Anesztézia és eutanázia az állatkísérletekben

1. Anesztézia és eutanázia az állatkísérletekben Dr. Szombath Dezső SE ÁOK Kórélettani Intézet http://Xenia.sote.hu/~szomdezs

2. AZ ÁLLATKÍSÉRLET VÉGZÉSÉNEK ALAPVETŐ FELTÉTELEIAz állatkísérlet általános szabályai(1998. évi XXVIII. törvény) 28. § (1) Az állatkísérletet általános vagy helyi érzés-telenítéssel, fájdalomcsillapítással, avagy más, az idegi megrázkódtatást, fájdalmat, szenvedést vagy az állat károsodását kizáró módszerrel kell végezni, kivéve, ha ezek alkalmazása a kísérleti állat számára nagyobb megterheléssel járna, mint mellőzésük, illetőleg az a kísérlet eredményét értékelhetetlenné tenné.

3. Cold-restraint fekély patkányban

4. Beavatkozás az állaton(1998. XXVIII. évi törvény 9. § (2) Beavatkozás érzéstelenítés nélkül csak akkor végezhető, ha az érzéstelenítés, illetőleg az ehhez szükséges rögzítés legalább akkora fájdalommal járna mint a beavatkozás. A gazdasági…..

5. A fájdalomcsillapítás és az eutanázia az állatkísérletes munka szerves része • A fájdalommentesítés, de annak hiánya is befolyásolja a viszgálati eredményeket Kállai: Laborállat könyv

6. Terminológia Anesztézia (érzéstelenítés) • Általános érzéstelenítés (narkózis; general anaesthesia) • Helyi érzéstelenítés (lokálanesztézia) Analgesia (fájdalomcsillapítás) • Kábító fájdalomcsillapítók (opioidok: morfin) • Nem-szteroid gyulladásgátlók • „adjuváns” fájdalomcsillapítás (antidepresszánsok: hatásfokozás)

7. A narkózis (általános érzéstelenítés)gyakorlati alapja • A narkotikum a szervezetben közel egyenletesen oszlik meg, azaz koncentrációja a szervekben közel azonos • A neuronok és idegpályák narkotikum iránti érzékenysége különböző (analgesia és izomrelxáció működő vasomotor központ mellett)

8. Az általános érzéstelenítés jellemzői • Analgesia • Amnesia • Öntudatlanság (emberben) • Szenzoros ás vegetatív reflexek hiánya • Vázizom relaxáció

9. Az anesztézia kivitelezése • Előkészítés • Anesztéziás állapot kiváltása • Inhalációs anesztézia • Injekciós anesztézia (iv.; ip.; transzkután) • Utógondozás

10. Narkózis (anesztézia) előkészítés célja • Az állatokra ható stressz – szituáció hatásainak mérséklése (előző állatok szaga, zaj, stb.) • Kevesebb anesztetikum használata • Mellékhatások kivédése

11. Narkózis (anesztézia) előkészítéseElőkezelés patkányon Atropin 0,05 mg/kg sc. sekréció/bradycard Diazepam 2,5 mg/kg ip. amnézia/szedatív Acepromazin 2,5 mg/kg ip. hányás/neurolept. Fentanyl/fluanison 0,4 ml/kg ip. fájdalom Xylazin 10 mg/kg sc. szedáció

12. Az anesztézia időtartama • Rövid (ultrarövid) • Középhosszú • Hosszú

13. Minimális alveoláris koncentráció (% v/v), MAC(az egyedek 50 %-a areflexiás fájdalomra) Éter Halotán Izoflurán N-oxidul Ember 1,92 0,75 1,15 105 Majom 1,15 1,28 200 Egér 3,20 0,95 1,41 275 Patkány 3,20 1,10 1,38 150 Macska 2,10 0,82 1,63 255 Kutya 3,04 0,87 2,20 188 Sertés 1,45 Juh 1,58

14. Inhalációs anesztézia patkányban Éter induló: 15-20 %, fenntartó: 5 % Halotán induló: 4-5 %, fenntartó: 1-2 % Izoflurán induló: 4 %, fenntartó: 1,5-3 %

15. Éteres altatás patkányban

16. Rövid hatású anesztézia patkányban Propofol 10 mg/kg iv. Tiopenton 30 mg/kg iv. Methohexiton 710 mg/kg iv.

17. Közép hatású anesztézia patkányban Ketamin/ 90 mg/kg ip. Xylazin 10 mg/kg ip. Pentobarbiton 40-55 mg/kg ip.

18. Hosszú hatású anesztézia patkányban • Chloralóz 130 mg/kg ip.

19. Narkózis I. Stádidum (bódulat szaka, stadium analgesiae) • Narkózis kezdetétől az öntudat (emberben) elvesztéséig tart • Csökkent fájdalomérzés • Amnesia • Fényre reagáló normális tágasságú pupillák • Kisebb sebészeti beavatkozások végezhetők

