1 / 13

T ehnologija rekombinantne DNK - g enetičko inženjerstvo

T ehnologija rekombinantne DNK - g enetičko inženjerstvo. Skup in vitro tehnika kojima je omogućeno stvaranje himernih molekula DNK Kloniranje gena: Izolovanje gena iz organizma Prebacivanje u manje genome - vektore za kloniranje Ubacivanje u ćeliju domaćina

mohawk
Download Presentation

T ehnologija rekombinantne DNK - g enetičko inženjerstvo

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Tehnologija rekombinantne DNK-genetičko inženjerstvo • Skup in vitro tehnika kojima je omogućeno stvaranje himernih molekula DNK • Kloniranje gena: • Izolovanje gena iz organizma • Prebacivanje u manje genome - vektore za kloniranje • Ubacivanje u ćeliju domaćina • Amplifikacija gena u domaćinu ili ekspresija stranog proteina u domaćinu • Primena u istraživanju ili komercijalnoj proizvodnji korisnih produkta

  2. Restrikcione endonukleaze tipa II • Najčešći tip kod bakterija • Dimeri, seku dvolančanu DNK asimetrično na palindromskim sekvencamakoje nisu modifikovane • Dobijaju ime prema bakteriji iz koje su izolovane (EcoRI, HindIII, BsuRI, BamHI itd) ..G׀AATTC.. .G AATTC.. GAATTC ..C TTAA׀G.. .CTTAA G.. CTTAAG • Produkuju molekule različite dužine sa jednolančanim komplementarnim krajevima

  3. Dobijanje himernih DNK molekula • Tretiranje izolovane DNK restrikcionom endonukleazom • Tretiranje izolovane DNK vektora istim enzimom • Povezivanje molekula pomoću DNK ligaze • Ubacivanje u ćeliju domaćina transformacijom

  4. Osobine vektora za kloniranje • Mali dobro okarakterisani DNK molekuli (do 10 kbp) • Autonomno se repliciraju u domaćinu i prenose u ćerke ćelije • Imaju selektabilne genetičke markere • Imaju jedno restrikciono mesto

  5. Vektori za kloniranje • Plazmidi, derivati prirodnih • Virusi, uglavnom bakteriofagi • Kozmidi • Veštački hromozomi • Ekpresioni vektori • Šatl vektori

  6. Ćelije domaćini za kloniranje

  7. Kloniranje u plazmid pBR322

  8. Identifikacija klona

  9. Konstrukcija probe na osnovu iRNK - cDNK

  10. Konstrukcija probe na osnovu poznate sekvence aminokiselina

More Related