1 / 57

Teste de Sensibilidade em Bactérias Gram-Negativas

Teste de Sensibilidade em Bactérias Gram-Negativas. Dra. Eliete Aguiar de Miranda Frigatto Laboratório Central - Hospital São Paulo UNIFESP - EPM. sair. BETA-LACTÂMICOS. sair. Anel -lactâmico. GRUPOS :.  Penicilina.  Cefalosporinas.  Monobactâmicos: aztreonam. O.

hoshi
Download Presentation

Teste de Sensibilidade em Bactérias Gram-Negativas

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Teste de Sensibilidade em Bactérias Gram-Negativas Dra. Eliete Aguiar de Miranda Frigatto Laboratório Central - Hospital São Paulo UNIFESP - EPM

  2. sair

  3. BETA-LACTÂMICOS sair Anel -lactâmico GRUPOS: Penicilina  Cefalosporinas  Monobactâmicos: aztreonam O  Carbapenêmicos: imipenem, meropenem, ertapenem Sítio de ação da -lactamase

  4. CEFALOSPORINAS sair 3a. Geração 1a. Geração Cefazolina (ancef, kefzol) Cefalotina Cefoperazon(cefobid) Cefotaxima (claforan) Ceftazidima (fortaz, tazicef) Ceftizoxima (cefizox) Ceftriaxona (rocephin) 2a. Geração Cefamandol (mandol) Cefonicid (monocid) Cefotetan (cefotan) Cefoxitina (mefoxin) Cefuroxima (zinacef) 4a. Geração Cefepima (maxipim)

  5. sair • MONOBACTÂMICOS: • AZTREONAM (+ Cilastatina sódica) : Azactam • Sinergismo: Aminoglicosídeos, clindamicina, metronidazol. • CARBAPENÊMICOS: • IMIPENEM (+ Cilastatina sódica) Primaxin (i.v) • Tienam • MEROPENEM: Meronem • - Atividade comparável com clindamicina e metronidazol • ERTAPENEM:

  6. sair • AMINOGLICOSÍDEOS: • Gentamicina, Amicacina, Tobramicina, Netilmicina, Kanamicina • e Estreptomicina. • TETRACICLINAS: • Tetraciclina, Doxaciclina e Minociclina. • FLUOQUINOLONAS: • Ciprofloxacina, Levofloxacina, Gatifloxacina, • Lomefloxacina, Norfloxacina, Ofloxacina, • Ácido Nalidíxico.

  7. sair • NITROFURANTOÍNAS: • Nitrofurantoína. CLORANFENICOL: • Cloranfenicol. SULFAS: • Sulfonamidas, Sulfametoxazol/Trimetoprim

  8. Penicilinas/Inibidores de Beta-lactamases sair Unasyn Zosyn Timentin Ampicilina/Sulbactam Ticarcilina/Ác. clavulânico Piperacilina/Tazobactam

  9. RESISTÊNCIA BACTERIANA AOS ANTIMICROBIANOS sair Metronidazol Aeróbios Natural ou intrínseca Anaeróbios aminoglicosídeos Adquirida Cromossômica Mutação de genes Resistência é transmitida da célula-mãe para célula-filha Produção: ß-lactamases, fosfotransferases, hidrolases, redutases. Plasmidial Quinolonas Transmissível Resistência múltipla

  10. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • Enterobacteriaceae Penicilina G, glicopeptídeos, macrolídeos, clindamicina, linezolida, estreptograminas e mupirocin. • Enterobacterspp., Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina + ác C. freundii clavulânico, 1ª geração de cefalosporinas, cefoxitina, cefotetan e cefuroxima. • Klebsiella spp ., Ampicilina, amoxacilina, carbenicilina e Citrobacter diversus ticarcilina Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  11. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • M. morganiiAmpicilina, amoxacilina, amoxacilina + ác clavulânico, 1ª geração de cefalosporinas, cefuroxima, polimixina, colistinae nitrofurantoína. • Providencia spp  Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina + ác clavulânico, 1ª geração de cefalosporinas, netilmicina, tobramicina, nitrofurantoína, cefuroxima, gentamicina, polimixina e colistina. Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  12. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • Proteus mirabilisColistina, polimixina, nitrofurantoína etetraciclina. • Proteus vulgarisAmpicilina, amoxacilina, cefuroxima, colistina, polimixina e nitrofurantoína, 1ª geração de cefalosporinas e tetraciclinas. Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  13. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • Serratia marcescensAmpicilina, amoxacilina, amoxacilina + clavulânico, 1ª geração de cefalosporinas, cefuroxima, colistina polimixina, cefoxitina e nitrofurantoína. • Serratiaspp Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina + ác.clavulânico, cefuroxima, colistina, 1ª geração de cefalosporinas e polimixinas. Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  14. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • A. baumanniiAmpicilina, amoxacilina, 1ª geração de cefalosporinas. • P. aeruginosaAmpicilina, amoxacilina, amoxacilina + ác clavulânico, 1ª e 2ª gerações de cefalosporinas cefotaxima, ácido nalidíxico, ácido pipemídico, tetraciclina, kanamicina, cloranfenicol e sulfametoxazol/trimetoprim. Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  15. RESISTÊNCIA NATURAL sair • ORGANISMOS RESISTÊNCIAS • S. malthophilia Todos os -lactâmicos (exceto ticarcilina com ác. Clavulânico), aminoglicosídeos e carbapenens. • B. cepacia Ampicilina, amoxacilina, 1ª e 2ª geração cefalosporinas, colistina, polimixina, aminoglicosídeos, quinolonas. Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.

