Automated Hematology
1 / 47

Automated Hematology Dr.P.Dahim Health Reference Laboratory - PowerPoint PPT Presentation

  • Uploaded on

Automated Hematology Dr.P.Dahim Health Reference Laboratory. Principles of Automation Calibration Quality Control Flagging. Hematology Automation. Two General Principles Electronic resistance ( impedance) Light scattering. Electronic Resistance (Impedance).

I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about ' Automated Hematology Dr.P.Dahim Health Reference Laboratory' - linh

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript

Automated Hematology


Health Reference Laboratory

Hematology automation
Hematology Automation

  • Two General Principles

    • Electronic resistance ( impedance)

    • Light scattering

Electronic resistance impedance
Electronic Resistance (Impedance)

  • Utilizes non-conductive properties of blood cells

    • as blood cell passes through orifice of aperture it displaces its own volume

    • increased resistance between electrodes results in an electrical pulse

    • RBCs and Platelets counted together, separated by pulse heights

    • hydrodynamic focusing forces cells to pass single file through sensing zone

Light scattering
Light scattering

  • Cells counted as passed through focused beam of light( LASER)

  • Sum of diffraction(bending around corners), refraction (bending due to change in speed) and reflection (light rays turned back by obstruction).

  • Multi angle polarized scatter separation (M.A.P.S.S)

    • 0° : indicator of cell size

    • 10° : indicator of cell structure and complexity

    • 90° polarized: indicates nuclear lobularity

    • 90° depolarized: differentiate eosinophils

Principles of counting sizing
Principles of counting &sizing

  • Counting and sizing red cells ,WBCs , Plts by counting the number of pulses and height of pulses

  • Measuring Hb by modified HiCN method

  • Measuring MCV by computing the mean of height of pulses

  • Hct (PCV ) derived from MCV & RBC

  • MCH derived from Hb & RBC

  • MCHC derived from Hb , RBC & MCV

  • RDW: SD or CV of individual measurement of red cell volume

  • HDW :The degree of variation in red cell hemoglobinization,CV of measurements of hemoglobin concentration of individual cells

  • NRBC: included in the WBC counting

Wbc differential count
WBC Differential Count :

  • Impedance technology with current of various frequencies

  • Light scattering & light absorbance

Reticulocyte counting
Reticulocyte counting :

  • Flourescence – based methods


  • RBC, PLT, and WBC plotted on histogram

  • X-Axis

    • Cell size in femtoliters (fL)

  • Y-Axis

    • # of cells


WBC: Distribution with three individual peaks and valleys at specific regions representing the lymphocytes, monocytes, and granulocytes.

All curves normally start and end at baseline

مشخصات شناسنامه دستگاههای شمارشگر سلولی خودکار

1-تاريخ خريد

2- تاريخ نصب ، کاليبراسيون و نام فرد راه اندازی کننده

3- تاريخ شروع بکار

3-کارخانه و کشور سازنده

4- مدل وشماره سريال دستگاه

5- شرايط دستگاه هنگام خريد (نو ، مستعمل ، بازسازی شده )

نکته : علاوه بر شناسنامه ، موارد زير نيز برای هر سل کانتر می بايست بصورت مکتوب در آزمايشگاه موجود باشد .

6- نام وآدرس شرکت پشتيبان شمارشگر سلولی خودکار

7-نام کاربر يا کاربران دستگاه

8- مشخصات و نحوه آموزش کاربر دستگاه توسط شرکت پشتيبان

9-ميزان عدم دقت و عدم دقت دستگاه در هنگام نصب

ساير مستندات شمارشگر سلولی خودکار

- مشخصات محلولها و مواد مصرفی

- تاريخ آخرين سرويس دوره ای و خدمات پشتيبانی

- تاريخ آخرين کاليبراسيون

- تاريخ آخرين تعمير با ذکر قطعه تعويض شده

- تاريخ آخرين مشکل و راه حل آن

اصول کار شمارشگر سلولی خودکار

  • كار با دستگاه سل كانتر مي بايست بطور كامل مطابق كاتالوگ دستگاه يا آموزش كارشناسان شركت پشتيبان صورت گيرد .

