Alport syndroma

1. Alportsyndroma Prof. Dr. Túri Sándor tanszékvezető egyetemi tanár Szegedi Tudományegyetem Gyermekgyógyászati Klinika, Szeged

2. IV-es típusú kollagén nephropathiák molekuláris genetikai vizsgálata Dr Túri Sándor, Dr. Maróti Zoltán, Dr. Endreffy Emőke SZTE, Gyermekgyógyászati Klinika

3. Magzati korban a Gbm a IV-es tipusú kollagén 2 A1- és 1 A2 láncból épül fel. Az ezeket kódoló gének a 13-as kromoszómán találhatók. A megszületést követően a Gbm már az A3, A4, A5 gének által kódolt fehérjéből fog felépülni, amelyeket kódoló gének a 2-es és az X kromoszómán találhatók. Ez látható a következő táblázatban.

4. A IV-es típusú kollagén (a GBM fő strukturális komponense) 6 féle alfa-láncát különböző gének kódolják

5. Miután mindegyikből 2 db kromoszómája van mindenkinek, és ha csak az egyik kromoszómán örököl A3 vagy A4 láncgén mutációt ez nála és a szülőnél is csak hematuriát okoz. Ez vékony bazal membran szindrómának felel meg. Ez a hematuriás családok 1-14 %-ában mutatható ki. Ha mind a két A3 vagy A4 apai, anyai 2-es kromoszómán ott van a génmutáció ez már autoszom recessziv Alport szindrómát jelent. Lányokban és fiúkban egyaránt lehet.

6. IV-es típusú kollagén nephropathiák

7. Néha az autoszom domináns betegség is lehet 1 db 2-es kromoszóma gén mutációval (ez csak ritkán fordul elő). Azonban az Alport szindrómás betegek 80-85 %-a azért Beteg mert A5 láncgén az X kromoszómában fordul elő, amiből a fiúk csak egyet örökölnek, és ha ez az egy X kromoszóma génmutációt hordoz, az Alport szindróma tünetei jelentkeznek.

8. IV-es típusú kollagén nephropathiák

9. IV-es típusú kollagén nephropathiák

10. Elektronmikroszkópos kép VBMN-ban és AS-ban

11. Betegek és módszerek

12. Eredmények • 1 családban autoszomális recesszív AS(COL4A3 vagy A4láncok mutációinak kombinálódása) • 8 családban X-hez kötött AS(COL4A5érintettsége) • HRM analízis során 10 exonban 23 eltérést mutattunk ki, a szekvencia analízis több lehetséges mutációt mutatott ki • 9 családban VBMN(COL4A3, COL4A4csak egy allélján)

13. I/1II/1 II/2II/3 II/4 II/5 III/1 III/2 III/3 AR-AS család STR marker analíziseCol4A5: DXS456 Az Alport szindrómás III/3-as jelű lány neme is felhivja a figyelmet, hogy nem X kromoszóma gén mutáció áll a tünetek hátterében. Ezt igazolta az X kromoszóma öröklődésmenet vizsgálata a családban, Hiszen mind a 3 lány az apai X kromoszómája mellé ugyanazt az anyai X kromoszómát örökölte, de közülük csak az egyik lány beteg.

14. I/1 II/1 II/2 II/3 II/4 II/5 III/1 III/2 III/3 AR-AS családSTR marker analíziseCol4A3: D2S401 Csak a 3/III.-as Alport szindrómás Lány örökölte a hematuriás apjától és Anyjától azt a 2-es kromoszóma Konbinációt, melyek mindegyike Génmutációt hordozott és ez neki Alport szindrómát okozott.

15. AR-AS családSTR marker analízise • A marker vizsgálat az X kromoszómához való kapcsoltságot kizárta • A 2-es kromoszómán csak az A3 lánc markere volt informatív, ami alátámasztja az AR-AS-t • A tünetek a hordozókban csak VBMN-el járnak, a a AR-AS-es lányban az A3 lánc két allélján történt mutáció

16. X-hez kötött AS családCOL(IV)A5 STR marker analízise I hematuria Hematuria A fiu Gyermeke esélye As-re 50 % AS As

17. X-hez kötött AS család COL(IV)A5 STR marker analízise II As As AS As nem a 2-s krom-hoz köthető Anyai X-hez köthető

18. X-hez kötött AS család magas felbontású olvadáspont (HRM) analízise

19. X-hez kötött AS család szekvencia analízise a 2 nukleotid cseréje aminósav cserével jár a 28-as exonban

20. X-hez kötött AS család genetikai analízise • 2-es kromoszómához való kapcsoltság kizárható • X kromoszómához való kapcsoltság alátámasztott • HRM és szekvencia analízissel aminósav cserével járó mutációt mutattunk ki a 28-as exonban • A hordozó és beteg családtagok szekvencia analízise szükséges a mutáció alátámasztására

21. Összefoglalás • A pontos, alapos beteg- és családvizsgálat elengedhetetlen VBMN és AS esetén (klinikai tünetek, szövettan, családfa, a jövőben molekuláris genetika). • Az öröklődésmenet tisztázása (geno/fenotípus összefüggések) a korrekt genetikai tanácsadáselőfeltétele. • Jelenleg a kapcsoltsági vizsgálat az egyetlen molekuláris genetikai eszköz a rutin diagnosztikában, amíg nem tehető olcsóbbá a mutációs screening.

22. Köszönöm a figyelmet! A. Cecil Alport

23. Az embrionális Gbm A1 és 1 A2 fehérjeláncból épül fel, a felnőtt Gbm pedig az A3 A4 és A5 fehérjeláncból. Ezért nem találjuk meg fiatal gyermekekben az Alport szindróma tipusos tüneteit Amikor a Gbm már A3, A4, A5 kollagén láncokból épül fel, a 2-es kromoszómán található láncgénekből 1 apai és 1 anyai 2-es kromoszómát öröklünk.

24. Bevezetés IV.

25. Célkitűzések • 2-es és X- kromoszóma öröklődés menetének megállapítása(kapcsolt markeranalízis) • Az X kromoszómához kötött forma [COL(IV)A5] mutáció szűrése