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Génie génétique

Génie génétique. Ensemble de techniques visant à isoler, purifier et amplifier un gène en vue d’étudier sa structure, sa fonction , sa régulation d’applications industrielles, médicales, agronomiques …. S. Pontégnie-Istace. Coll.ADN, Biologie Term D, Hachette Lycées 1989. Les outils.

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Presentation Transcript

  1. Génie génétique Ensemble de techniques visant à isoler, purifier et amplifier un gène en vue d’étudier sa structure, sa fonction , sa régulation d’applications industrielles, médicales, agronomiques …. S. Pontégnie-Istace

  2. Coll.ADN, Biologie Term D, Hachette Lycées 1989

  3. Les outils • Cellules • Bactéries • Virus • Levures • Molécules • Plasmides • Enzymes:ADN polymérase,ADN ligase, Endonucléase • Oligonucléotides de synthèse • Yac

  4. BactériesPlasmides Padirac p31 Athéna n°45 p6

  5. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  6. Conjugaison • Campbell, Biologie DeBoeck Université 1995 p359

  7. Conjugaison Demounem et al, Sciences de la Vie et de la Terre Term S Nathan 1994 p56

  8. Virus • Parasite intracellulaire • Un seul type d’acide nucléique: • ADN • ARN • Campbell, Biologie DeBoeck Université 1995 p344

  9. Cycle viral • Campbell, Biologie DeBoeck Université 1995 p348

  10. Transcriptase inverse Chute du dogme : • ADN ARN En effet : • ARN ADNc Athéna n°45 p9

  11. Endonucléase de restriction et ADN ligase Cooper G.M., La cellule, DeBoeck Univ 1999 p106

  12. Clonage • Isolement • Insertion dans un vecteur • Transformation ou transfection • Amplification • Sélection Campbell, Biologie DeBoeck Université 1995 p395

  13. Clonage • Isolement • Insertion dans un vecteur • Transformation ou transfection • Amplification • Sélection Coll.ADN, Biologie Term D, Hachette Lycées 1989 p99

  14. Clonage • Isolement • Insertion dans un vecteur • Transformation ou transfection • Amplification • Sélection

  15. sélection Cooper G.M., La cellule, DeBoeck Univ 1999 p108

  16. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  17. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  18. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  19. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  20. Campbell, Biologie • DeBoeck Université 1995p392

  21. Coll.ADN, Biologie Term D, Hachette Lycées 1989 p101 Hormone de croissance

  22. Agrobacterium tumefaciensManipulaton génétique naturelle Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 P415

  23. Agrobacterium tumefaciens • Manipulation du plasmide Ti • Supression de l’ADN-T • Intégration d’un gène d’intérêt et d’un marqueur • Infection de protoplastes (cellule sans paroi) • Régénération de plantules Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 P415

  24. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  25. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  26. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  27. PCRPolymerase chain reaction Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 p390

  28. Séquençage Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 p387

  29. Electrophorèse Campbell, Biologie, DeBoeck 1995 p396

  30. Electrophorèse Campbell, Biologie, DeBoeck 1995 p396

  31. Empreinte génétique Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 p441

  32. Cartographie Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 p438

  33. Cartographie Griffiths et all, Introduction à l’analyse génétique,De Boeck2002 p438

  34. Puces à ADN • Supports solides sur lesquels sont disposés de manière ordonnée des milliers de molécules d’ADN correspondant aux gènes que l’on souhaite analyser • Trois catégories d’analyse: • Analyse de mutation (tétrades) • Détection de gènes de maladie (myopathie, mucoviscidose, cancer...) • Analyse de l’expression des gènes en ARNm • Observation des effets génétiques induits par certains médicaments • Profil d’expression génique caractéristique de certains cancers • Séquençage par hybridation • Applications: • Détection de germes pathogènes en milieu hospitalier ou agroalimentaire ou dans l’eau… • Détection d’OGM • Prix: 100 à 850 dollars (usage unique)

  35. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  36. Delcour J., Du gène à la protéine, CD-ROM recyclage février 2004 LLN

  37. Conclusion • A l’ère du séquençage va succéder l’ère de la génomique fonctionnelle • Vise à comprendre le fonctionnement d’une cellule, d’un tissu, d’un organisme dans sa globalité en fonction de son environnement grâce à : • Génomique : science qui étudie les gènes mais à un génome correspond plusieurs transcriptomes et protéonomes • Transcriptomique : science qui étudie les transcripts • Protéomique : science qui étudie les protéines • Tâche gigantesque: • Si on considère 200 types de cellules chez l’homme placés dans 5 états physiologiques différents, il y a 1000 protéomes à étudier sans tenir compte qu’un gène peut coder jusqu’à une vingtaine de formes d’une même protéine

  38. Génie génétique Demounem et al, Biologie Term D, Nathan1989 p66

  39. Génie génétique Biologie Term D Nathan1989 p66

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