1 / 52

Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική

Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων <<Π. & Α. Κυριακού>>. Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική 7η Ημερίδα Κλινικής Μικροβιολογίας 20 Ιανουαρίου 2007.

hieu
Download Presentation

Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Ειρήνη Παρασκάκη, Βιοπαθολόγος, Διευθύντρια Μικροβιολογικού Τμήματος, Παράρτημα Νοσοκομείου Παίδων <<Π. & Α. Κυριακού>> Το αντιβιόγραμμα στην καθημερινή Εργαστηριακή Πρακτική 7η Ημερίδα Κλινικής Μικροβιολογίας 20 Ιανουαρίου 2007

  2. Κύριοι φανότυποι μικροβιακής αντοχής του πνευμονιοκόκκου και άλλων απαιτητικών μικροβίων και η ερμηνεία τους • Streptococcus pneumoniae • Haemophilus influenzae • Neisseria gonorrhoae • Neisseria meningitidis

  3. Αντοχή του Streptococcus pneumoniaeστα β-λακταμικά αντιβιοτικά (Ι) • Τροποποίηση των πενικιλλοδεσμευτικών πρωτεϊνών (PBPs) που κωδικοποιούνται από μωσαϊκά γονίδια • Το ξένο γενετικό υλικό ενσωματώνεται στο DNA του πνευμονιοκόκκου με μεταμόρφωση (transformation) • Παραγωγή β-λακταμάσης δεν έχει ανιχνευτεί

  4. Αντοχή του Streptococcus pneumoniaeστα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙ) • Έχουν περιγραφεί 5 υψηλού ΜΒ πρωτεΐνες (PBP 1a, 1b, 2a, 2b,2x) & μία χαμηλού ΜΒ (PBP3) • Κύριος στόχος για την πενικιλλίνη είναι η PBP 2b • Πρωτεΐνη στόχος για τηνκεφοταξίμη είναι η PBP 2x

  5. Αντοχή του Streptococcus pneumoniaeστα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙΙ) • Η πενικιλλίνη έχει πολύ πιο έντονη βακτηριολυτική δράση από τις κεφαλοσπορίνες • Η ‘’in vitro’’ευαισθησία ή αντοχή στην πενικιλλίνη δεν συνεπάγεται απαραίτητα και ανάλογη ευαισθησία ή αντοχή στις κεφαλοσπορίνες τρίτης γενιάς

  6. Αντοχή του Streptococcus pneumoniaeστα β-λακταμικά αντιβιοτικά (ΙΙΙ) • Για την έκφραση αντοχής χαμηλού επιπέδου αρκούν μεταλλαγές σε μία μόνο PBP • Για την έκφραση αντοχής υψηλού επιπέδου χρειάζονται μεταλλαγές & σε άλλες PBPs • H αντοχή συμβαίνει σταδιακά

  7. Εξάπλωση της αντοχής στα β-λακταμικά αντιβιοτικά • Οριζόντια μεταφορά: μωσαϊκών pbp γονιδίων που κωδικοποιούν αντοχή στα εν λόγω αντιβιοτικά από ένα στέλεχος σε άλλο • Κάθετη μεταφορά: διχοτόμηση καιδημιουργία ανθεκτικού κλώνου • Κλωνική διασπορά: μετάδοση από άνθρωπο σε άνθρωπο

  8. Αντοχή του Streptococcus pneumoniaeστις μακρολίδες • Ενεργητική έξοδος του αντιβιοτικού από το κύτταρο • Τροποποίηση του στόχουδράσης (23S τμήμα της 50S υπομονάδας του rRNA)

  9. Ενεργητική έξοδος του αντιβιοτικού από το κύτταρο Μ-φαινότυπος • Επιτελείται με τη δράση μιας μεμβρανικής πρωτεΐνης→ γονίδιο mefA • Χαμηλού επιπέδου αντοχή μόνο στις 14-, και 15-μελείς μακρολίδες

  10. Τροποποίηση του στόχου δράσης MLSB-αντοχή • Μεθυλίωση μιας αδενίνης στη θέση 2058του 23S τμήματος της 50S υπομονάδας(erm γονίδια) • Διασταυρούμενη αντοχή με τις μακρολίδες, λινκοσαμίδες και στρεπτογραμίνη Β

  11. Φαινότυποι αντοχής λόγω τροποποίησης του στόχου (Ι) MLSΒ- αντοχή Ι) Ιδιοσυστασιακός (constitutive resistance phenotype, cMLSB) • Υψηλή αντοχή σε όλες τις μακρολίδες (14-,15-16-μελείς) • Υψηλή αντοχή στη στρεπτογραμίνη Β • Υψηλή αντοχή στην κλινταμυκίνη

