METODICHE DI CONCENTRAZIONE CELLULARE Luca Santoleri
Download

METODICHE DI CONCENTRAZIONE CELLULARE Luca Santoleri







Advertisement
/ 24 []
Download Presentation
Comments
fabian
From:
|  
(345) |   (0) |   (0)
Views: 101 | Added: 05-06-2012
Rate Presentation: 1 0
Description:
METODICHE DI CONCENTRAZIONE CELLULARE Luca Santoleri . SIMT A.O. NIGUARDA CA’ GRANDA MILANO. Novara, 14/12/2010. DISCLAIMER. CONSULENTE SCIENTIFICO EON MEDICA RegenLab. Gel di piastrine.
METODICHE DI CONCENTRAZIONE CELLULARE Luca Santoleri

An Image/Link below is provided (as is) to

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use only and may not be sold or licensed nor shared on other sites. SlideServe reserves the right to change this policy at anytime. While downloading, If for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.











- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -




Slide 1

METODICHE DI CONCENTRAZIONE CELLULARE

Luca Santoleri

SIMT

A.O. NIGUARDA CA’ GRANDA

MILANO

Novara, 14/12/2010

Slide 2

DISCLAIMER

CONSULENTE SCIENTIFICO

EON MEDICA

RegenLab

Slide 3

Gel di piastrine

  • Il gel di piastrine è un prodotto per uso topico costituito da piastrine, di origine autologa o allogenica, che miscelate con opportune soluzioni vengono attivate immediatamente prima dell’uso, a formare un “gel” che viene applicato laddove è necessario favorire un processo riparativo.

  • Il razionale di impiego si basa sul fatto che le piastrine attivate liberano fattori paracrini, o esprimono molecole di membrana in grado di influenzare favorevolmente i processi riparativi.

Slide 4

Gel di piastrine in Ortopedia

  • E’ possibile ottenere 2 prodotti diversi:

  • GEL PIASTRINICO: solo PRP (apporta solo GFs)

  • Viene applicato nella sede dell’innesto osseo al momento della sua applicazione per attivare l’osteogenesi e favorirne l’integrazione.

  • BIOAUTOGLUE: PRP + crioprecipitato (> consistenza)

  • Viene applicato nei casi in cui l’osso non sia in grado di ricevere l’impianto, e quindi debba essere preparato per un successivo intervento.

Strada P - Il Servizio Trasfusionale, 2000 (Linee Guida SIMTI)

Slide 5

The use of autologous platelet gel to treat difficult-to-heal wounds: a pilot study (Mazzucco L et al, Transfusion, 2004)

  • 53 patients enrolled

  • 22 had dehiscent sternal wounds (10 treated and 12 controls)

  • 31 had skin necrotic ulcers (17 treated and 14 controls)

Slide 6

Autologous platelet gel and fibrin sealant enhance the efficacy of total knee arthroplasty: improved range of motion, decreased length of stay and a reduced incidence of arthrofibrosis

Everts et al, Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc 2007;15:888–894

In patients in the treatment group the Hb concentration in blood decreased significantly less when compared to the control group (P < 0.001).

The patients showed a superior postoperative range of motion when compared to those of the control group (P < 0.001).

The incidence of arthrofibrosisand subsequent forced manipulation was significantly less (P < 0.001) in patients managed with platelet gel and fibrin sealant.

Slide 7

COSA DICE LA LEGGE ?

  • Decreto 3 marzo 2005

    “Caratteristiche e modalità per la donazione del sangue e di emocomponenti”

  • Raccomandazione n° R (95) 15 del Comitato dei Ministri agli Stati membri sulla Preparazione, Uso e Garanzia di Qualità degli Emocomponenti

NO STANDARD DI PRODOTTO NE’ DI PROCESSO

IL PARERE DELLA SIMTI

“La produzione di emocomponenti per uso non trasfusionale, o topico, non risulta ancora adeguatamente standardizzata in relazione ad evidenze tecnico-scientifiche”

Standard di Medicina Trasfusionale – Edizioni SIMTI 2007

Slide 8

Cosa dice la letteratura ?

Slide 9

Concentrazione piastrinica ottimale nel PRP

2.5 – 4.5 x 106/μL

(Linee Guida SIMTI, 2000)

1 x 106/μL

(Marx RE, J Oral Maxillofac Surg, 2004)

1.2 – 2.0x 106/μL

(Borzini P, Transf Medicine, 2006)

La conc. Pst e’ il vero parametro di qualita’ ?

Slide 10

A linear increase of the growth factors PDGF-AB, TGF-, VEGF, and EGF with increased platelet number has been reported.

Kevy SV, 27th Annual Meeting of the Society for Biomaterials, St. Paul, Minn., April 26, 2001.

A direct proportionality was found between cell number and growth factor released only for PDGF, TGF-, and EGF. A correlation was not found for VEGF and IGF.

Kevy S V, 5th Annual Hilton Head Workshop on Engineering Tissue, Hilton Head, S.C., February 23, 2001.

Platelet count andGFs concentration (1)

Slide 11

Platelet count andGFs concentration (2)

  • The growth factor content was not well correlated with the platelet count in whole blood nor with the prp (rp=0.35).

  • No influence of gender or age on platelet count or growth factor concentrations was discovered (except IGF-I).

