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Introducción a la Célula Microscopía PowerPoint PPT Presentation


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Introducción a la Célula Microscopía. JA Cardé, PhD UPR-Aguadilla. Objetivos. Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones. Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula.

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Introducción a la Célula Microscopía

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Presentation Transcript


Introducción a la CélulaMicroscopía

JA Cardé, PhD

UPR-Aguadilla


Objetivos

  • Repasar las partes que componen el microscopio y sus funciones.

  • Conocer los diferentes microscopios utilizados para estudiar la célula.

  • Establecer la importancia que posee el uso del microscopio en el estudio de la célula a distintos niveles.

  • Practicar en el uso y manejor el correcto del microscopio.


El Microscopio


Terminología

  • magnificación

  • resolución

  • apertura numérica

  • índice de refracción

  • inversión

  • profundidad

  • contraste

  • parfocal


Resolución

= 0.6 x largo de onda____________________Apertura Numérica (NA)


Apertura Numérica


Indice de refracción


01_06_What can we see.jpg

Resolución: distancia mínima entre dos puntos a la que son distinguidos como dos puntos

Cuál microscopio tendrá una mejor resolucion: uno con 200nm o uno con 0.2 nm?


01_09_Scale.jpg


Tipos de Microscopios

  • Tipo Uso / Imagen

  • campo brillante : tejido, células, microorganismos vivos o fijos. Imagen: gris o negro con fondo blanco. Comunes, baja resolución

  • campo oscuro : especímenes sin tinción. Imagen: fondo oscuro imagen brillante

  • invertidos: morfología de cultivos vivos, Imagen: gris cultivo de tejido

  • contraste de fase: especímenes vivos, no tinción, Imagen: grises;


  • -1000X

  • r: 0.2um

  • 3 factores

  • luz enfocada por condensador

  • buena preparación para que la luz pase

  • conjunto de lentes y buen enfoque


01_04_Early microscopes.jpg


01_07_Internal structures.jpg


01_05_Cells form tissues.jpg


Tipos de Microscopios

  • Tipo Uso / Imagen

  • fluorescencia: estructuras discretas, fluorocromos, UV

  • confocal: organelos, citoesqueleto, macromoleculas, laser, imagen fluorescente, alta resolución

  • TEM: estructuras internas celulares, imagen blanco/negro 2D, alta resolución

  • SEM: estructuras externas, image, 3D, alta resolución


01_17_Mitochondria.jpg


01_27_cytoskeleton.jpg

Citoesqueleto

  • -Unico de eucariotas

  • Actina, tubulina

  • Dirigen y Guian los Movimientos celulares


01_08_TEM.jpg


01_11_E. Coli.jpg


01_14_Yeasts.jpg


01_15_Nucleus.jpg


01_16_Chromosomes.jpg


01_18_folds mito.jpg


01_20_Chloroplasts.jpg


01_22_ER.jpg


01_23_Golgi apparatus.jpg


01_28_Microtubules.jpg

- Abonan al concepto de un citop dinamico!!


01_30_protozoan eats.jpg


Organismos Modelos


Ocular

Cuerpo tubular

Brazo

Revolver

Pinzas

Objetivos

Carro mecanico

Laminilla

Platina

Macro

Condensador/Diafragma

Lampara

Micro

Nivel

Base


Visualización Célula

Microscopios

Laminillas

Cubreobjetos

Cubeta o bandeja de tinción

Agujas

Pinzas

Escalpelo

Pinzas

Acetocarmín y Azul de metileno

Goteros

Cebolla

Palillos de dientes

Agua


Protocolo

  • Separar una de las hojas internas de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava.

  • Depositar el fragmento de membrana en una laminilla con unas gotas de agua. Pon el porta sobre bandeja de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes.

  • Escurrir el agua, añadir una gotas de Acetocarmín sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente.

  • ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación del mismo!


Protocolo…

  • Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante.

  • Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio.

  • Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. (10x y 40x)

  • Identifica las distintas células del tejido epidérmico y las de las hojas del bulbo de cebolla si estuviera disponible


Cebolla nativa (150x)

Cebolla azul metilen (150x).


Núcleo (600x)

Retículo Endoplásmico (600x)


Células Epiteliales Bucales

  • Raspa suavemente el interior de la mejilla con un palillo (siempre por la parte roma, procurando no cortarse).

  • Coloca la mucosa blanca que se obtiene en el portaobjetos, añade una gota de agua.

  • Realiza una extensión (frotis) deslizando el borde de un porta sobre el que tiene la muestra.


Protocolo…

  • Coloca el porta en la placa de Petri, añade unas gotas de colorante sobre la muestra y déjalo actuar durante cinco minutos.

  • Lava con cuidado el exceso de colorante y sécalo con un poco de papel de filtro.

  • Añade una gota de agua a la muestra.

  • Coloca el cubreobjeto apoyándolo por un lado y dejándolo caer para que no queden burbujas.

  • Observa la preparación al microscopio, utilizando varios objetivos, realiza un dibujo detallado de las células e indica el aumento del mismo.


Células epitelio bucal con azul de metileno


Resultados y Discusión

  • Prepara en tu libreta dibujos de las células sin tinción y con tinción en distintos aumentos.

  • Rotula e identifica las partes de la célula en los dibujos.

  • Busca en internet las estructuras principales de la célula con su nombre y función.

  • Compara y contrasta células animales con vegetales.

  • A que se podría deber que el núcleo adquiera mas intensidad de color?

  • Que mas se observo ademas de células de mucosa bucal?


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