BASES MICROBIOLOGICAS DE LA TERAPÉUTICA
Download
1 / 42

BASES MICROBIOLOGICAS DE LA TERAPÉUTICA Y LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA - PowerPoint PPT Presentation


  • 91 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

BASES MICROBIOLOGICAS DE LA TERAPÉUTICA Y LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA Máster en investigación médica, clínica y experimental FARMACOLOGIA INTRACELULAR DE ANTIMICROBIANOS Dra. Sofía Ballesta Mudarra. Farmacología intracelular.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha

Download Presentation

BASES MICROBIOLOGICAS DE LA TERAPÉUTICA Y LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


BASES MICROBIOLOGICAS DE LA TERAPÉUTICA

Y LA RESISTENCIA ANTIMICROBIANA

Máster en investigación médica, clínica y experimental

FARMACOLOGIA INTRACELULAR DE ANTIMICROBIANOS

Dra. Sofía Ballesta Mudarra


Farmacología intracelular

El objetivo del tratamiento antimicrobiano es concentrar en el lugar de la infección suficiente cantidad de antimicrobiano para inhibir o destruir al microorganismo

En este sentido los parámetros

PK/PD son predictivos del perfil

farmacocinético; son parámetros

que correlacionan la eficacia

frente a infecciones extracelulares

Para patógenos intracelulares, el lugar donde debe concentrarse el antimicrobiano es menos accesible.


Farmacología intracelular

Relaciones microorganismos y huésped

  • Intracelulares obligados.

  • Intracelulares facultativos.

  • Intracelulares oportunistas.


Farmacología intracelular

Bacterias intracelulares en

  • Células fagocíticas

  • Células no fagocíticas


Farmacología intracelular


Farmacología intracelular

La actividad intracelular

donde se localice la bacteria ??

donde se acumule el antimicrobiano??


Farmacología intracelular

  • Concentración intracelular / concentración extracelular

    Selección del ATB adecuado

    DISEÑO de moléculas nuevas

Ci/Ce


Farmacología intracelular

PENETRACION INTRACELULAR DE LOS ATB


Farmacología intracelular

1. Parámetros F-Q que rigen la penetración de ATB

  • LipofíliaP = coeficiente de reparto

  • Peso Molecular <700 Da

  • Capacidad de unión a proteinas

  • Naturaleza acido-base de la molécula

    Ka; pKa


Farmacología intracelular

1. Parámetros F-Q que rigen la penetración de ATB

  • Naturaleza acido-base de la mólecula

Quinolonas (anfotéricas)

Macrólidos (carácter básico)

Betalactámicos(acidos orgánicos)


Farmacología intracelular

2. Mecanismo de penetración de ATB en la célula

Difusión pasiva

  • Moléculas

  • Neutras

  • Lipófilas

  • <700 Da

  • Quinolonas; Ce/Ci = 4-20

  • Betalactámicos; Ce/Ci = 1

  • Macrólidos Ce/Ci = 40-50


Farmacología intracelular

2. Mecanismo de penetración de ATB en la célula

  • Moléculas

  • Análogos de sustratos

  • Con o sin Energía

  • - Quinolonas y

  • - Betalactámicos

Difusión a través de canales proteicos

Activo pasivo


Farmacología intracelular

  • 2. Mecanismo de penetración de ATB en la célula

  • Moléculas

  • (No neutras)

  • Moléculas demasiados polares

  • (<<700 Da)

  • Moléculas demasiados voluminosas

  • - Aminoglicosidos Ce/Ci = 4-20

  • - Glicopéptidos Ce/Ci = 8-300

Endocitosis


Farmacología intracelular

Salida del ATB de la célula


Salida del ATB de la célula

Farmacología intracelular


Farmacología intracelular

3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Aislamiento de células

  • Incubación células + ATB

  • Medición de la concentración del ATB intracelular


Farmacología intracelular

3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

Aislamiento de células


Farmacología intracelular

3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

Inclubación de células con antibióticos

  • Diferentes tiempos de incubación

  • Distintos tipos de ATB

  • Diferentes concentraciones de ATB

  • Diferentes condiciones de pH, tª…


Farmacología intracelular

  • 3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Medición de la concentración del ATB intracelular