Weibrich G, Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery, 2002; 30: 97–102

Slide 12

Platelet count andGFs concentration (3)

Eppley BL, Plast Reconstr Surg 2004; 114: 1502 - 1508

Slide 13

Platelet count andGFs concentration (4)

Advantageous biological effects seem to occur when PRP with a plt concentration of≈ 1 x 106/µlis used.

At lower concentrations, the effect is suboptimal, whilehigher concentrations might have a paradoxically inhibitory effect.

Weibrich G, Bone 2004; 34: 665 - 671

The platelet growth factor content is quite variable among individuals and it is not necessarily proportional to the platelet count.

Borzini P, Mazzucco L,Transfusion 2005

Weibrich G, Int J Oral Maxillofac Impants 2005

Slide 14

Factors affecting the relationship between Plt and GFs concentration (1)

Platelet activation

Wbc cell count

Plasma GFs contamination

Collection of GFs by fibrin clot

To evaluate early alfa-granule release during PRP preparation P - selectin can be measured

Eppley BL, Plast Reconstr Surg 2004; 114: 1502 - 1508

Slide 15

No correlation between plt and GFs concentration in PRP, because:

manipulation-induced plt stress;

variable susceptibility of plts to stress;

microaggregates in PRP affecting an accurate platelet count;

GF-absorbing proteins (fibrin monomers, thrombospondin released from plts during centrifugation)

Mazzucco L, Vox Sang, 2009; 97 (2): 110-8

Factors affecting the relationship between Plt and GFs concentration (2)

Slide 16

Relationships among plt concentration, GFs concentration and clinical effectiveness isnot clear.Manipulation of pltsand way of gelactivationwere not given enough emphasis as variablesrelevant to GFs release from PRP-gels.Mazzucco L, Vox Sang, 2009; 97 (2): 110-8

Slide 17

FDA APPROVAL

  • Performance testing :

  • pH

  • Count of RBC, WBC and plts in the WB and in PRP;

  • Evaluation of Platelet Recovery and Platelet Concentration Factor

  • Specific tests for plts functionality:

  • P-selectin expression on platelets (on resting and ADP activated platelets)

  • Hypotonic stress response

  • Platelet aggregation (collagen)

Slide 18

SISTEMI PRODUTTIVI

  • “HOME MADE”

     SISTEMI DELL’INDUSTRIA

    • APERTI

    • CHIUSI

Slide 19

GEL PIASTRINICO “HOME MADE”

  • PRPDA AFERESI O DA FRAZIONAMENTO DI SANGUE INTERO (in sacca o in provetta)

  • ATTIVATORE: TROMBINA prodotta dalla ricalcificazione di plasma anticoagulato o SALI DI CALCIO (gluconato o cloruro)

    VANTAGGI

  • Costi diretti < sistemi del commercio

    SVANTAGGI

  • Logistica (cabina a flusso laminare, spazi dedicati)

  • Tempi di lavorazione

  • Risorse umane

  • Difficoltà nello standardizzare i risultati

Slide 20

SISTEMI DELL’INDUSTRIA (1)

  • Chiusi

    Vantaggi:

  • Rischio ridotto di contaminazione batterica

  • Semi - automatizzazione

  • Prodotto aliquotabile e congelabile

  • Standardizzazione del prodotto

    Svantaggi:

  • Costi diretti > “Home made”

  • Difficoltà nella produzione di piccoli volumi

  • Necessità di predeposito nelsetting autologo

    Campo di applicazione:

    banking nel setting allogenico

Slide 21

Angel and the competition: S.W.O.T.

Cytomedix, Angel

  • fully automated / 3 sensors

    • user independent / reproducable

    • adjust processing volume

    • “one-push button”

    • automatic separation of

      PPP, PRP and RBC

  • easy set-up

  • 40 – 180 ml of processed blood / cycle

  • maximal 3 cycles / disposable

  • PRP volume is 10% of the processed

    blood volume with a platelet count of

    5 – 6 times baseline

  • Processing time is 28 min/180 blood

  • more flexible

Strictly Confidential; for internal use only

Slide 22

SISTEMI DELL’INDUSTRIA (2)

  • Aperti

    Vantaggi:

  • Prodotto “fresco”

  • Non necessità di predeposito

  • Possibilità di produrre anche piccoli volumi

  • Standardizzazione delle caratteristiche del prodotto

    Svantaggi:

  • Costi diretti > “Home made”

  • Aumentato rischio di contaminazione batterica, se logistica inadeguata

  • Difficoltà logistiche: sovrintendenza del SIMT

  • Prodotto non sempre aliquotabile e congelabile

    Criticità:

  • Variabilità, tra i diversi sistemi, nell’efficacia di produzione della trombina

    Campo di applicazione: setting autologo

Slide 23

Controlli di qualità

Human plt counts using the GPS II concentration system

Woodell-May JE, Journal of craniofacial surgery, Vol. 16, Number 5, September 2005

Slide 24

TAKE HOME MESSAGES

  • Importanza del sistema produttivo

    • efficienza (piastrine, trombina)

    • no plt stress

  • Eseguire controlli di qualità

  • Eseguire test di sterilità

  • Adempiere alla normativa vigente


Copyright © 2014 SlideServe. All rights reserved | Powered By DigitalOfficePro