Priony, prionové nemoci. Histologické a immunohistochemické vyšetření prionů.

1. Priony, prionové nemoci. Histologické a immunohistochemické vyšetření prionů. Zpracovala: Eva Parobková Spoluautorky:I. Gajdičiarová, M.Zajacová, M. Štecherová

2. Terminologie • Priony jsou (infekční) bílkoviny • Proteinaceous infectious particles • PrPC jsou normální bílkoviny, které se nacházejí na povrchu řady buněk (hlavně CNS) • Funkce není nejasná - synaptický přenos? • buněčná diferenciace?

3. Patologické priony • PrPSc - scrapie, PrPres - rezistentní • PrPSc jsou isoforma PrPC • Aminokyselinový řetěz obou forem je stejný • Liší se v trojrozměrné struktuře • PrPC má převahu alfa helixů (šroubovnice) • PrPSc má převahu beta sheet (plizování)

4. Klíčová patogenetická událost • Strukturální přechod • od • alfa helixů • na • beta strukturu

5. Povaha prionových chorob • Priony jsou jediné známé patogeny, které nemají nukleové kyseliny – jen bílkoviny • Prionové choroby jsou • sporadické • genetické, tj. podmíněné mutacemi • infekční (vč. iatrogenních)

6. Prionové choroby jsou vzácné • Alzheimerova nemoc 1450/1 milion • Parkinsonova nemoc 360/ 1 milion • FTD 14/1 milion • Huntington 11/1 milion • ALS 7/1 milion • Pickova nemoc 2/1 milion • Prionové nemoci 1-2/1 milion

7. Lidské prionové nemoci • Gerstmannův-Sträusslerův-Scheinkerův syndrom (GSS) • Fatální familiální insomnie (FFI) • Sporadická fatální insomnie (FSI) • Kuru • Creutzfeldtova-Jakobova nemoc (CJD) • sporadická • iatrogenní • familiální • nová varianta

8. KURU • Laughing disease/death • Papua-Nová Guinea • Fore People • 50tá léta 20. století • D. C. Gajdusek

9. Creutzfeldtova-Jakobova nemoc (CJD) • Vzácné neurodegenerativní onemocnění • 4 formy: • Sporadická: všude na světě 1-2/1milion • Iatrogenní: přenos lékařským výkonem • Familiální: mutace v genu • Nová varianta: lidská obdoba „nemoci šílených krav“

10. Definitivní diagnóza CJD • Histologický nález • Imunohistochemický nález • Western blot • Genetické vyšetření

11. Histologické vyšetření • Spongiformní změny • Úbytek neuronů • Astrocytóza • PrP plaky • floridní plaky u vCJD

13. Imunohistochemické vyšetření • Průkaz patologického proteinu PrPSC metodou nepřímé imunohistochemie v parafinovém řezu po aplikaci proteolytického enzymu (Proteináza K) nebo po působení proteolytického činidla (guanidin thiokyanát).

15. Imunohistochemické vyšetření • Monoklonální protilátky • klon 3F4 (Dako) • klon 12F10 (Cayman Research) • klon 6H4 (Prionics)

17. Nová varianta CJD (vCJD) • Přibližně 176 zemřelých na celém světě (téměř všichni ve Spojeném království), Francie, Itálie, USA, Kanada, Irsko, Holandsko, Španělsko, Saudská Arábie, Japonsko, • Zřejmě vzniká v souvislosti s požíváním masa z krav, které onemocněly BSE • Inkubace je 10 a více let • Onemocnění je u mladších jedinců • Klinicky i histologicky se liší od sCJD

21. Vlastní zkušenosti2001 - 2007 • 80 klinických podezření • 49 případů CJN 43 sporadických 6 familiálních

22. Klinicko-patologická korelace CJN NRL 1.7.2001-1.7.2006 Klinická diagnóza 80 Definitivní diagnóza 47 Klinicky falešně positivní diagnóza 28 Klinicky falešně negativní diagnóza 3 Případy ve vyšetřování 2

23. Děkuji Vám za pozornost