  12. Φαινότυποι αντοχής λόγω τροποποίησης του στόχου (ΙΙ) MLSBαντοχή ΙΙ)Επαγώγιμος (inducible resistance phenotype, iMLSB) • Χαμηλή αντοχή σε όλες τις μακρολίδες • Υψηλή αντοχή στη στρεπτογραμίνη Β • Υψηλή αντοχή στις λινκοσαμίδες

  13. Νέοι φαινότυποι (ΜSB,ML) • Οφείλονται σε μεταλλαγές στο rRNA του 23S –θέση 2059-, ή στις πρωτεΐνες L2 ή L4 • ΜSB→ αντοχή στις μακρολίδες και τη στρεπτογραμίνη Β • ML → αντοχή στις μακρολίδες και την κλινταμυκίνη Το επίπεδο της αντοχής στις μακρολίδες είναι ανάλογο το αριθμού και του είδους των μεταλλαγών

  14. iMLSB-φαινότυπος M-φαινότυπος cMLSB-φαινότυπος A:δίσκος κλινταμυκίνης, Β: δίσκος ερυθρομυκίνης

  15. Έλεγχος ευαισθησίας του πνευμονιοκόκκου • Μέθοδος διάχυσης των δίσκων • Μέθοδος των μικροαραιώσεων των αντιβιοτικών σε ζωμό (Προσδιορισμός της MIC) • Το Etest→ καλή εναλλακτική τεχνική

  16. Μειονέκτημα της μεθόδου διάχυσης των δίσκων Δεν μπορεί να ελεγχθεί αξιόπισταη ευαισθησία του πνευμονιοκόκκου στα β-λακταμικά αντιβιοτικά

  17. Αλγόριθμος ελέγχου ευαισθησίας στελεχών πνευμονιοκόκκου στα β-λακταμικά αντιβιοτικά από ασθενείς με άλλη λοίμωξη, εκτός μηνιγγίτιδας • Μέθοδος των δισκίων Διάμετρος > 20 mm→ ευαίσθητο σε όλα τα β-λακταμικά αντιβιοτικά Οξακιλλίνη 1μg Διάμετρος < 20 mm MIC Πενικιλλίνη, κεφοταξίμη ή κεφτριαξόνη

  18. Breakpoints στελεχών πνευμονιοκόκκου σε κεφοταξίμη/κεφτριαξόνη/κεφεπίμη ανάλογα με τη λοίμωξη (NCCLS, 2002)

  19. Αντιβιοτικά για τον έλεγχο ευαισθησίας του πνευμονιοκόκκου Πίνακας CLSI τροποιηθείς, 2006 *Αντιβιοτικά που ελέγχονται με MIC

  20. Αλγόριθμος ελέγχου ευαισθησίας στελεχών πνευμονιοκόκκου από ασθενείς με μηνιγγίτιδα MIC πενικιλλίνη Ευρέως φάσματος κεφαλοσπορίνη Δισκία, ή MIC Βανκομυκίνη

  21. Δεν θα αναφέρονται σε ασθενείς με μηνιγγίτιδα • Από το στόμα χορηγούμενους αντιμικροβιακούς παράγοντες • Κεφαλοσπορίνες α΄& β΄γενεάς • Μακρολίδες • Κλινταμυκίνη • Κινολόνες • Τετρακυκλίνη

  22. Haemophilus influenzae

  23. Αντοχή του H. influenzaeστην αμπικιλλίνη (Ι) Στο διεθνή χώρο • Αμπικιλλίνη: συνήθως έως 35%, σπάνια έως 60% • Στον ελληνικό χώρο • Αμπικιλλίνη: έως 15%

  24. Αντοχή του H.influenzaeστην αμπικιλλίνη (ΙΙ) • Παραγωγή β-λακταμάσης (ΤΕΜ-1 >95%) • Τροποποίηση των PBPs (β-Lactamase Negative Ampicillin Resistant στελέχη,BLNAR(<2%) Στον ελληνικό χώρο • BLNAR στελέχη: <1,0%

  25. Στελέχη H.influenzaeβ-λακταμάση θετικά • Δοκιμασία νιτροσεφίνης θετική • Ανθεκτικά σε αμπικιλλίνη & αμοξικιλλίνη • Ευαίσθητα σε αμοξυκιλλίνη-κλαβουλανικό οξύ • Για τις κεφαλοσπορίνες & τις άλλες β-λακτάμες ισχύει η in vitro ευαισθησία ή αντοχή

  26. Στελέχη H.influenzaeαμπικιλλίνη ανθεκτικά, β-λακταμάσηαρνητικά (BLNAR) • Δοκιμασία νιτροσεφίνης αρνητική • Ανθεκτικά στην αμπικιλλίνη & αμοξικιλλίνη • Ανθεκτικά στους συνδυασμούς β-λακταμικών με αναστολείς β-λακταμασών • Ανθεκτικά στις κεφαλοσπορίνες α & β γενεάς • MIC της αμπικιλλίνης χαμηλή (4mg/ml)