  16. RESISTÊNCIA NATURAL sair • “RESISTÊNCIA INTRÍNSECA” • CEFOXITINA • Enterobacteriaceae • Serratia marcescens • Citrobacter freundii • Enterobacter cloacae • Enterobacter aerogenes • “RESISTÊNCIA INTRÍNSECA” • CEFALOTINA • Enterobacteriaceae • Citrobacter freundii • Enterobacter spp. • Providência spp. • M. morganii • P. penneri • Serratia spp. • Yersinia enterocolítica • “RESISTÊNCIA INTRÍNSECA” • Amoxacilina / Á.clavulânico • Enterobacteriaceae • Citrobacter freundii • Enterobacter spp. • Providência spp. • Serratia spp. • M. morganii

  17. RESISTÊNCIA BACTERIANA AOS ANTIMICROBIANOS sair Aeróbios Metronidazol Natural ou intrínseca Anaeróbios aminoglicosídeos Adquirida Cromossômica Mutação de genes Resistência é transmitida da célula-mãe para célula-filha Produção: ß-lactamases, fosfotransferases, hidrolases, redutases. Plasmidial Quinolonas Transmissível Resistência múltipla

  18. Genética da Resistência Bacteriana sair Opal et al. In Mandell, 2000

  19. sair

  20. sair

  21. sair

  22. Resistência Bacteriana a Antimicrobianos sair

  23. Gram Negativos - Resistência sair Porina Mecanismo normal: B-lactâmico memb. externa peptideoglicano PBP espaço periplásmico membrana citoplasmática Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996

  24. sair

  25. Mecanismos de Resistência a Antimicrobianos sair • Alteração do sítio de ação • Beta-lactâmicos • Glicopeptídeos • Quinolonas • Macrolídeos, aminoglicosídeos (alto grau) • Degradação da droga • Beta-lactâmicos • Aminoglicosídeos, cloranfenicol • Diminuição da concentração intra-celular do antimicrobiano • Resistência a beta-lactâmicos de amplo espectro em Gram-negativos Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002

  26. Mecanismos de Resistência a Antimicrobianos sair • Alteração do sítio de ação • Alto grau de resistência - altos MICs • Resistência cruzada a outras drogas da mesma classe • Degradação da droga • Diminuição da concentração intra-celular do antimicrobiano Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002

  27. Gram Negativos - Resistência sair Porina Alteração do Alvo: B-lactâmico memb. externa peptideoglicano PBP espaço periplásmico membrana citoplasmática Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996

  28. Mecanismos de Resistência a Antimicrobianos sair • Alteração do sítio de ação • Degradação da droga • A bactéria produz enzimas que degradam o antimicrobiano • Níveis variados de resistência: depende da quantidade e potência da enzima produzida • Maior variação do perfil de sensibilidade a drogas de uma mesma classe: Sensibilidade a um -lactâmico e resistência a outro . • Diminuição da concentração intra-celular do antimicrobiano Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002

  29. Gram Negativos - Resistência sair Porina Produção de enzimas inativadoras: B-lactâmico memb. externa peptideoglicano PBP espaço periplásmico membrana citoplasmática B-lactamase Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996