اصول کار شمارشگر سلولی خودکار

  • درصورت تعويض کاربر دستگاه ، می بايست از آموزش وی در مورد چگونگی کار با دستگاه و نحوه نگهداری و اصول کنترل کيفی اطمينان حاصل نمود .

اصول کار شمارشگر سلولی خودکار

  • کليه موارد مربوط به نگهداری دستگاه ، از قبيل تاريخ انجام شستشوهای لازم ، تعمير ، سرويس ويا تعويض محلولها می بايست ثبت ونگهداری شوند.

اصول کار شمارشگر سلولی خودکار

هر روز شمارش زمينه يا Back ground دستگاه ارزيابي و در صورت امکان ثبت و نگهداری شود .بطور معمول شمارش زمينه هر دستگاه در کاتالوگ مربوطه آمده است ولی مقادير قابل قبول سازمان جهانی بهداشت به شرح زير می باشند :

  • RBC: <0/03 x 1012/l

  • WBC: <0/04 x 109 / l

  • Haemoglobin: <0/2g/dl

  • Platelets: <5 x 109 /l

Calibration شمارشگر سلولی خودکار

  • Calibration provides the most accurate results possible.

  • For best performance, calibrate all the CBC parameters.

  • The WBC differential is calibrated at the factory. They do not require calibration in the laboratory.

When to calibrate
When to Calibrate شمارشگر سلولی خودکار

  • At installation

  • After the replacement of any component that involves dilution characteristics or the primary measurements (such as the apertures)

  • When advised to do so by your service representative

Calibration شمارشگر سلولی خودکار

Normal fresh blood samples


Accuracy شمارشگر سلولی خودکار

  • 100×ميانگين روش دستگاهي - ميانگين روش دستيCF=

  • ميانگين روش دستگاهی

پايداری کا شمارشگر سلولی خودکارليبراسيون


Sd =√ ∑(d2)- (∑d)2 /n / n-1

tn = d √n 


Precision check
Precision check شمارشگر سلولی خودکار

  • Purpose: check reproducibility of instrument

  • Precision quick method

    • Run 5 replicates of one patient’s sample free of elevated bilirubin, lipemia, and hemoloysis

  • Calculate % CV or SD

  • Refer to the methodology in procedure manual for expected % CV or SD

Quality control
Quality Control شمارشگر سلولی خودکار

  • Purpose of QC

    • Assure proper functionality of instrumentation

    • Monitoring the Integrity of the Calibration

Quality control methods
Quality Control Methods شمارشگر سلولی خودکار

  • Assayed stabilized material (Commercial)

  • Previously analyzed patient samples

    • Easily obtained

    • Cost effective

    • Results and samples readily available

Quality control1
Quality control شمارشگر سلولی خودکار

Replicate tests (control samples)

Control charts

Duplicate & Check tests

Correlation system

Delta check

Daily means of MCV,MCH,MCHC

Comparison the results with reference methods

Replicate tests
Replicate tests شمارشگر سلولی خودکار

  • بررسي عدم دقت دستگاه

Control charts
Control charts شمارشگر سلولی خودکار

  • استفاده از خون كنترل

  • تفسير با استفاده از قوانين سازمان جهاني بهداشت يا وستگارد

Quality control2
Quality Control شمارشگر سلولی خودکار


Repeat the assay ( One time occurrence )

Check integrity of material


Verify instrumentation

Duplicate test
Duplicate test شمارشگر سلولی خودکار

درهرسري کاري 2-3 نمونه به صورت مضاعف((Duplicate آزمايش ميشوند تا با بررسي اختلاف خوانده ها از طريق محاسبات آماري از وجود خطاهاي تصادفي آگاه گرديد . افزايش اختلاف بين دو خوانده بيش از 2SD محاسبه شده ، احتمال وجود خطاي تصادفي را مطرح مي نمايد.

