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关于 猪瘟免疫的几个问题

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关于 猪瘟免疫的几个问题. 闫之春 安平 2007-10. 提要. 我的猪群是否流行猪瘟野毒? 用什么方法确定? 多大比例? 我的猪群应如何做免疫控制? 要不要免疫? 哪些群组?何时免疫? 免疫效果如何?用什么指标衡量?. 如何面对一家猪场的疫情? 管理学的视角. 做出诊断: 依据什么说是这种病? 选择监测指标:先定义 采取措施: 测量 / 监控指标 改善提高!. 定义 测量 控制 改善!. 猪瘟 - 诊断要有标准. “ 我场刚出生的仔猪,肾脏回盲口有出血点,看来有温和猪瘟”

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关于猪瘟免疫的几个问题

闫之春

安平

2007-10

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提要
  • 我的猪群是否流行猪瘟野毒?
    • 用什么方法确定?
    • 多大比例?
  • 我的猪群应如何做免疫控制?
    • 要不要免疫?
    • 哪些群组?何时免疫?
    • 免疫效果如何?用什么指标衡量?
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如何面对一家猪场的疫情?管理学的视角
  • 做出诊断:依据什么说是这种病?
  • 选择监测指标:先定义
  • 采取措施:
  • 测量/监控指标
  • 改善提高!
  • 定义
  • 测量
  • 控制
  • 改善!
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猪瘟-诊断要有标准

“我场刚出生的仔猪,肾脏回盲口有出血点,看来有温和猪瘟”

“我场保育期仔猪发烧,送检发现蓝耳病抗体很高,死亡增加,肾脏、回盲口有出血点,看来是蓝耳病散发猪瘟”

“我场仔猪、母猪,猪瘟抗体大部分‘不合格’,中猪死亡增多,可能是散发猪瘟”

“……”

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猪瘟-诊断要有标准
  • 猪瘟
    • 这次全国疫情有猪瘟吗?
  • 某一头猪是否感染猪瘟野毒?
  • 猪群这次疫情是否猪瘟?
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猪瘟-诊断要有标准

猪群、活体、时效!

  • 临床症状:?
  • 病理变化:?
  • 病毒学:
      • 分离??
      • PCR
      • 荧光抗体
      • 反向间接血凝
  • 血清学:
      • 荧光抗体血清中和试验
      • (普通、竞争、间接)ELISA
      • ……..
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猪瘟-诊断要有标准
  • 580母猪,2006年12月, 母猪群流产之后,,5-8周龄保育猪约一半发烧,前后送检15头,2中心:
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猪瘟-诊断要有标准
  • 1,200母猪,2007年6月初3周龄哺乳猪4/12栏发烧,前后送检7头,2研究所:
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猪瘟-诊断要有标准
  • 以什么标准‘觉得’有猪瘟呢?
    • 大体病变
      • 出血点!
        • 临床、大体病变如何与霍乱沙门氏菌病鉴别?甚至中大猪溃疡!
        • 依据很不充分!
    • 猪瘟抗体
      • 尚没有区分野毒vs疫苗毒的抗体检测方法:种猪场销售案例
      • 使用了什么方法测抗体?
      • 有的猪场经常在测不到猪瘟抗体+见到一些出血点时怀疑发生了猪瘟---如果真是猪瘟野毒感染,抗体在5d以内便会大很高!
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猪瘟-诊断要有标准
  • 以什么标准‘觉得’有猪瘟呢?
    • 抗原检测
      • 小心!
      • ELISA
        • 特异性受到广泛质疑
      • PCR
        • 如何区分是疫苗毒的RNA? 不能!
        • 盲样的重复性经常受质疑
      • 分离病毒
        • 不实际
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猪瘟-诊断要有标准
  • PCR、ELISA送检,至少15个样本,一定要设最少15%的(相同猪、同天采样)重复样本,重复性好,才能使用这次检测的结果。
  • 别人无法重复的检测方法不是科学
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猪瘟-诊断要有标准
  • 猪群的流行率是多少?
      • 抽检多少头?抽检什么猪?
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猪瘟-诊断要有标准

从5%或10%流行率群体中挑选30个样本中的预期感染数

  • 许多兽医已经习惯于熟悉的30个样本数(假如流行率≥10%,置信区间在95%,30个样本数足以检测出至少1头阳性)。
    • 当流行率是5%,从一个大的群体中挑选30个样本,其中不包含1头单一发病动物的可能性超过20%。
  • 但是,重要的是我们要记住:当流行率比较低时,用30个样本来诊断疾病的可靠性会不够。
    • 要明确目的:检测疾病?估计流行率或发病率?
    • 群体大小、预期流行率、置信区间、检测方法的敏感性/特异性
    • 当流行率非常高(> 90%)或者非常低时,估计流行率所需的样本数量相对较少
    • 缺少预期流行率的资料,一个保守的方法是使用表示50%流行率的样本数目。再者,这些指导方针是假定理想的检测性能,依据检测性能的参数可能需要加以修改。