  30. sair

  31. Mecanismos de Resistência a Antimicrobianos sair • Degradação da droga • Alteração do sítio de ação • Diminuição da concentração intra-celular do antimicrobiano • Diminuição da permeabilidade - perda de porinas • Efluxo ativo - Eliminação da droga por bombas dependentes de energia • Baixo grau de resistência • Não respeita classe de antimicrobianos • Normalmente associado a outros mecanismos • Responsável pela menor sensibilidade intrínseca de algumas espécies (BGN-NF) Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002

  32. Gram Negativos - Resistência sair Porina Impermeabilidade da membrana: B-lactâmico memb. externa peptideoglicano PBP espaço periplásmico membrana citoplasmática Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996

  33. Gram Negativos - Resistência sair Efluxo ativo Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996

  34. Resistência mediada por efluxo ativo sair • Eliminação da droga por bombas dependentes de energia • Baixo grau de resistência • Normalmente associado a outros mecanismos • Não respeita classe de antimicrobiano: resistência cruzada “aleatória” • Resistência intrínseca

  35. CLINICAL LABORATORY STANDARDS INSTITUTE (CLSI – ANTIGO NCCLS) sair Organização internacional, interdisciplinar e educacional que promove o desenvolvimento e a ampla utilização de normas e procedimentos laboratoriais padronizados. A subcomissão do CLSI é composta de representantes de profissões, do governo e indústria, incluindo laboratórios de microbiologia, educadores, farmacêuticos, etc.

  36. CLINICAL LABORATORY STANDARDS INSTITUTE (CLSI) sair • Recomendações na escolha dos antimicrobianos • Padronização das técnicas • Critérios para a interpretação dos resultados • Parâmetros para o controle qualidade do teste.

  37. sair

  38. sair

  39. sair

  40. sair

  41. sair

  42. Avaliação da Sensibilidade Enterobactérias sair • Ágar Müeller-Hinton • Inóculo  método de crescimento e suspensão direta • Incubação  35  2oC em atm. ambiente • Leitura  16 a 18h • Controle de qualidade  E.coli ATTC* 25922  E.coli ATTC* 35218 CLSI , M100-S15 tabela 2A, 2005

  43. Enterobactérias sair Amoxacilina AMICACINA AMPICILINA AMPICILINA/Sulbactam AZTREONAM CEFALOTINA CEFEPIMA CEFTAZIDIME CEFOXITINA CEFTRIAXONA CIPROFLOXACINA GENTAMICINA IMIPENEM PIPERACILINA/Tazobactam SULFA/TRIMET TICARCILINA/Ác.clavulânico Amoxacilina/ác.clavulânico Cefotaxima Levofloxacina Meropenem CLSI, M100-S15 Tabela 2A, 2005

  44. EnterobactériasSugestão para o antibiograma sair 1- AMPICILINA 2- AMOXACILINA/ÁC. Clav. 3- PIPERACILINA/TAZ. 4- CEFALOTINA 5- CEFOXITINA 6- CEFOTAXIMA/CEFTRIAXONA 7- CEFTAZIDIMA 8- CEFEPIMA 9- IMIPENEM 10- CIPROFLOXACINA 11- SMX/TMP 12- AMICACINA 6 5 12 30 mm 25-30 mm 7 2 8 9 11 10 1 4 3

  45. CESP Cromossômica Induzível Cefoxitina R Hidrolizam: aztreonam, cefalosporinas ( 1ª,2ª, 3ª), e penicilinas; Não são inibidas por inibidores -lactamases ; Carbapenens e cefepima. E. coli, K pneumoniae, K. oxytoca e P. mirabilis Plasmidial Cefoxitina S Hidrolizam: aztreonam, cefalosporinas ( 1ª, 3ª e 4ª) e penicilinas; Inibidas por inibidores de -lactamases; Carbapenens. AMPC / ESBL sair

  46. Teste de indução de-lactamases do Grupo 1 (AmpC) sair

  47. sair

  48. sair

  49. DETECÇÃO DE AMOSTRAS PRODUTORAS DE ESBL sair Disco -aproximação Helio Sader - LEMC

  50. Avaliação da Sensibilidade P. aeruginosa, Acinetobacter spp.,S. maltophilia B. cepacia sair • Ágar Müeller-Hinton • Inóculo  método do crescimento ou suspensão direta • Incubação  35  2oC em atm. ambiente • Leitura  16 a 18h / 20 a 24h • Controle de qualidade  Ps. aeruginosa ATTC* 27853  E.coli ATTC* 35218  E.coli ATTC*25922 CLSI , M100 - S15 tabela 2B, 2005

More Related