实验室生物安全
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实验室生物安全. 眼科学国家重点实验室. 实验室意外事故频发. 2009 年 10 月 北京理工大学爆炸 实验室内 5 人均受伤 原因:厌氧培养箱调试时发生气体爆炸 2008 年 7 月 云南省微生物研究所实验室突发爆炸 1 名博士研究生受伤 原因:收集实验废料时操作不当引发爆炸 2011 年 6 月 实验室办公室被盗 笔记本一台,相机一部,财物若干 原因:外来人员趁周末入室盗窃. 实验室常见意外. 溢出和泼洒 针头和注射器刺伤 锐器、碎玻璃割伤 动物咬伤、抓伤 火灾、爆炸 紫外线损伤 中毒

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Presentation Transcript


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实验室生物安全

眼科学国家重点实验室


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实验室意外事故频发

  • 2009年10月

    北京理工大学爆炸

    实验室内5人均受伤

    原因:厌氧培养箱调试时发生气体爆炸

  • 2008年7月

    云南省微生物研究所实验室突发爆炸

    1名博士研究生受伤

    原因:收集实验废料时操作不当引发爆炸

  • 2011年6月

    实验室办公室被盗

    笔记本一台,相机一部,财物若干

    原因:外来人员趁周末入室盗窃


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实验室常见意外

  • 溢出和泼洒

  • 针头和注射器刺伤

  • 锐器、碎玻璃割伤

  • 动物咬伤、抓伤

  • 火灾、爆炸

  • 紫外线损伤

  • 中毒

    无安全意识

穿白褂到处走

戴手套随意开门柄、接电话 台面/器皿不清洁

实验后不收拾

针头等尖利物品不放入利器盒


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实验室生物安全

  • 实验动物生物安全

  • 化学品生物安全

  • 临床实验室生物安全

  • 病原微生物实验室安全

  • 基因工程生物安全

  • 放射性实验生物安全


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实验动物的分级

一级:普通级动物

大动物(比格犬、恒河猴、小型猪等)

豚鼠、家兔

二级:清洁级动物

豚鼠、家兔

大、小鼠均为二级以上

三级:无特定病原体(SPF)动物

豚鼠、家兔

大、小鼠

四级:无菌级动物

裸鼠、无菌豚鼠、无菌大小鼠


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实验动物使用过程生物安全的相关因素

  • 动物因素

    • 完整的资料

    • 品种、品系、遗传背景或其来源清楚

    • 微生物检测状况

    • 质量合格证号、生产许可证号

  • 实验环境和设施的配备

    • 隔离检疫室、饲养室、实验处置室、储存室等

  • 实验操作者因素

    • 严格做好防护,穿工作服、戴帽子、手套、口罩


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动物实验安全注意事项

  • 不同级别的动物在相应的环境中进行实验

    • 不得将普通级动物带进屏障环境中实验

    • 不得将带出屏障环境的实验动物,再带回屏障环境

  • 特殊改造的实验室

    • 涉及传染性、中毒性、放射性、致癌性、致突变或致畸性动物实验


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实验动物废弃物处理

  • 无污染的实验动物尸体

    • 及时装入专用塑料袋密封后,当天送回动物中心,不得随意丢弃

  • 已污染或具有危险性的动物尸体及组织

    • 按规定收集、分离、包装标识后,当天送回动物中心,统一运输到特定场所焚烧


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被动物咬了怎么办?

