Advertisement
1 / 24

DIAGNOSTYKA CHORÓB AUTOIMMUNOLOGICZNYCH


DIAGNOSTYKA CHORÓB AUTOIMMUNOLOGICZNYCH. Lek. med. Husam Samara Katedra i Zakład Immunologii Klinicznej Uniwersytetu Medycznego w Poznaniu . Metody stosowane w diagnostyce chorób autoimmunizacyjnych. Wykrywanie autoprzeciwciał w surowicy: Immunofluorescencja pośrednia

Presentation posted in : General

Download Presentation

DIAGNOSTYKA CHORÓB AUTOIMMUNOLOGICZNYCH

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other sites. SlideServe reserves the right to change this policy at anytime.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.











- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -




Presentation Transcript


Diagnostyka chor b autoimmunologicznych

DIAGNOSTYKA CHORÓB AUTOIMMUNOLOGICZNYCH

Lek. med. Husam Samara

Katedra i Zakład Immunologii Klinicznej

Uniwersytetu Medycznego w Poznaniu


Metody stosowane w diagnostyce chor b autoimmunizacyjnych

Metody stosowane w diagnostyce chorób autoimmunizacyjnych

Wykrywanie autoprzeciwciał w surowicy:

  • Immunofluorescencja pośrednia

  • Metoda immunoenzymatyczna (ELISA)

  • Western blot / immunoblot

  • Metody radioizotopowe

  • Techniki żelowe

    Wykrywanie kompleksów immunologicznych w tkankach:

  • Immunofluorescencja bezpośrednia

  • Immunohistochemia


Immunofluorescencja po rednia

Immunofluorescencja pośrednia

  • Wykrywanie autoprzeciwciał w surowicy lub innych płynach ustrojowych (pł. m-r, pł. stawowy…)

  • Metoda jakościowa

  • Stosowane są skrawki pochodzące z różnych tkanek lub osady komórkowe jako substrat

  • W zależności od stosowanego panelu może służyć jako badanie skryningowe w poszukiwaniu autoprzeciwciał w chorobach narządowo nieswoistych lub jako potwierdzenie obecności p-ciał narządowo swoistych.


Immunofluorescencja po rednia1

Immunofluorescencja pośrednia

Metodyka:

  • Przyrządzanie skrawków mrożeniowych z pożądanych tkanek lub osadów komórkowych

  • Utrwalanie

  • Inkubacja z odpowiednio rozcieńczoną surowicą badaną

  • Inkubacja ze znakowanym przeciwciałem skierowanym przeciwko ludzkim immunoglobulinom

  • Ocena w mikroskopie fluorescencyjnym


Metody swoiste

Metody swoiste

Western blot / imunoblot:

  • Metoda stosowana do jednoczesnego oznaczania jakościowego kilku autoprzeciwciał jako rozszerzenie testu skryningowego


Metody swoiste1

Metody swoiste

Metoda immunoenzymatyczna(Enzyme linked immunosorbent assay- ELISA)

Zastosowania:

  • Potwierdzenie swoistości autoprzeciwciał po badaniu skryningowym

  • Do oznaczenia ilościowego danego autoprzeciwciała.

  • Wykrywanie autoprzeciwciał w chorobach narządowo swoistych.

  • Inne.


Wykrywanie antygen w w tkankach biopsyjnych

Wykrywanie antygenów w tkankach biopsyjnych

Metoda: immunofluorescencja bezpośrednia

  • Polega na bezpośrednim znakowaniu antygenu przy pomocy swoistego przeciwciała znakowanego FITC

  • Stosowana w celu stwierdzenia obecności kompleksów immunologicznych, które się odkładają w różnych tkankach w przebiegu chorób autoimmunologicznych i zakaźnych i ustalania ich składu (Ig’s, dopełniacz, antygeny patogenów)

  • Najczęściej jest stosowana na materiale biopsyjnym z nerki, skóry lub mięśni szkieletowych


Immunofluorescencja bezpo rednia

Immunofluorescencja bezpośrednia


Choroby narz dowo nieswoiste

Choroby narządowo-nieswoiste


Przeciwcia a przeciwj drowe

Przeciwciała przeciwjądrowe

  • Najczęściej występują w chorobach tkanki łącznej (ch. układowych, narządowo-nieswoistych)

  • Oznaczane na komórkach HEP-2 (linia raka płaskonabłonkowego) oraz skrawkach wątroby metodą IMF-pośredniej jako test skryningowy.

  • Typy świecenia:

    • Homogeny:

      • dsDNA, histony, ssDNA, nukleosomy

    • Plamkowy:

      • SS-A, SS-B, Sm, nRNP, Ku, PCNA, inne tzw. ENA

    • Jąderkowy:

      • PM-Scl, Scl-70, fibrylaryna, polimeraza-I RNA, NOR

    • Obwodowy / Błona jądrowa: laminina.

    • Dzielące się komórki:

      • Włókna wrzeciona mitotycznego, midbody, centriole, inne.

        Inne autoprzeciwciała występujące w chorobach tkanki łącznej:

    • czynnik reumatoidalny (IgG przeciwko własnym IgM)

    • p. przeciwcytrulinowe (w RZS- wczesny marker wyprzedzający objawy kliniczne)


Przeciwcia a przeciwj drowe w chorobach narz dowo nieswoistych

Przeciwciała przeciwjądrowe w chorobach narządowo nieswoistych

HEP-2

wątroba

HEP-2

HEP-2

HEP-2

wątroba

dsDNA

Sm/RNP

SS-A/SS-B

HEP-2

wątroba

HEP-2

HEP-2

HEP-2

Wrzeciono

mitotyczne

PM-Scl

Scl-70

fibrylaryna


Choroby narz dowo swoiste

Choroby narządowo-swoiste


Choroby nerek

Choroby nerek

  • Wywołane pierwotną reakcją autoimmunologiczną:

    • Zespół Goodpasture’aprzeciwciała anty-GBM (Glomerular Basement Membrane)

  • Wtórne wywołane odkładaniem się kompleksów immunologicznych w naczyniach kłębuszków

    • Zapalenia naczyń

    • Inne choroby autoimmunizacyjne:

      • Toczeń rumieniowaty układowy: złogi w mezangium i w naczyniach z IgG i C3.

