histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc
Download
Skip this Video
Download Presentation
Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc

Loading in 2 Seconds...

play fullscreen
1 / 29

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc - PowerPoint PPT Presentation


  • 111 Views
  • Uploaded on

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc. Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A. Bioptické zpracování trepanobiopsií. Proč se provádí? U pacientů s chorobami krvetvorby nádorového původu nenádorového původu.

loader
I am the owner, or an agent authorized to act on behalf of the owner, of the copyrighted work described.
capcha
Download Presentation

PowerPoint Slideshow about ' Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc' - deo


An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
Presentation Transcript
histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc

Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A.

bioptick zpracov n trepanobiopsi
Bioptické zpracování trepanobiopsií
  • Proč se provádí?
  • U pacientů s chorobami krvetvorby
    • nádorového původu
    • nenádorového původu
odb r materi lu jeho fixace a odv pn n
Odběr materiálu, jeho fixace a odvápnění
  • Materiál se odebírá z lopatky kosti kyčelní
  • Hned po odběru se materiál vkládá do fixačního roztoku
  • Používáme Lőwyho roztok, který tkáň současně fixuje a odvápňuje
p prava l wyho roztoku
Příprava Lőwyho roztoku

Formaldehyd 40% 100ml

HgCl2 20g

Kyselina octová ledová 50ml

Destilovaná voda 850ml

Postup přípravy:

  • 20g chloridu rtuťnatého rozpustíme v 60ml vařící destilované vody. Přidáme 100ml 40% formaldehydu, 50ml kyseliny octové ledové a zbývající destilovanou vodu
  • Lőwyho roztok skladujeme při 4°C
  • Roztok je toxický – pozor při manipulaci!
pou it l wyho roztoku
Použití Lőwyho roztoku
  • Materiál se vkládá do tohoto roztoku již při odběru na oddělení
  • Je nutné, aby byl uveden přesný čas vložení tkáně do Lőwyho roztoku
  • Doba fixace a odvápnění se pohybuje mezi 20-24 hodinami
dal zpracov n trepanobiopsi
Další zpracování trepanobiopsií
  • Po 20-24 hodinách se vzorek tkáně zpracovává stejně jako jiný bioptický materiál
  • V konečné fázi zpracování získáme parafinový blok
  • Následuje krájení řezů silných 2-3m
  • Rutinně u nás zhotovujeme 7 preparátů z každého vzorku a barvíme metodami:
    • Hematoxylin-eosin
    • PAS reakce
    • Perlsova metoda
    • Giemsa
    • Gőmory
    • Unna-Papenheim
    • Naftol-ASD-chloracetátesteráza
barven hematoxylin eosin
Barvení hematoxylin-eosin
  • Základní barvení pro orientaci ve tkáni

Výsledek: jádra – tmavě modře

cytoplazma – růžově červené

Používáme Weigertův železitý hematoxylin

pas reakce
PAS reakce

PAS reakcí se dobře zvýrazní megakaryocyty, jejichž cytoplazma se barví červenofialově.

pr kaz elezit ho pigmentu
Průkaz železitého pigmentu
  • Perlsovou metodou
  • Umožňuje zhodnocení přítomnosti pigmentu – hemosiderinu – ve stromálních makrofázích a někdy v erytroblastech

Výsledek: železo – modře

buněčné pozadí – v růžovém tónu

giemsovo barven
Giemsovo barvení
  • Dobře vykresluje buněčné struktury
  • Identifikuje mastocyty

Výsledek: eosinofilní složky – v různých odstínech růžové až červené

bazofilní složky – v různých odstínech světle modré, až tmavě modré

metoda g mory impregna n metoda
Metoda Gőmory – impregnační metoda
  • Znázorňuje síť retikulárních vláken stromatu a umožňuje tak posoudit kvantitu retikulárních vláken
  • Za některých patologických stavů, například u myeloproliferativních onemocnění, dochází k výraznému zmnožení retikulárních vláken, někdy i kolagenních vláken až do obrazu dřeňové fibrózy = zvazivovatění

Výsledek: retikulární vlákna – černě

jádra – červeně

metoda unna papenheim
Metoda Unna-Papenheim

Výsledek: cytoplazma plazmocytů – růžově

červeně

erytroblasty (hnízda erytropoézy) –

růžově červeně

pr kaz naftol asd chloracet tester zy
Průkaz naftol-ASD-chloracetátesterázy
  • U této metody je důležité barvící roztoky připravovat vždy čerstvé, těsně před použitím
  • Důležité je pH roztoků, pokud neodpovídá požadované hodnotě pH 6.3, musí se upravit
  • Tato metoda je velice citlivá a je nutné dodržovat přesný postup
  • Dobarvení metylzelení

Výsledek: bílá krevní řada a mastocyty – červeně

ostatní buněčné elementy – zeleně

aplikace imunohistochemick ch metod
Aplikace imunohistochemických metod
  • Výsledek imuno metod je po fixaci a odvápnění v Lőwyho roztoku velmi dobrý
  • Využití zejména u lymfoproliferativních chorob

Nejčastěji prokazované antigeny:

  • CD20; CD3; CD5; CD23; CD68; CD10; CD138; Bcl-2
  • Kappa, lambda – lehké řetězce imunoglobulinů, IgA, IgG, IgM
  • MPO-myeloperoxidáza – prokazuje bílou krevní řadu
ad