  27. H. influenzae Πίνακας τροποιηθείς, CLSI, 2006

  28. Neisseria gonorrhoeae

  29. Neisseria gonorrhoeae Αντιβιοτικά • Πενικιλλίνη • Κεφαλοσπορίνες γ γενεάς • Τετρακυκλίνη • Σπεκτινομυκίνη • Κινολόνες

  30. Αντοχή της Neisseria gonorrhoeae στην πενικιλλίνη Α) Πλασμιδιακή • Παραγωγή β-λακταμασών τύπου ΤΕΜ-1(penicillinase producing N. gonorrhoaea, PPNG) • Δοκιμασία νιτροσεφίνης θετική • Υψηλού επιπέδου αντοχή (>8μg/ml) • Ανθεκτικά στην πενικιλίνη, αμπικιλίνη, αμοξυκιλλίνη

  31. B) Χρωμοσωμιακή αντοχή στην πενικιλλίνη (Chromosomally mediated resistant N. gonorrhoaea, CMRNG) • Δοκιμασία νιτροσεφίνης αρνητική • Χαμηλού επιπέδου αντοχή (<4 μg/ml) Οφείλεται σε: • Μειωμένη διαπερατότητα κυτταρικού τοιχώματος (Mtr,env γονίδια) • Τροποποίηση της PBP-2 (penΑγονίδιο):

  32. Αντοχή της Neisseria gonorrhoeae στην τετρακυκλίνη Α) Πλασμιδιακή • Υψηλού επιπέδου αντοχή • Πλασμίδιο tetM Β) Χρωμοσωμιακή • Χαμηλού επιπέδου

  33. Κινολόνες Οφείλεται σε: • Μεταλλαγές σταγονίδιο gyr Α ή parC • Μειωμένη διαπερατότητα Έλεγχος της αντοχής:με ναλιδιξικό οξύ • Ταυτόχρονες μεταλλαγές στα γονίδια gyr Α και parC→ πιο υψηλή αντοχή • Χορήγηση κινολονών σε υποθεραπευτικές δόσεις → πολλαπλές μεταλλαγές

  34. Έλεγχος ευαισθησίας το μικροβίου • Μέθοδος διάχυσης των δίσκων • Μέθοδος αραιώσεων των αντιβιοτικών σε άγαρ • Etest αποτελεί καλή εναλλακτική τεχνική

  35. Σχόλια • Δεν ενδείκνυται η μέθοδος των μικροαραιώσεων σε ζωμό • Στελέχη που παράγουν β-λακταμάση είναι ανθεκτικά στην πενικιλλίνη, αμπικιλλίνη, αμοξυκιλλίνη • Όλα τα στελέχη που ανήκουν σε μη ευαίσθητες κατηγορίες αποστέλλονται στο ΕΚΑΓ

  36. NEISSERIAGONORHOEAE Πίνακας CLSI, 2006, τροποποιηθείς

  37. NEISSERIA MENINGITIDIS

  38. Αντοχή της Neisseria meningitidis στην πενικιλλίνη • Φάρμακο εκλογής: πενικιλλίνη ή ευρέως φάσματος κεφαλοσπορίνη • Σπάνια απομονώνονται στελέχη με μειωμένη ευαισθησία στηνπενικιλλίνη • Στην Ελλάδα απομονώνονται σε συχνότητα 15% • Η μειωμένη ευαισθησία οφείλεται σε τροποποίηση της PBP2(penA γονίδιο)

  39. Μέθοδοι ελέγχου ευαισθησίας του μικροβίου • Μέθοδος διάχυσης των αντιβιοτικών σε άγαρ • Μέθοδος αραιώσεων των αντιβιοτικών σε άγαρ ή σε ζωμό (Προσδιορισμός της MIC) • Εtest

  40. Προτεινόμενα αντιβιοτικά CLSI, 2006

  41. Σχόλια • Η πενικιλλίνη ελέγχεται με MIC • Η δοκιμασία νιτροσεφίνης είναι απαραίτητη • Χρησιμοποιείται το ναλιδιξικό οξύ για την ανίχνευση της αντοχής στις κινολόνες • Πρέπει να τηρούνται οι προφυλάξεις βιοασφάλειας επιπέδου ΙΙ

  42. Σχόλια (ΙΙ) • Τα μη ευαίσθητα στελέχη αποστέλλονται σε Κέντρο Αναφοράς • α)CLSI:ενδιάμεση ευαισθησία → 0.125 μg/ml, ή 0.25 μg/ml β)European Monitoring Group of Meningococci (EMGM):ενδιάμεση ευαισθησία →> 0.094 μg/ml

More Related