  • SD= √∑d2

  • 2n

Check test
Check test شمارشگر سلولی خودکار

  • در ابتدای سری کاری يا صبح3- 2نمونه آزمايش شده وهمان نمونه ها در انتهاي سري كاري يا بعد از ظهرمجددا آزمايش مي شوند. نتايج حاصل از اين دو آزمايش با استفاده از فرمول Duplicate test قابل مقايسه می باشند . اختلاف نتايج در محدوده 2SD قابل قبول می باشد . در صورت نگهداری نمونه ها در شرايط مناسب ، هرگونه تغيير در نتايج خارج از اين محدوده نشاندهنده اشکال درعملکرد دستگاه و يا معرفها مي باشد.

  • اين آزمايش براي بررسي هموگلوبين و گلبولهای قرمز مناسب بوده و به ميزان کمتر براي شمارش گلبولهاي قرمز و پلاکت کاربرد دارد ولي براي هماتوکريت بخصوص اگر فاصله زماني آزمايش نمونه ها بيش از 6 ساعت باشد کارايي ندارد.

Delta check
Delta check شمارشگر سلولی خودکار

Hb 2 g/l

PCV 0.05 L/L

MCV >6 fL

MCH > 5 pg

WBC Normal to abnormal

Platelets Reduced or increased by more than 50%

Daily means of mcv mch mchc
Daily means of MCV,MCH,MCHC شمارشگر سلولی خودکار

مراکز آزمايشگاهي با پذيرش بيمار زياد (حداقل روزی 100 بيمار

تفاوت مقادير بيش از 3٪ از ميانگين، نشان دهنده بروز خطا و لزوم بررسی کاليبراسيون دستگاه می باشد.

Comparison the results with reference methods
Comparison the results with reference methods شمارشگر سلولی خودکار

انجام محاسبات آماري براي بررسي هم خواني نتايج الزامي است .

ERRORS شمارشگر سلولی خودکار


Reliability of electronic counters
Reliability of Electronic Counters شمارشگر سلولی خودکار

High Precision


- Recirculation of cells

- Red cell agglutination

- Lipid droplets, Microorganisms,

- Extraneous particles

- Faulty maintenance

- Incorrectly calibration

Interfering substances
Interfering substances شمارشگر سلولی خودکار

Cold Agglutinins



Platelet Clumps

RBC fragments



Wbc count interferences
WBC Count Interferences شمارشگر سلولی خودکار

Unusual RBC abnormalities that resist lysing

malarial parasites

giant platelets, platelet clumps, NRBCs

fragmented white cells, agglutinated white cells,

lyse-resistant red cells,

cryoglobulin, some extremely elevate proteins,

unlysed particles greater than 35 fL in size

Rbc count interferences
RBC شمارشگر سلولی خودکار Count Interferences

Very high WBC count,

high concentration of very large platelets,


Hgb شمارشگر سلولی خودکار

Very high WBC count,

Severe lipemia,

certain unusual RBC abnormalities that resist lysing

MCV شمارشگر سلولی خودکار

Very high WBC count,

high concentration of very large platelets,


Flagging شمارشگر سلولی خودکار

  • WBC Suspect flags

    • Blasts

    • Imm Grans

    • Variant lymphs

More flagging
More Flagging شمارشگر سلولی خودکار

  • RBC Suspect flags

    • NRBCs

    • Macrocytic RBCs

    • Dimorphic RBC population

    • Micro RBCs/RBC fragments

    • RBC agglutination

Troubleshooting flagged results
Troubleshooting Flagged Results: شمارشگر سلولی خودکار

  • Refer to the Instrument Manual to troubleshoot codes, flags, and messages displayed with patient results

Thank you for your attention شمارشگر سلولی خودکار