      • Plamica Schonleina-Henocha :zlogi IgA, C3, F. płóksięzyce

      • Nefropatia IgA.

    • Choroby zakaźne


1 choroby w troby

1. Choroby wątroby

Autoimmunologiczne zapalenie wątroby:

  • Przewlekłe zapalenie wątroby (CAH)

    • Typ I

      • p-ciała p-ko F-aktynie / mięśniom gładkim (ASMA)

    • Typ II

      • LKM-1 – (Liver-Kidney microsomal ab.) = cytochrome p450

    • Inne autoprzeciwciała w zapaleniu wątroby:

      • LKM-2

      • LKM-3

      • SLA (soluble liver antigen)

      • ANA, ENA

  • Pierwotna marskość żółciowa

    • AMA- (Anti mitochondrial ab.)

    • ASMA (niektóre przypadki)


2 choroby ol dkowo jeltowe

2. Choroby żolądkowo-jeltowe

  • Celiakia (Choroba trzewna)

    • P-ciała p-ko gliadynie (Anti –Gliadin Antibodies -AGA)

    • P-ciała p-ko endomysjum (Anti-Endomysial Antibodies -EMA)

      • = transglutaminazie tkankowej (tissue TransGlutaminase - tTG)

        IgA oraz IgG

      • Wyższa swoistość i czułość w przypadku obecności autoprzeciwciał w klasie IgA


Diagnostyka chor b autoimmunologicznych

  • Nieswoiste zapalenia jelit (IBD)

    • Wrzodziejące zapalenie jelita grubego

      • pANCA

      • Intestinal goblet cells

    • Choroba Crohna

      • P-ciała p-ko drożdżom piekarskim (Anti-Saccharomyces cerevisiae ab. - ASCA)

      • P-ciała p-ko komórkom zewnątrzwydzielniczym trzustki.

    • Inne enteropatie autoimmunologiczne:

      • P-ciała p-ko enterocytom

  • Przewlekłe zapalenie żołądka oraz niedokrwistość złośliwa:

    • P-ciała p-ko komórkom okładzinowym żołądka – czynnikowi wewnętrznemu Castle’a.


Diagnostyka chor b autoimmunologicznych

Trzustka małpy

S. cerevisiae

Jelito małpy

Komórki zewnątrz-wydzielnicze trzustki

Komórki kubkowe

ASCA

Żołądek szczura

Komórki okładzinowe żołądka

EUROIMMUN


5 endokrynopatie autoimmunologiczne

5. Endokrynopatie autoimmunologiczne

Choroby trzustki:

  • Przeciwciała przeciwko komórkom wyspbeta: cukrzyca typu I

    • glutamic acid decarboxylase (GAD)

    • protein tyrosine phosphatase PTP)

    • insulinoma-associated-2 ab. (IA-2A)

  • Przeciwciała przeciwko insulinie (spontaneous insulin -lAAs),

  • Przeciwciała przeciwko receptorom dla insuliny,

  • Przeciwciała przeciwko receptorom dla insuliny –aktywujące,

  • Inne nie związane z procesem chorobowym: przy stosowaniu leków np. tolbutamid or metimazol


Diagnostyka chor b autoimmunologicznych

Choroby tarczycy:

  • Przewlekłe limfatyczne zapalenie tarczycy typu Hashimoto:

    • P.p. Tyreoglobulinie(TGA),

    • P.p. Tyroperoksydazie ab.(TPO) (lub mikrosomom tarczycy -TMA)

  • Ch. Graves-Basedowa

    p.p. receptorowi dla TSH

  • inne- p.p. hormonom tarczycy:

    • Anty T3lub T4.


Diagnostyka chor b autoimmunologicznych

  • Ch. narnerczy:

    • ch. Addisona

      • Przeciwko komórkom kory nadnercza

      • P. p-ko enzymom steroidowym,

  • Gonady:

    • Przedwczesna niewydolność jajników.

    • Bezpłodność z przyczyn autoimmunologicznych u obu płci

    • P. p-ko plemnikom, kom, jajowym, kom. płaszcza, antygenom nasienia…


Autoimmune polyglandular syndromes

Autoimmune PolyglandularSyndromes

  • APS-1

    • Addison’s dis. + hypoparathyroidism + mucocutameous candidiasis

    • 2 of 3 for diagnosis.

  • APS-2

    • Addison’s dis. + Hashimoto’s dis. + DM-type I

  • Other associations:

    • Thyroid and Gastric Autoimmunity


Zapalenia naczy

Zapalenia naczyń

  • Guzkowe zapalenie tętnic, mikroskopijne zapalenie naczyń:

    • pANCA (MPO, elastaza, lozsomoy)

    • ANA

  • Ziarniniak Wegenera

    • cANCA (proteinaza-3)

    • pANCA rzadziej


I m f bezpo rednia wt rne z ogi igg na granicy sk ry w a ciwej i nask rka

IMF bezpośrednia: wtórne złogi IgG na granicy skóry właściwej i naskórka