  • Cromatografía

  • Radiometría

  • Fluorometría

  • Microbiología


Farmacología intracelular

  • 3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Técnica cromatográfica

  • VHPLC muy especifica

  • IRequiere grandes volúmenes de células

  • IAltas concentraciones de ATC


Farmacología intracelular

  • 3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Técnica radiométrica

  • VMuy sensible y reproducible

  • IATB marcados radiactivamente


Farmacología intracelular

  • 3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Técnica fluorométrica

  • VMuy sensible y reproducible

  • IATB con fluorescencia


Farmacología intracelular

  • 3. ESTUDIOS DE PENETRACION INTRACELULAR

  • Técnica microbiológica

  • VMide actividad antimicrobiana

  • IPoco reproducible

  • IMuy laboriosa


Farmacología intracelular

  • Caracterizacion del paso por difusión pasiva

    Viabilidad celular

    Temperaturas

    Saturación del proceso

  • Caracterizacion del transporte mediado. ACTIVO

    Inhibidores metabólicos

    Inhibidores de fuentes de energía ( NaCN, FNa, 2,4 dinitrofenol)

    Desacoplantes de potencial de membrana (ouabaína)

  • Caracterizacion del transporte mediado. PASIVO

    Análogos del transporte

    Estimuladores celulares

  • Caracterizacion del efflux

    Inhibidores de bombas

    Temperatura, viabilidad…

Caracterización de la penetración de ATB


Farmacología intracelular

  • MEDIDA DE LA ACTIVIDAD INTRACELULAR


Farmacología intracelular

  • MEDIDA DE LA ACTIVIDAD INTRACELULAR

Medición de la reducción que se produce en la

supervivencia intracelular de las bacterias


Diseño de moléculas nuevas


Formulación de nuevos fármacos


Formulación de nuevos fármacos


Diseño de nuevas moléculas.


Fluorquinolonas

  • Activos intracelularmente frente a patógenos intracelulares como Micobacteria, Legionella spp, Streptococcus pneumoniae y Sthapylococcus aureus.

  • Mecanismos de resistencia específicos asociados con mutaciones, principalmente en los genes gyr A y parC.

UB-8902 . Esta molécula se diseña con objeto de mejorar la actividad de ciprofloxacino y norfloxacino frente a cepas resistentes.


XR1R2R3R4R5R6

CiprofloxacinoNHC3H5HHHH-

UB-8902NC3H5HHHHMet


Objetivo

  • Evaluar la penetración de UB-8902 en leucocitos polimorfonucleares hunanos (PMNs)

  • Estudiar la actividad intracelular de UB-8902 frente a S. aureus con resistecia asociada con mutaciones en los genes gyr A o parC


Cinética de penetración y eflujo de UB-8902

  • Tras 20 minutos de incubación con concentración extracelular de 2 mg/mL se alcanzan concentraciones intracelulares de 13,5 mg/mL (C/E=6.5).

  • Tras cinco minutos de incubación en medio libre de antimicrobiano se libera el 70% del mismo desde el interior de los PMN.


PENETRACIÓN DE UB-8902 EN PMN


La cantidad de UB-8902 asociado a PMNS se saturó a concentraciones > 50 mg/ML


Influencia de los factores ambientales


Efecto de los estímulos de membrana

a p <0.05 compared with the control.


Actividad Intracelular de UB-8902

La actividad de UB892 comparada con ciprofloxacino

se ve aumentada 16 veces


*

*

*

*

*

*

*

  • En la cepa salvaje, UB 8902 provocó una reducción significativa de la supervivencia intracelular con las tres concentraciones extracelulares ensayadas.

  • En las cepas mutadas, solo produjo una reducción significativa de la supervivencia intracelular a con > 1 mg/mL, no apreciándose diferencias significativas entre ambos tipos de cepas


ad
  • Login