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MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol

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MEDIOS DE CULTIVO Para TP N° 1 Microbiología e Inmunología Parte A Lic. en Biol. Mol Universidad Nacional de San Luis Marzo 2014. PROCARIOTAS. Bacterias. Hongos y levaduras. www.profesorenlinea.cl. EUCARIOTAS. urbinavinos.blogspot.com. Cianobacterias. Protozoos.

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MEDIOS DE CULTIVO

Para TP N° 1

Microbiología e Inmunología Parte A

Lic. en Biol. Mol

Universidad Nacional de San Luis

Marzo 2014

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PROCARIOTAS

Bacterias

Hongos y levaduras

www.profesorenlinea.cl

EUCARIOTAS

urbinavinos.blogspot.com

Cianobacterias

Protozoos

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CONDICIONES QUÍMICAS

  • Elementos energéticos y constitutivos:
  • a) Macroelementos
  • Fuente de carbono
  • Fuente de nitrógeno
  • Fuente de fósforo
  • Fuente de azufre
  • Fuente de calcio, magnesio y potasio
  • Fuente de sodio
  • Fuente de Fe
  • b) Microelementos o trazas: Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni,
  • Au, Ag, Cd, Cr, Pb
  • c) Factores de crecimiento
  • 2. Agua
  • 3. Agentes solidificantes:agar, gelatina, agarosa, silicagel, albúmina
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Factores de crecimiento

  • A ---- B ---- C ----HistidinaNO es factor de crecimiento
  • A ---- B --X-- ….. ---- Histidina ?ES factor de crecimiento
  • Ejemplos: *vitaminas, como las del complejo B
        • *algunos aminoácidos
        • *purinas y pirimidinas
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Medios de cultivo

  • Por su origen:
  • Sintéticos o químicamente definidos:
  • *se conoce la fórmula exacta
  • Naturales o complejos:
      • *no se conoce su composición con exactitud
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-Naturales o complejos, las fórmulas de lab incluyen:

1. PEPTONAS

Productos de la hidrólisis de proteínas:

Peptona:

mezcla de aa y péptidos.

Proteína de origen vegetal o animal

Hidrólisis ácida o enzimática

Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS

-Fuente de nitrógeno

-Fuente de carbono y energía, cuando no hay azúcares en el medio de cultivo

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2. EXTRACTOS

  • de carne: concentrado de componentes hidrosolubles de la carne.
  • de levadura: producto de lisis ácida o enzimática de levaduras
  • de malta:producto de cebada malteada, reemplaza al extracto de levadura
  • Sólo para QUIMIOORGANOTROFOS
  • -aportan factores de crecimiento, especialmente vitaminas.

Factores de crecimiento

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Agar nutritivo

(para bacterias quimioorganotrofas)

Peptona de carne ………….. 0.5 g

Extracto de carne ………….. 0.3 g

NaCl ………………………… 0.5 g

Agar ……………………… 1.5 – 2 g

Agua destilada ……………. 100 ml

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Medio de cultivo para fototrofos

Sintético o químicamente definido (fórmula exacta)

CO2 ………………… burbujeo continuo

KNO3 ……………. 1 g/l

MgSO4 …………… 0.5 g/l

KH2PO4 …………… 0.035 g/l

Trazas …………….. 10-4 - 10 -5 g/l

(NaVO3, NiSO4, ZnCl2, H3BO3,….., etc)

H2O ………………………… 1000 ml

solidificante ?? SILICAGEL

Exponer a la luz solar o artificial.

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Para QUIMIOOGANOTROFOS

Medio de cultivo AMedio de cultivo B

(sintético o quimícamente (complejo o natural)

definido)

K2HPO4 ............ 7 g

KH2PO4 ……… 2 g Extracto de carne ….. 3 g

(NH4)2SO4…… 1 g Peptona ……………. 5 g

MgSO4 ……… 0.1 g NaCl ………………… 5 g

CaCl2 ……….. 0.02 g Agua dest. ……. 1000 ml

Glucosa ……. 4-10 g

Trazas: pH 7

Fe, Co, Mn, Zn,

Cu, Ni, Mo) …….... 2-10 µg c/u

Agua destilada …….. 1000 ml

pH 7

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CONDICIONES FÍSICAS

            • Temperatura
            • pH
            • Humedad
            • Luz
            • Requerimientos de O2
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Requerimientos de O2

  • Aerobios estrictos
  • Anaerobios obligados
  • Anaerobios facultativos
  • Microaerófilos
  • Anaerobios aerotolerantes
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CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

-por origen: - sintético o químicamente definido

fórmula química exactamente conocida

- natural o complejo

composición química no se conoce con exactitud

-por consistencia: - líquido (sin agar)

-sólido (con agar: al 0.3% semisólido

al 1.5 – 2% sólido)

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-por su composición:

- comunes: AGAR NUTRITIVO

-peptona de carne

-extracto de carne

-NaCl

-agar 2%

-agua destilada

- enriquecidos:

AGAR SANGRE

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Por su función:

-de transporte: - medio de Stuart

- medio de Cary Blair

Contiene buffer + sustancias criopreservantes (glicerol)

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Por su función:

- de enriquecimiento (líq.) - selectivos (sólidos)

Caldo Mac Conkey

(inhibidor + lactosa + púrpura de bromocresol

Agar Mac Conkey

(inhibidor + lactosa + rojo neutro)

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Por su función:

-diferencial

Fermentación de.

-glucosa ?

-sacarosa ?

-lactosa ?

Producción de H2S ?

El medio incluye los 3 azúcares, sal de Fe2+

y un indicador de pH (rojo neutro)

Enterobacter

Shigella

Pseudomonas

Proteus

Agar triple azúcar hierro (TSI)

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