E • Ehly

30. Fonte de infecção e transmissão • Estudos sugerem o gado bovino como principal fonte de infecção • Transmissão: A maioria dos casos de doenças por EHEC reconhecida nos Estados Unidos está associada com a ingestão de carne mal cozida e leite cru. Surtos também têm sido associados a produtos agrícolas contaminados com estrume bovino. • Contato pessoa-pessoa

31. Diagnóstico • Testes imunológicos (SIM, sorologia, ELISA) • PCR e sondas

32. E. coli em infecções extra intestinais • EPEC, EIEC, EHEC, e ETEC – raramente causam infecções extra intestinais • Extra intestinais – sorogrupos da flora normal intestinal que podem ir para qualquer órgão ou tecido • + freqüentes: • Infecções urinárias (90%) • Meningite do recém nascido • Bacteremia

33. Urinárias: • 90% dos casos (na comunidade) são E. coli • Indivíduos hospitalizados a incidência é  • E. coli com fímbria P – aderência à mucosa das vias urinárias • E. coli da fezes coloniza a uretra e vai para as vias urinárias superiores • Meningite: • Diferentes sorogrupos, mas possuem Ag K1 semelhante ao de N. meningitidis do grupo B • Normalmente o Bebê adquire a bactéria da mãe

34. Bacteremia: • 40 a 50% das bacteremias por Gram- são devidas a E. coli • Fontes mais comuns de infecção são o trato urinário e digestivo, cateteres intravenosos, aparelhos respiratório e pele. • Diagnóstico: isolamento e identificação bioquímica • Tratamento: Antibióticos, devendo-se levar em consideração a sensibilidade da amostra e a concentração que atinge no local da infecção

35. Shigella • Quatro espécies: • S. dysenteriae • S. flexneri • S. boydii • S. sonnei • São desprovidas dos antígenos K e H – imóveis • Sorotipos caracterizados somente pelo Ag O

36. Shigella • Causam disenteria, dores abdominais, muco e sangue (shigelose ou disenteria bacilar) • Shigelose localiza-se no íleo terminal e cólon, caracterizando-se por invasão e destruição da camada epitelial da mucosa, com intensa reação inflamatória – leucócitos, muco e sangue nas fezes • Transmissão através de água e alimentos • Tem alto poder infectante (100-200mg) • Período de incubação é curto

37. Shigella • Não ocorre em animais • Raramente invade a circulação do paciente. • S. dysenteriae tipo 1 pode provocar a síndrome hemolítica urêmica, pois produz altos níveis de Stx • Capacidade de penetrar no epitélio é mediada por genes plasmidiais e as demais fases são mediadas por genes cromossômicos = EIEC

38. Fonte de infecção e transmissão • Ocorre em qualquer idade, mas incidência maior a partir dos 2 anos • Infecção transmitida através de água, alimentos contaminados e também por contato pessoal • Reservatório é o homem, sadio ou doente

39. Diagnóstico • Isolamento da Shigella das fezes em meios MacConkey e SS e identificação por provas bioquímicas e sorológicas • Shigelose exige tratamento específico • O antimicrobiano deve atingir concentrações séricas para que as bactérias que se encontram no interior da mucosa possam ser atingidas

40. Salmonella • S. typhi • S. cholerasuis • S. enteritidis • Provocam 4 tipos clínicos de infecção:

41. Salmonella • 1o. Gastroenterite: • Mais freqüente • Varia de diarréia média à grave, febre baixa, graus variados de náusea e vômito • 2o. Bacteremia ou septicemia: • Sem principais sintomas gastrointestinais (S. cholerasuis é particularmente invasiva) • Caracterizada por febre alta e cultura de sangue positiva

42. Salmonella • 3o. Febre entérica: • Causada por algumas sp • Febre média e diarréia, exceto nos casos clássicos de febre tifóide (S. typhi) onde a doença é bifásica: • 1 a 2 semanas de febre e constipação - sangue + fezes – • Segunda fase – diarréica – sangue – e cultura fezes + • 4o. Carreador: • Pessoa que teve a infecção, principalmente por S. typhi, continua excretando o mg nas fezes por mais de 1 ano

43. Transmissão e controle • Transmissão: • Produtos contaminados (ingestão) • Maionese – aves (casca rachada – higiene) • Principalmente nos meses quentes • Controle: • Enterocolites – tratamento dos sintomas • Antibiótico piora quadro clínico • Febre tifóide – cloranfenicol e ampicilina • Infecções sistêmicas – Antibióticos • HIGIENE

44. Identificação • Isolamento: • Ágares SS e MacConkey, além do ágar verde brilhante • Identificação: • Provas bioquímicas e sorologia

45. Yersinia • Y. pestis • Agente da peste • Distribuição universal • Hoje é rara e limitada a áreas endêmicas • Reservatório – roedores • Roedores passa 1 para o outro por pulgas e tb para o homem • 3 formas da peste: • Bubônica – inflamação dos linfonodos (inguinais e axilares) • Pulmonar – complicação da bubônica ou contato com pacientes • Septicêmica – rara – só no pico das epidemias. Possui Ag superficiais – resistência à fagocitose (38°C) - Exotoxina

46. Yersinia • Y. enterocolitica • Existe no meio ambiente e em várias sp animais em condições normais ou patológicas • Provoca diferentes tipos de infecção: • Principal é intestinal – diarréia e dor abdominal • Mais raro – inflamação do íleo terminal e gânglios mesentéricos • Transmissão: alimentos • Diagnóstico – cultivo de fezes em MacConkey e SS • Identificação: provas bioquímicas e sorologia

47. Yersinia • Y. pseudotuberculosis • Rara enterocolite • Transmissão - água e alimentos • Reservatório – aves e roedores

48. Edwardsiella tarda • Infecção intestinal no homem • Invasão da mucosa • Presença de sangue, muco e leucócitos nas fezes dos pacientes • Também presente em infecções extra intestinais

49. Citrobacter • Raramente associado a infecção intestinal • Extra intestinais: • Pielonefrites, meningites do recém-nascido, abscesso cerebral, endocardite e bacteremias - nosocomiais

50. Klebsiella • Encontrada normalmente no intestino • K. pneumoniae – pneumonia nos lobos superiores (necrose que pode levar à formação de cavidades) • Infecções pós cirúrgicas – outros órgãos • Espécies fortemente capsuladas