20. Narkózis II. Stádium (izgalmi szak, stadium excitationis) • Az öntudat (emberben) elvesztésétől a szemhélyzárási reflex eltűnéséig tart • Kérgi gátlás megszűnte: heves mozgási reakciók, hányás csuklás, szapora pulzus és légzés • Fényre reagáló tág pupillák, garatreflex megtartott • Célszerű a reakciókat csökkenteni premedikációval, ill. gyorsan túlvezetni a stádiumon a narkózist • Narkománok, alkoholisták, izmos egyének erőteljes reakciója

21. Narkózis III. Stádium (sebészi narkózis szaka, stadium tolerantiae) • A szabályos légzés megjelenésétől a légzés leállásáig tart • Kéreg alatti motoros magok kikapcsolnak • Csökkenő izomtónus, gerincagyi reflexek kialszanak • A III. stádium 4 fázisra osztható • A sebészi beavatkozásra a III/2. fázis a legalkalmasabb; jellemzője a cornea reflex eltűnése

22. Narkózis IV. Stádium (túlaltatás, stadium asphyxia; vagy hűdéses szak, stadium paralyticum) • Süllyedő vérnyomás, szapora pulzus • Tág, fényre nem reagáló pupillák (adrenalin túlsúly) • Légzésbénulás, majd bradycardián keresztül szívmegállás • Azonnali beavatkozással az állapot visszafordítható (altatószer felfüggesztés)

23. A narkózis fontosabb jelenségeiKállai: Laborállat könyv

24. Az anesztézia mélységének ellenőrzése a kísérleti állaton • Megfordulási reflex • Lábreflex • Szemhélyreflex • Nyelési reflex • Farokcsípési reflex • Fülcsípési reflex

25. Anesztézia (műtét) utáni gondozás • Az állat hőmérsékletnek kontrolálása (fűtőlap, automata infralámpa) • Egyedi elhelyezés; faforgács mentes körülmények • Folyadékpótlás (vérveszteség + lázas állapot + fokozott perspirációs veszteség) • Postoperatív fájdalomcsillapítás (kb. 72 órán át; ópiátok, helyi érzéstelenítők, esetleg aspirin)

26. Testhőmérséklet kontrol

27. Helyi érzéstelenítés (lokálanesztézia) formái • Infiltrációs (pl. appendectomia) • Felületi (nyálkahártyákon) • Vezetéses (fogászati alkalmazások) • Subcutan regionalis • Intravénás regionális (leszorított végtagon) • Spinalis (liquor helyett, azzal azonos fajsúlyú oldat) • Periduralis (szülészet-nőgyógyászat, urológia) • Periduralis és spinalis opioid analgesia (kombinált)

28. A helyi érzéstelenítés szerei • Prokain (Novocain), vezetéses érzéstelenítés • Lidokain (0,5-2,0-os oldatban) általános szer • Bupivakain • Prilokain • Szabály, hogy az állatot szedálni kell

29. A fájdalom és kellemetlen érzet jelei I. A fajtól függően ezek a következők lehetnek: • Kellemetlen érzet hangadásai (nem mindig észlelhető a humán hangtartományban) • Küszködés/erőlködés • Menekülési kísérlet • Defenzív vagy saját maga ellen irányuló agresszió • Megdermedés/mozdulatlanság • Zihálás/lihegés

30. A fájdalom és kellemetlen érzet jelei II. • Fokozott nyálelválasztás • Vizelet- és bélsárürítés és az analis mirigyek ürítése • Pupillatágulat • Tachycardia (szapora szívverés) • Izzadás • A vázizmok reflexes kontrakciója, amely izomrángásokat, remegést, vagy egyéb izomgörcsöt okoz

31. A fájdalom kezelésének különböző lehetőségei(Fürst: Farmakológiai)

32. A fájdalomcsillapítás elvi lehetőségei • Gyógyszerek • Ópiátok • NSAIDs • Adjuvánsok (antidepresszánsok, görcsgátlók, szteroidok) • TENS (transcutan elektromos idegingerlés) • Regionális idegblokád • Idegsebészeti eljárás (thalamotomia) • Pszichoterápia (emberben)