  • 凡不能确定伤人动物是否健康,应立即对受伤部位进行彻底清洗和消毒,越早越好,24-48小时内

  • SPF级动物咬伤,建议注射破伤风及流行性出血热抗毒素

  • 彻底冲洗

    • 肥皂水、清水、碘制剂或乙醇等,冲洗20分钟

  • 严格消毒

    • 2~3%碘酒或75%酒精涂于伤口

  • 酌情处置

    • 未伤及大血管的伤口不要缝合及包扎

    • 较大伤口或比较严重的浅部伤口,清创消毒后,先用狂犬病免疫血清或球蛋白浸润伤口,数小时后(不低于2小时)再予缝合包扎

    • 伤口深而大者 放置引流条,并使用抗生素和破伤风抗毒素以控制感染

  • 接种疫苗

    • 越早越好。已受伤一段时间而未接种狂犬病疫苗者,也应按接种程序接种疫苗


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化学品生物安全

危险化学品标志


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危险化学品的分类

  • 爆炸品受热、受压或撞击时产生爆炸或燃烧,如叠氮钠、TNT

  • 压缩和液化气体

    受热、撞击或强烈震动时,导致容器破裂爆炸或气瓶阀门松动漏气,酿成火灾或 中毒,如氧气泄漏时可能引起火灾;氮气、二氧化碳泄露可能引起窒息

  • 氧化剂和有机过氧化物高温、摩擦、撞击等易燃烧,甚至爆炸,如硝酸盐等

  • 易燃液体乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇等

  • 易燃固体自燃和遇湿易燃,如金属钠、红磷等

  • 有毒品

    通过呼吸道、皮肤和消化道进入体内,引起刺激、过敏、缺氧、昏迷和麻醉、致癌、 致畸、致突 变、尘肺等

  • 腐蚀品

    强酸(浓盐酸、浓硫酸)、强碱(氢氧化钠)或其他腐蚀品(氯化铜、甲醛溶液)

  • 放射性物品钋、镭、钴等,高毒甚至剧毒


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化学品的储存

  • 在适宜的温度和湿度下储存化学品,须远离高热源,如烤箱;避免阳光直射,如靠近窗台

  • 定期目测原料和包装容器:颜色、是否溢出、腐蚀等

  • 不得将化学品存放在实验台上,防止被碰倒

  • 不得将化学品存放在地面上,即使是临时放置也不允许

  • 不能将通风橱用作化学品的存放地,以免破坏通风橱的通风效果

  • 不得将易漏有害性或腐蚀性化学品存放在视力水平以上的药品架上


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危险就在你身边!

核酸技术:

  • 强诱变剂,嵌入碱基分子中导致错配,高致癌性

  • 赛百盛称“未发现其有致癌作用”,但有报道其与吖啶橙(强

    致癌剂高度相似其安全性有待进一步评价)

  • 潜在致癌物质,吸入时毒性最强,使用时应戴口罩,通风橱中

    进行

  • 含有苯酚,毒性和刺激性,皮肤接触后立即用大量去垢剂和水

    冲洗

  • 致癌剂,易挥发,损害肝和肾

溴化乙锭(EB)

Golden view

焦碳酸二乙酯(DEPC)

Trizol /Tri-reagent

氯仿(三氯甲烷)


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危险就在你身边!

蛋白技术: Western blot

  • 中等毒性物质,可致癌,累积毒性,不易排毒,主要引起神经、

  • 生殖与发育的毒性

  • 有毒,影响中枢神经系统,切勿吸入粉末

  • 对黏膜、上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性,吸入可致命

  • 强神经毒性,防止误吸,操作时快速,存放时密封

丙烯酰胺

NN-亚甲双丙烯酰胺

过硫酸铵(APS)

四甲基乙烯二胺(TEMED )


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危险就在你身边!

蛋白技术: Western blot

  • 吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康

  • 吸入、咽下或皮肤吸收而致命

  • 有毒,刺激性,高热分解放出有毒气体造成眼睛的严重损伤

  • 神经麻醉作用,引起脑水肿

二硫苏糖醇(DTT )

苯甲基磺酰氟(PMSF)

十二烷基硫酸钠(SDS)

甲醇


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危险就在你身边!

蛋白技术:免疫组化

  • 毒性非常大,可因吸入、咽下或皮肤吸收,操作时应非常小心

  • 微毒类,主要是对中枢神经系统的麻醉作用,能刺激眼睛

  • 毒性,危害不可逆性,吸入或皮肤吸收,应在通风橱操作

  • 毒性大,致癌,腐蚀性,易挥发,也通过皮肤吸收

叠氮钠(NaN3)

丙酮

吉姆萨(Giemsa)

甲醛(福尔马林)


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危险就在你身边!

细胞培养技术:

  • 对皮肤有极强的渗透性,与蛋白质疏水基团作用,导致蛋白质变性,具有血管和肝肾毒性,吸入高挥发浓度可致头痛,晕眩

二甲基亚砜(DMSO)


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临床实验室生物安全

  • 临床样本均具有不同程度的潜在传染性

    • 血液传播性病原体(如HBV和HIV)的操作应在BSL-2下进行

    • 应由受过培训的人员采集患者的血样

    • 操作时应戴手套及眼睛和粘膜的保护装置

    • 血液和血清应当小心吸取,不能倾倒

    • 适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的标本

    • 感染性废物应经过灭菌和焚烧处理


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病原微生物实验室安全

生物安全实验室的分级

  • 一级生物安全实验室(BSL-1)

