Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc
Download
1 / 29

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc - PowerPoint PPT Presentation


  • 106 Views
  • Uploaded on

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc. Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A. Bioptické zpracování trepanobiopsií. Proč se provádí? U pacientů s chorobami krvetvorby nádorového původu nenádorového původu.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about ' Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc' - deo


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc

Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A.


Bioptick zpracov n trepanobiopsi
Bioptické zpracování trepanobiopsií patologie FN Olomouc

  • Proč se provádí?

  • U pacientů s chorobami krvetvorby

    • nádorového původu

    • nenádorového původu


Odb r materi lu jeho fixace a odv pn n
Odběr materiálu, jeho fixace a odvápnění patologie FN Olomouc

  • Materiál se odebírá z lopatky kosti kyčelní

  • Hned po odběru se materiál vkládá do fixačního roztoku

  • Používáme Lőwyho roztok, který tkáň současně fixuje a odvápňuje


P prava l wyho roztoku
Příprava Lőwyho roztoku patologie FN Olomouc

Formaldehyd 40% 100ml

HgCl2 20g

Kyselina octová ledová 50ml

Destilovaná voda 850ml

Postup přípravy:

  • 20g chloridu rtuťnatého rozpustíme v 60ml vařící destilované vody. Přidáme 100ml 40% formaldehydu, 50ml kyseliny octové ledové a zbývající destilovanou vodu

  • Lőwyho roztok skladujeme při 4°C

  • Roztok je toxický – pozor při manipulaci!


Pou it l wyho roztoku
Použití Lőwyho roztoku patologie FN Olomouc

  • Materiál se vkládá do tohoto roztoku již při odběru na oddělení

  • Je nutné, aby byl uveden přesný čas vložení tkáně do Lőwyho roztoku

  • Doba fixace a odvápnění se pohybuje mezi 20-24 hodinami


Dal zpracov n trepanobiopsi
Další zpracování trepanobiopsií patologie FN Olomouc

  • Po 20-24 hodinách se vzorek tkáně zpracovává stejně jako jiný bioptický materiál

  • V konečné fázi zpracování získáme parafinový blok

  • Následuje krájení řezů silných 2-3m

  • Rutinně u nás zhotovujeme 7 preparátů z každého vzorku a barvíme metodami:

    • Hematoxylin-eosin

    • PAS reakce

    • Perlsova metoda

    • Giemsa

    • Gőmory

    • Unna-Papenheim

    • Naftol-ASD-chloracetátesteráza


Barven hematoxylin eosin
Barvení hematoxylin-eosin patologie FN Olomouc

  • Základní barvení pro orientaci ve tkáni

    Výsledek: jádra – tmavě modře

    cytoplazma – růžově červené

Používáme Weigertův železitý hematoxylin


HE 100× patologie FN Olomouc


HE 200× patologie FN Olomouc


Pas reakce
PAS reakce patologie FN Olomouc

PAS reakcí se dobře zvýrazní megakaryocyty, jejichž cytoplazma se barví červenofialově.


PAS 400× patologie FN Olomouc


Pr kaz elezit ho pigmentu
Průkaz železitého pigmentu patologie FN Olomouc

  • Perlsovou metodou

  • Umožňuje zhodnocení přítomnosti pigmentu – hemosiderinu – ve stromálních makrofázích a někdy v erytroblastech

    Výsledek: železo – modře

    buněčné pozadí – v růžovém tónu


Fe 200× patologie FN Olomouc


Fe 400× patologie FN Olomouc


Giemsovo barven
Giemsovo barvení patologie FN Olomouc

  • Dobře vykresluje buněčné struktury

  • Identifikuje mastocyty

    Výsledek: eosinofilní složky – v různých odstínech růžové až červené

    bazofilní složky – v různých odstínech světle modré, až tmavě modré


Giemsa 100× patologie FN Olomouc


Giemsa 200× patologie FN Olomouc


Metoda g mory impregna n metoda
Metoda Gőmory – impregnační metoda patologie FN Olomouc

  • Znázorňuje síť retikulárních vláken stromatu a umožňuje tak posoudit kvantitu retikulárních vláken

  • Za některých patologických stavů, například u myeloproliferativních onemocnění, dochází k výraznému zmnožení retikulárních vláken, někdy i kolagenních vláken až do obrazu dřeňové fibrózy = zvazivovatění

    Výsledek: retikulární vlákna – černě

    jádra – červeně


Gömory 320× patologie FN Olomouc


Gömory 400× patologie FN Olomouc


Metoda unna papenheim
Metoda Unna-Papenheim patologie FN Olomouc

Výsledek: cytoplazma plazmocytů – růžově

červeně

erytroblasty (hnízda erytropoézy) –

růžově červeně


Elias 640× patologie FN Olomouc


Pr kaz naftol asd chloracet tester zy
Průkaz naftol-ASD-chloracetátesterázy patologie FN Olomouc

  • U této metody je důležité barvící roztoky připravovat vždy čerstvé, těsně před použitím

  • Důležité je pH roztoků, pokud neodpovídá požadované hodnotě pH 6.3, musí se upravit

  • Tato metoda je velice citlivá a je nutné dodržovat přesný postup

  • Dobarvení metylzelení

    Výsledek: bílá krevní řada a mastocyty – červeně

    ostatní buněčné elementy – zeleně


CLAE 40× patologie FN Olomouc


CLAE 100× patologie FN Olomouc


CLAE 200× patologie FN Olomouc


Aplikace imunohistochemick ch metod
Aplikace imunohistochemických metod patologie FN Olomouc

  • Výsledek imuno metod je po fixaci a odvápnění v Lőwyho roztoku velmi dobrý

  • Využití zejména u lymfoproliferativních chorob

    Nejčastěji prokazované antigeny:

  • CD20; CD3; CD5; CD23; CD68; CD10; CD138; Bcl-2

  • Kappa, lambda – lehké řetězce imunoglobulinů, IgA, IgG, IgM

  • MPO-myeloperoxidáza – prokazuje bílou krevní řadu


D kuji za pozornost
Děkuji za pozornost patologie FN Olomouc


ad