Utilizaci n de anticuerpos en biomedicina
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UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA PowerPoint PPT Presentation


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UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

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Presentation Transcript


Utilizaci n de anticuerpos en biomedicina

UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

  • Métodos y Técnicas de Estudio en Biología Celular

UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA


Utilizaci n de anticuerpos en biomedicina1

UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

  • Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot

  • Inmunocitoquímica

  • Inmunofluorescencia

  • Inmunoprecipitación

  • ELISA/EIA/RIA

  • Cromatografía de inmunoafinidad

  • Microscopia electrónica (morfología)


Estructura de los anticuerpos

Estructura de los anticuerpos


Tipos de anticuerpos

Tipos de Anticuerpos


Selecci n clonal delecci n

Selección clonal: Delección


Selecci n clonal expansi n

Selección clonal: expansión


Conceptos

Conceptos

Conceptos

  • Inmunógeno, antígeno.

  • Carrier: BSA, KLH.

  • Unión covalente (cross-linking): MBS, glutaraldehido, DSS.

  • Péptidos inmunogénicos

  • Proteínas nativas y desnaruralizadas.

  • Otras moléculas

  • Adjuvante de Freund: completo e incompleto.

  • Primera inmunización y recuerdos.


Anticuerpos policlonales

Anticuerpos policlonales

  • Inmunización del conejo

  • Recuerdos

  • Extracción de sangre

  • Preparación del suero

  • Purificación del anticuerpo (métodos opcionales)

  • Caracterización del antisuero


Anticuerpos policlonales1

Anticuerpos policlonales


Anticuerpos monoclonales

Anticuerpos monoclonales

  • Inmunización del ratón

  • Extracción del bazo

  • Preparación de hibridomas (mieloma+B)

  • Selección de los clones

  • Producción y uso de anticuerpos


Elecci n del tipo de anticuerpo

Elección del tipo de anticuerpo


Marcaje de anticuerpos

Marcaje de Anticuerpos


Marcaje de anticuerpos para uso en c lulas

Marcaje de Anticuerpos para uso en Células


Utilizaci n de anticuerpos en biomedicina

Immunoblotting (western blot)

Immunoblotting (western blot)


Inmunocitoqu mica

Inmunocitoquímica

Las flechas indican la presencia de neuronas con hormona liberadora de la hormona del crecimiento en el Núcleo Arcuato (cerebro) de rata de 4 meses.


Inmunocitoqu mica1

Inmunocitoquímica

Localización de la “calbinding” (calbindina) en cerebelo de rata


Microscopia confocal e inmunofluorescencia

Microscopia (confocal e inmunofluorescencia)


Inmunoprecipitaci n

Inmunoprecipitación


Inmunoprecipitaci n1

Inmunoprecipitación


Elisa

ELISA


Elisa1

ELISA


Utilizaci n de anticuerpos en biomedicina

Cromatografía de inmunoafinidad


Oro coloidal

Oro Coloidal

Internalización de transferrina marcada con oro coloidal (6,6 nm) en células endoteliales. La barra corresponde a 0,25 mM.


Oro coloidal1

Oro Coloidal

Internalización de transferrina marcada con oro coloidal (6,6 nm). G: aparato de Golgi; Lu: lumen vascularLa barra corresponde a 0,25 mM.


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