No caso da espécie humana, para quê?

2. No caso da espécie humana, para quê?

4. Clonagem terapêutica Pluripotentes Em 2005 o brasileiro José Luiz Vali, 41 anos, foi submetido a um tratamento pioneiro que lhe rendeu excelente recuperação de tecido cardíaco lesado por um infarto.

5. Células-tronco totipotentes Depois da fertilização, a célula-ovo começa a se dividir. Até o estágio de oito células, cada uma delas é chamada de célula-tronco totipotente. Qualquer uma dessas células, se for inserida em um útero, tem potencial de formar um ser completo. Massa celular externa Blastocisto de 5 ~ 6 dias Massa celular interna Células-tronco pluripotentes Com a continuidade da embriogênese, forma-se o blastocisto. As células externas já estão programadas para formar a placenta e os anexos, enquanto a massa interna vai formar os diferentes tecidos do corpo. As células que formam a massa interna, são chamadas células-tronco pluripotentes. Assim, não conseguem formar um ser completo.

6. Clonagem Molecular de DNA • O sistema de clonagem molecular se dá a partir da estruturação de um DNA recombinante, que se replica quando é colocado em uma célula bacteriana. • Para a técnica da clonagem molecular é de fundamental importância a utilização das enzimas de restrição, também chamadas de “tesouras” moleculares.

7. Clonagem Molecular de DNA • O sistema de clonagem molecular se dá a partir da estruturação de um DNA recombinante, que se replica quando é colocado em uma célula bacteriana. • Para a técnica da clonagem molecular é de fundamental importância a utilização das enzimas de restrição, também chamadas de “tesouras” moleculares. Enzima de restrição Enzima de restrição Extremidades livres

8. Clonagem Molecular de DNA

9. Clonagem Molecular de DNA • O sistema de clonagem molecular se dá a partir da estruturação de um DNA recombinante, que se replica quando é colocado em uma célula bacteriana. • Para a técnica da clonagem molecular é de fundamental importância a utilização das enzimas de restrição, também chamadas de “tesouras” moleculares. • Os pontos de clivagem (ou sítios de restrição) variam de acordo com a enzima utilizada.

10. Clonagem Molecular de DNA • O sistema de clonagem molecular se dá a partir da estruturação de um DNA recombinante, que se replica quando é colocado em uma célula bacteriana. • Para a técnica da clonagem molecular é de fundamental importância a utilização das enzimas de restrição, também chamadas de “tesouras” moleculares. • Os pontos de clivagem (ou sítios de restrição) variam de acordo com a enzima utilizada.

11. Clonagem Molecular de DNA • O sistema de clonagem molecular se dá a partir da estruturação de um DNA recombinante, que se replica quando é colocado em uma célula bacteriana. • Para a técnica da clonagem molecular é de fundamental importância a utilização das enzimas de restrição, também chamadas de “tesouras” moleculares. Ficou claro o mecanismo de ação das Enzimas de Restrição? http://www.youtube.com/watch?v=-sI5vy-cD2g&mode=related&search=

12. Clonagem Molecular de DNA • Uma vez produzidos os fragmentos de restrição, pode-se realizar a clonagem molecular.

13. Clonagem Molecular de DNA

14. Clonagem Molecular de DNA Células eucarióticas doadoras Célula bacteriana ruptura e isolamento dos plasmídeos extração do DNA nuclear tratamento com enzima de restrição DNA ligase conecta DNA doado ao plasmídio gene da célula doadora DNA recombinante Acrescenta à cultura de células bacterianas As bactérias incorporam o plasmídio recombinante que será replicado à medida que as células se duplicarem.

15. Clonagem Molecular de DNA http://www.youtube.com/watch?v=MMAYhXH1PBw

16. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. Por enzimas de restrição

17. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. eletrodo positivo eletrodo negativo Fragmento (ou banda) de DNA maior Fragmento (ou banda) de DNA menor DNA fragmentado por enzimas de restrição tempo decorrido gel

18. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. Amostras de DNA + enzimas de restrição gel “Pocinho” Cada amostra é colocada num pocinho e se desloca no gel sob ação da corrente elétrica. Resultado http://www.youtube.com/watch?v=CpnPLk5b2fU

19. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa.

20. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa.

21. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. • Aplicação: teste de paternidade, perícia criminal, diagnósticos de doenças, etc.

22. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. • Aplicação: teste de paternidade, perícia criminal, diagnósticos de doenças, etc.

23. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. • Aplicação: teste de paternidade, perícia criminal, diagnósticos de doenças, etc. Exemplo de aplicação de eletroforese na identificação de um criminoso

24. Técnica de Eletroforese em gel • Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. • Aplicação: teste de paternidade, perícia criminal, diagnósticos de doenças, etc. Exemplo de aplicação de eletroforese na identificação de um criminoso

25. GENE

26. Amostra Homozigoto Padrão em pares de bases (pb) Pólo (-) 200 170 140 Fragmento de Restrição com 125 pb GENE 110 80 50 20 Pólo (+) Gel de Eletroforese

27. Amostra Homozigoto Amostra Heterozigoto Padrão em pares de bases (pb) Pólo (-) 200 170 Fragmento de Restrição com 180 pb 140 GENE 110 80 50 20 Pólo (+) Gel de Eletroforese

28. Amostra Homozigoto Afetado Amostra Homozigoto Padrão em pares de bases (pb) Pólo (-) 200 170 Fragmento de Restrição com 180 pb 140 GENE 110 80 50 20 Pólo (+) Gel de Eletroforese