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PART Ⅰ 色谱基础知识 南方医院临床试验研究中心 李 科 联系电话: 62787825/62787815 - PowerPoint PPT Presentation


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PART Ⅰ 色谱基础知识 南方医院临床试验研究中心 李 科 联系电话: 62787825/62787815. 一、色谱起源 色谱法起源于 20 世纪初, 1906 年 俄国植物学家 米哈伊茨维特 用 碳酸钙 填充竖立的玻璃管,以 石油醚 洗脱植物色素的提取液,经过一段时间洗脱之后,植物色素在碳酸钙柱中实现分离,由一条色带分散为数条平行的色带。由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带,因此茨维特将这种方法命名为色谱法。. 色谱. 石油醚. 组分. 色素. 碳酸钙颗粒. 色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离和定量.

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PART Ⅰ 色谱基础知识 南方医院临床试验研究中心 李 科 联系电话: 62787825/62787815

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Presentation Transcript


PART

62787825/62787815


201906




  • ppm-ppb -

  • 1-100L


  • Gaschromatography GC.

  • Liquid chromatography LC.


HPLC VS GC

  • ,


HPLC VS GC

  • ,


HPLC

  • (NP-HPLC)

  • (RP-HPLC)

  • (RPIC)

  • (IEC)

  • (SEC)

  • (Chiral separation mode)


  • :


HPLC

  • C18 (ODS) type

  • C8 (octyl) type

  • C4 (butyl) type

  • Phenyl type

  • TMS type

  • Cyano type

Non-polar property

-Si-C18H37

Si


: /


HPLC

-Si-CH2CH2CH2CN

-Si-CH2CH2CH2NH2

-Si-CH2CH2CH2OCH(OH)-CH2(OH)

Si

Si

Silica gel

Modified Si


  • NH2APSCNCPS/



  • 3-10m

  • 80-100A



  • h

  • W W h

  • t0

  • tR,

  • (t'R)t'R= tR-t0

  • k k= t'R t0 k


  • n n=5.54(tR/ W h)2

  • n=16(tR/W)2

  • H H= L/n L:


  • R) R= 2tR2-tR1/W1+W2)

  • R<1,

  • R=1,98%

  • R=1.5,99.7%


  • T T= W0.05/ 2d0.05

  • W0.05 W0.05 5% D0.05 5%

  • T0.951.05T<0.95T>1.05



  • HPLC


(nm)


HPLC

  • 1

  • 2

  • 3

  • 4

  • 5

  • 6


  • HPLC18.20.22um


0.45um


66

,70%


1

2



A

A

B

B

B


MeOH / H2O = 6 / 4

MeOH / H2O = 8 / 2

( column : ODS type )


95%

MeOH

30%


/


/

    • ()



ODS

1150kgf/cm215cm

24050

3PH27.5



LC

  • UV/VIS

  • PDA

  • RID

  • CDD

  • RF

  • L-ECD

  • MS

  • ELSD



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