Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc
This presentation is the property of its rightful owner.
Sponsored Links
1 / 29

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc PowerPoint PPT Presentation


  • 59 Views
  • Uploaded on
  • Presentation posted in: General

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc. Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A. Bioptické zpracování trepanobiopsií. Proč se provádí? U pacientů s chorobami krvetvorby nádorového původu nenádorového původu.

Download Presentation

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation

Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author.While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server.


- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - E N D - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Presentation Transcript


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Histologické zpracování trepanobiopsií na Ústavu patologie FN Olomouc

Bártová M., Vodičková L., Novotná D., Faltýnková A.


Bioptick zpracov n trepanobiopsi

Bioptické zpracování trepanobiopsií

  • Proč se provádí?

  • U pacientů s chorobami krvetvorby

    • nádorového původu

    • nenádorového původu


Odb r materi lu jeho fixace a odv pn n

Odběr materiálu, jeho fixace a odvápnění

  • Materiál se odebírá z lopatky kosti kyčelní

  • Hned po odběru se materiál vkládá do fixačního roztoku

  • Používáme Lőwyho roztok, který tkáň současně fixuje a odvápňuje


P prava l wyho roztoku

Příprava Lőwyho roztoku

Formaldehyd 40%100ml

HgCl2 20g

Kyselina octová ledová 50ml

Destilovaná voda850ml

Postup přípravy:

  • 20g chloridu rtuťnatého rozpustíme v 60ml vařící destilované vody. Přidáme 100ml 40% formaldehydu, 50ml kyseliny octové ledové a zbývající destilovanou vodu

  • Lőwyho roztok skladujeme při 4°C

  • Roztok je toxický – pozor při manipulaci!


Pou it l wyho roztoku

Použití Lőwyho roztoku

  • Materiál se vkládá do tohoto roztoku již při odběru na oddělení

  • Je nutné, aby byl uveden přesný čas vložení tkáně do Lőwyho roztoku

  • Doba fixace a odvápnění se pohybuje mezi 20-24 hodinami


Dal zpracov n trepanobiopsi

Další zpracování trepanobiopsií

  • Po 20-24 hodinách se vzorek tkáně zpracovává stejně jako jiný bioptický materiál

  • V konečné fázi zpracování získáme parafinový blok

  • Následuje krájení řezů silných 2-3m

  • Rutinně u nás zhotovujeme 7 preparátů z každého vzorku a barvíme metodami:

    • Hematoxylin-eosin

    • PAS reakce

    • Perlsova metoda

    • Giemsa

    • Gőmory

    • Unna-Papenheim

    • Naftol-ASD-chloracetátesteráza


Barven hematoxylin eosin

Barvení hematoxylin-eosin

  • Základní barvení pro orientaci ve tkáni

    Výsledek: jádra – tmavě modře

    cytoplazma – růžově červené

Používáme Weigertův železitý hematoxylin


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

HE 100×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

HE 200×


Pas reakce

PAS reakce

PAS reakcí se dobře zvýrazní megakaryocyty, jejichž cytoplazma se barví červenofialově.


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

PAS 400×


Pr kaz elezit ho pigmentu

Průkaz železitého pigmentu

  • Perlsovou metodou

  • Umožňuje zhodnocení přítomnosti pigmentu – hemosiderinu – ve stromálních makrofázích a někdy v erytroblastech

    Výsledek: železo – modře

    buněčné pozadí – v růžovém tónu


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Fe 200×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Fe 400×


Giemsovo barven

Giemsovo barvení

  • Dobře vykresluje buněčné struktury

  • Identifikuje mastocyty

    Výsledek: eosinofilní složky – v různých odstínech růžové až červené

    bazofilní složky – v různých odstínech světle modré, až tmavě modré


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Giemsa 100×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Giemsa 200×


Metoda g mory impregna n metoda

Metoda Gőmory – impregnační metoda

  • Znázorňuje síť retikulárních vláken stromatu a umožňuje tak posoudit kvantitu retikulárních vláken

  • Za některých patologických stavů, například u myeloproliferativních onemocnění, dochází k výraznému zmnožení retikulárních vláken, někdy i kolagenních vláken až do obrazu dřeňové fibrózy = zvazivovatění

    Výsledek: retikulární vlákna – černě

    jádra – červeně


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Gömory 320×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Gömory 400×


Metoda unna papenheim

Metoda Unna-Papenheim

Výsledek: cytoplazma plazmocytů – růžově

červeně

erytroblasty (hnízda erytropoézy) –

růžově červeně


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

Elias 640×


Pr kaz naftol asd chloracet tester zy

Průkaz naftol-ASD-chloracetátesterázy

  • U této metody je důležité barvící roztoky připravovat vždy čerstvé, těsně před použitím

  • Důležité je pH roztoků, pokud neodpovídá požadované hodnotě pH 6.3, musí se upravit

  • Tato metoda je velice citlivá a je nutné dodržovat přesný postup

  • Dobarvení metylzelení

    Výsledek: bílá krevní řada a mastocyty – červeně

    ostatní buněčné elementy – zeleně


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

CLAE 40×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

CLAE 100×


Histologick zpracov n trepanobiopsi na stavu patologie fn olomouc

CLAE 200×


Aplikace imunohistochemick ch metod

Aplikace imunohistochemických metod

  • Výsledek imuno metod je po fixaci a odvápnění v Lőwyho roztoku velmi dobrý

  • Využití zejména u lymfoproliferativních chorob

    Nejčastěji prokazované antigeny:

  • CD20; CD3; CD5; CD23; CD68; CD10; CD138; Bcl-2

  • Kappa, lambda – lehké řetězce imunoglobulinů, IgA, IgG, IgM

  • MPO-myeloperoxidáza – prokazuje bílou krevní řadu


D kuji za pozornost

Děkuji za pozornost


  • Login