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ANALISI PRELIMINARI DELLA VARIABILITA’ GENETICA DI UNA SPECIE A RISCHIO DI ESTINZIONE:

ANALISI PRELIMINARI DELLA VARIABILITA’ GENETICA DI UNA SPECIE A RISCHIO DI ESTINZIONE: ISO Ë TES MALINVERNIANA CES. DE NOT. R. GENTILI, G. ROSSI, T. ABELI, D. VRACEVIC, S. SGORBATI. Riunione del Gruppo di Biosistematica SBI Milano, 5-6 giugno 2008. DISAT – Università di Milano-Bicocca

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ANALISI PRELIMINARI DELLA VARIABILITA’ GENETICA DI UNA SPECIE A RISCHIO DI ESTINZIONE:

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  1. ANALISI PRELIMINARI DELLA VARIABILITA’ GENETICA DI UNA SPECIE A RISCHIO DI ESTINZIONE: ISOËTES MALINVERNIANA CES. DE NOT. R. GENTILI, G. ROSSI, T. ABELI, D. VRACEVIC, S. SGORBATI Riunione del Gruppo di Biosistematica SBI Milano, 5-6 giugno 2008 DISAT – Università di Milano-Bicocca DET – Università di Pavia

  2. SPECIE MINACCIATE Ailuropoda melanoleuca Ursus maritimus Isoëtes malinverniana Ossiculum aurantiacum Panthera tigris

  3. SISTEMATICA DIVISIONE: Lycopodiophyta  (Selaginelle, Licopodi, Isoeti) CLASSE: Lycopsida (Isoëtopsida) ORDINE: Isoëtales FAMIGLIA: Isoëtaceae GENERE: Isoëtes SPECIE: Isoëtes malinverniana - La linea delle Isoëtes risale al Devoniano sup. (375 m.a.) - Hanno distinzione netta, morfologica e genetica da Selaginellales e Lycopodiales (Schuettpletz & Hoot, 2006 – Syst. Bot.) FOSSILI VIVENTI

  4. FILOGENESI GENERE ISOËTES Taxon isolato Elevato valore sistematico Elevato grado di specificità Elevato indice di biodiversità ITS region Hoot et al., 2006 – Syst. Bot.

  5. Isoëtes ITALIANE 5/6 specie Marchetti, 2003

  6. DESCRIZIONE - Morfologia: fusto ridotto ad un bulbo trilobo; fronde nastriformi; macrospore di 600-800 μ, microspore scabre. - Forma biologica: idrofita radicante

  7. ECOLOGIA • Cresce nei canali di irrigazione delle risaie, in rogge e “canali derivati da fontanili”. Substrato ghiaioso-sabbioso con matrice fangosa. Acque lente. Alnus glutinosa, (Robinia pseudo-acacia) Carex sp. pl. Corrente Habitat relitti e disturbati  scomparsa ecosistemi

  8. DISTRIBUZIONE E POPOLAZIONI Specie endemica della Pianura Padana (W) • Popolazioni • A) Vigevano (PV): • Cavo Bogino • C.na Malandra: • 230 individui ca. • B) Vercelli (VC) • Ghislarengo • Lenta • Arborio • 1000 individui ca. Ghislarengo (VC) Biella (BI) Vigevano (PV) Riduzione areale 80% Stazioni scomparse : Biella (BI), Parco del Ticino (PV) Areale (sensu IUCN): 305 Kmq Superficie occupata (sensu IUCN): 20 Kmq

  9. STATO DI CONSERVAZIONE - IUCN Conti et al. (1997) CR – Critically Endangered Sbancamento per costruzione superstrada CR STATO ATTUALE:?? MINACCE: Costruzione superstrada; inquinamento delle acque (erbicidi).

  10. SCOPI UNI-PV - Stato di conservazione secondo i criteri IUCN (2001) • Studio popolazionistico / demografico in relazione a parametri ecologici (granulometria, velocità corrente, T° acque, ecc.) • Verificare il contenuto di DNA (ploidia), il livello di variazione genetica inter- e intra- popolazionistica della specie, il flusso genico, l’eterozigosità. • Scopo ultimo: individuare le popolazioni, eventualmente più variabili, al fine di selezionare individui da utilizzare in reintroduzioni in natura; salvare la specie dalla probabile estinzione a cui sta andando incontro. UNI-MIB

  11. METODI Vigevano (PV) TOTALE: 101 campioni Vercelli (VC)

  12. METODI • Citometria di flusso: • - misurare il contenuto di DNA delle diverse popolazioni di I. malinverniana per il quale non vi sono dati in letteratura e verificare indirettamente il loro livello di ploidia. N° nuclei misurato con il citometro ApogeeFlow. • - in letteratura il genere Isoëtes risulta avere 2n=22, 44, 66, 110 • Marcatori Molecolari • Estrazione DNA Nucleon PhytoPure (0,1g) • - I-SSR primer daDong et al., 2007- Aquat. Bot. • - RAPD primer da Tripathi et al., 2007 – Turk J. Bot. • Indici variabilità genetica: Shannon, Nej’s, ecc.  software POPGENE ver 1.31

  13. CITOMETRIA Fosso della Regina (VC) In letteratura è dato come tetraploide 2n= 4x=44 (Marchetti, 2003). Quantità di DNA di I. malinverniana Fluor. media nuclei campione= 2.23 Fluor. media nuclei standard 2.23 x 2.33 pg = 5,21 pg

  14. MARCATORI I-SSR POP RA POP Fb2 M PRIMER: SBS827 Sequenza: (AC)8G 808 811 827 810 M Altri primer da testare I-SSR RAPD OP-C06:GAA CGG ACT C OP-C07: GTC CCG ACG A OP-R08: CCC GTT GCC T SBS807:(TC)8A SBS826: (GA)8T SBS834:(AT)8CGC Dong et al., 2007- Aquat. Bot. Tripathi et al., 2007 – Turk J. Bot

  15. CONSIDERAZIONI FINALI • Risultati ancora da verificare • Lavoro multi-disciplinare • Conservation biology  IUCN assessment • Conservation genetics  popolazione + variabile • Restoration ecolgy  reintroduzione in natura • Contribuire all’elaborazione di Linee Guida per la conservazione delle specie spontanee a rischio di estinzione tenendo conto di tutti gli aspetti  iniziativa APAT

  16. GRAZIE PER L’ATTENZIONE Please, save me!! R. GENTILI, G. ROSSI, T. ABELI, D. VRACEVIC, S. SGORBATI

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