33. Rágcsálók reakciója fájdalmat kiváltó ingerek hatására INGER REAKCIÓ Mechanikai inger (nyomás) a farok elhúzása (E, P) Sugárzó hő (fényforrásból, a farok elhúzása, a hátbőr fókuszálva) rángása (E, P, Tm) Kontakt hőinger (56, vagy a talp megnyalása 65 oC-os lemez) Elektromos inger (farok) a gerinc hátrafeszítése, ill. visítás (Tm, E) E=egér, stb.Kállai: Laborállat könyv

34. Az állat életének kioltása(1998. évi XXVIII. törvény) 11. § Az állat életét elfogadható ok vagy körülmény nélkül kioltani nem szabad. Elfogadható oknak, körülménynek minősül különösen az élelmezési cél, a prém termelése, …, a tudományos kutatás 12.§ (1) Az állat életének kioltása – a (2) bekezdésben foglaltak kivételével – kizárólag kábítás után történhet. (2) A kábítás kötelezettség nem vonatkozik a gerinctelen állatokra, …

35. AZ ÁLLATKÍSÉRLET VÉGZÉSÉNEK ALAPVETŐ FELTÉTELEIAz állatkísérlet általános szabályai(1998. évi XXVIII. törvény) 29. § (2) Az állatkísérlet befejezésével a véglegesen vagy súlyosan károsodott állat életét kíméletesen ki kell oltani.

36. Az eutanázia célja Olyan halál az állatok számára, amely • Fájdalommentes, gyors eszméletvesztéssel és • Minimális rögzítéssel (stresszel) jár, • Visszafordíthatatlan, • Elfogadható látványú a végrehajtó részére.

37. Az euthanasia kivitelezésének helyszíne Alapszabály: • A többi állattól elszigetelten kell végezni, ill. • Ha a kísérlet altatott állaton zajlik, a kísérlet helyszínén altatószer túladagolással.

38. Az eutanázia körülményei megválasztásának fontossága

39. A halál felismerése • Szívverés és légzés megszűnése • Reflexek hiánya • Testhőmérséklet 25oC alá süllyedése (kistestűrágcsálók)

40. Az eutanázia elfogadott módszerei I. Fizikai módszerek • Lelövés (nagy hüllők, emlősök) • Rázkódás/ütés (nyulak, macskák, kétéltűek, halak, stb.) • Elektromos kábítás (halak, kétéltűek, sertés, kecske, stb.) • Nyaki dislocatio (szárnyasok, fiatal rágcsálók, stb.) • Lefejezés (rágcsálók, madarak, halak, kisebb nyulak, stb.) • Maceratio (naposcsibék) • Mikrohullámú besugárzás (neurobiológiai gyakorlatban; az agy kiválasztott területére fókuszált sugárzással)

41. Az eutanázia elfogadott módszerei II. Kémiai módszerek • Széndioxid (60 tf. % konc. felett), szénmomoxid (6 tf. % felett); kevés CO2 +O2 keveréssel • Illékony narcotikumok (halotán, enfluran, isofluran) • Barbiturátok (Na-pentobarbitál, dózisa: 18 %-os {200 mg/ml} koncentrációban 200 mg/kg) • T-61 (tetracain chloratum + kurariform hatású keverék) i.v. • Uretán (béka) • Ketamin/xylazin kombináció

42. Eszméletlen rágcsálók esetében elfogadott módszerek • Gyors fagyasztás (folyékony hidrogén, csupasz állatoknál) • Kivéreztetés • Légembólia • Kálium-klorid • Etanol (70%-os oldat i.p.)

43. Rágcsálók eutanáziájára nem elfogadott módszerek • Hypothermia (fagyasztó készülék) • Nitrogén (hosszú fulladásos halál) • Kéjgáz (lassú fulladásos halál) • Ciklopropán (állatbarát, de nem humánus, az alkalmazóra veszélyes!) • Éter és kloroform (nyálkahártya irritáció miatt erőteljes stressz + környezetre veszélyesek)

44. Rágcsálók eutanáziájára tiltott módszerek • Vákuum, egyáltalán: fulladásos halál (pl. vízbefojtás) • Triklór-etilén (főleg fájdalomcsillapító; karcinogén) • Hidrogén-cianid (heves görcsök + veszélyes az alkalmazóra) • Sztrichnin, nicotin, klorálhidrát • Magnézium-szulfát (izombénulás eszméleten lévő állapotban) • Kurare származékok és egyéb neuromuscularis bénítók

45. Irodalom • Recommendations for euthanasia of experimental animals. Laboratory Animals (1996) 30, 293-316 and (1997) 31, 1-32. • Farmakológia Szerk.: Fürst Zsuzsanna, Medicina 2001. • Laborállat könyv Kállai, Kallé-K Kft. 2003.