    • 对健康成年人已知无致病作用的微生物

  • 二级生物安全实验室(BSL-2)

    • 对人或环境具有中等潜在危害的微生物

  • 三级生物安全实验室(BSL-3)

    • 主要通过呼吸道使人传染上严重甚至致死性疾病的微生物,已有预防疫苗

  • 四级生物安全实验室(BSL-4)

    • 对人具有高度危险性,尚无有效疫苗或治疗方法的微生物


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基因工程实验室操作注意事项

基因工程生物安全

  • 所存在的危害是潜在的

  • 应了解基因工程基本原理、实验目的及所操作生物的属性

  • 充分认识所用菌种、受体、载体、目的基因、基因操作方法和基因工程产品的安全性

  • 生物材料和垃圾排放以前需高压消毒


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放射性实验室生物安全

放射性物质的危害

  • 急性放射病

  • 皮肤放射损伤

  • 凝血、造血功能障碍

  • 癌症

  • 遗传性疾病


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放射性实验室基本防护规程

  • 放射性核素实验应在符合防护要求的专门实验室和专用工作台进行

  • 连续从事放射性操作1个月以上应配带剂量仪

  • 遇到少量放射性液体溅洒在手脚等情况时,立即用吸水材料吸干,再用湿布由外向里反复擦洗

  • 短半衰期的放射性废物主要用放置衰变法处理

  • 长半衰期的放射性废物采用焚烧法或埋存法处理

    实验室不具备放射性核素实验条件


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常用仪器使用的注意事项

离心机

  • 在装载离心管后应正确平衡

  • 离心管应始终牢固盖紧

  • 放置好离心管后盖上盖子才可开始离心

  • 离心机放置高度应使实验人员能看到离心机内部

  • 有危险性的微生物,必须使用可封口的离心桶


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常用仪器使用的注意事项

磁力搅拌器

  • 烧杯、瓶子应确保没有裂缝

  • 搅拌时用盖子或保鲜膜封盖

  • 有毒物品应在通风橱中进行

  • 因玻璃容易破碎,故建议使用塑料容器


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常用仪器使用的注意事项

高压蒸汽消毒锅

  • 灭菌条件组合

    • 134oC 3min,126oC 10min,121oC 15min,115oC 25min

  • 注意事项

    • 受过培训的人员负责消毒和日常维护

    • 物品应放在空气能排出并具有良好渗透性的容器中,包装稍松散

    • 待温度下降到80oC 以下后才可打开门取出物品


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常用仪器使用的注意事项

冰箱与冰柜

  • 应定期除霜及清洁,清理出破碎的物品

  • 清理时应戴厚橡胶手套,必要时进行面部防护

  • 储存在冰箱内的容器应标明内装物品的名称,日期和储存者

  • 不能放置易燃物品

  • 应当保存一份冻存物品的清单


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常用仪器使用的注意事项

超净工作台

  • 提前30分钟开台内紫外灯杀菌后,再提前20分钟开风机

  • 工作台面上,不要存放不必要的物品,以保持工作区内的洁净气流正常流动,不受干扰


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常用仪器使用的注意事项

微波炉

  • 运转时,人需保持1米以上的距离,切忌用眼睛观察运转情况,以免受到微波等的损害

  • 加热结束,戴好防护手套再取出加热后的物品

  • 不可将金属容器和带金银边的器皿放入炉中加热,应选择耐热玻璃制品、陶瓷制品或微波炉专用盛器


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注意:请遵守执行

  • 带回实验室的动物应及时处理,不得长时间留在实验室,严格防止实验动物逃出

  • 使用一次性注射器,用过的针头禁止折弯、剪断等,禁止用手直接操作

  • 感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合

  • 细胞培养房废弃物应及时处理

  • 废弃物应经过高压灭菌后在其他地方焚烧后再处理,或在指定垃圾场掩埋

  • 污染的器械应完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中

  • 生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板

  • 操作有毒物品应在通风橱中进行


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注意:请遵守执行

  • 工作期间必须穿专用白大褂、戴防护手套,必要时 戴穿防护服、防护镜、头部保护罩等

  • 实验结束后收拾、清洁台面,洗手

  • 不得将实验室有毒(或可疑有毒)物品带入办公室,不得戴手套在办公室接听电话,使用电脑等

  • 不得在实验室进食

    遇到问题,不知如何处理时,一定立即向知情同学请教或老师汇报,不能擅自处理


Thank you

Thank you!


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