估计疾病流行率在10%以内,置信区间为90%或95%

(假定理想的方法),预期流行率对样本数量的影响

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猪瘟-诊断要有标准
  • 以什么标准‘觉得’有猪瘟呢?
    • USDA 资助 AASV 的报告标准
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猪瘟-诊断要有标准
  • 以什么标准‘觉得’有猪瘟呢?
    • USDA 资助 AASV 的报告标准

临床病例的定义

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猪瘟-诊断要有标准

临床个案定义

由于猪瘟的临床症状类似于许多其它流行病,本个案定义旨在帮助确定是否报告该病例。当一个猪群在很大程度值得怀疑且符合一项或者一项以上的下述临床特征,这个猪群则应报告。

1)猪群中具有临床症状的病例

2)猪群中具有临床上一致的病例,包括: 尸体剖检证实肾脏、膀胱、淋巴结、 喉头等器官的出血,或者其它败血病 的症状

3)猪群中具有临床上一致的病例:3个月 前要么从国外进口过有关猪的遗传物质 (材料)、饲料污染,或者与最近参观过 国外农场的人有过接触。

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猪瘟-诊断要有标准
  • 临床症状描述

感染猪可以表现

持续发烧,

皮肤变色,

结膜炎、

神经症状,

呼吸窘迫、

流产和

下痢,

并且对抗生素治疗无效。白细胞减少是一致的发现。

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猪瘟-诊断要有标准

图1 肾皮质的点状出血

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猪瘟-诊断要有标准

图2 扁桃体的多处坏死灶

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猪瘟-诊断要有标准

图3 脾脏的梗死灶

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猪瘟-诊断要有标准

图4淋巴结的周边出血

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猪瘟-诊断要有标准
  • 不要看见出血点轻易下结论 某次发病有猪瘟
    • 鉴别诊断
      • 沙门氏菌病
      • 急性巴氏杆菌病
      • 非洲猪瘟
      • 香豆素中毒
      • 丹毒
      • 副嗜血杆菌
      • 其它病毒性脑脊髓炎
      • 钩端螺旋体病
      • 圆环病毒相关病(PCVAD)
      • 蓝耳病
      • 猪链球菌病
      • 其它败血性疾病
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猪瘟-如何免疫?
  • C-株疫苗特点:一般情况下
    • 抗体产生之前,有没有保护性的体液免疫?
      • 接种约6d后,即应该有。-Aynaud, Corthier 1976; Terpstra 1988
    • 接种3天后即应产生坚强免疫力,中和抗体通常可在2周后产生,并可持续4-12周。断奶仔猪接种后的免疫期可长达1年半。-Biront, Leuner 1987, Terpstra 1990, Dahle 1995, Bounma 2001
    • 对中等毒力(2.2基因亚群)及仅引起繁殖障碍的低毒力株保护性也很好。Yu, Tu, 2001
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猪瘟-如何免疫?
  • C-株疫苗:注意
    • 接种7d后脾脏、血液中上可检出病毒,偶尔可通过接种猪传染给接触猪。用MPK细胞培养的C-株疫苗接种猪的血样中经常可用PCR检出病毒。
    • 用强毒攻击后1-4d (!) 再用C-株疫苗免疫,试验仔猪全部死亡。所谓应急免疫接种实际是不可行的。 Urbaneck, Tesmer, 1973
    • 仔猪的母源抗体越高,对疫苗免疫的抑制作用就越强!
    • 不同类型、病毒量、制作方法的C-株疫苗, 抗体的应答完全不同!! 仇华吉 2004
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猪瘟-如何免疫?
  • 仔猪母源抗体越高,对面疫苗免疫的抑制作用就越强!
  • 不同类型、病毒量、制作方法的C-株疫苗, 抗体的应答完全不同
  • 那么,我的猪场应该怎么做?
    • 用哪种疫苗?抗体产生、持续、消失的规律怎样?
    • 在何时进行第一接种?
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猪瘟-如何免疫?
  • 所用的疫苗有资料吗?
    • 妊娠早期接种是否会增加死产仔数?
    • 接种后多长时间能产生保护?
      • 母猪?
      • 保育仔猪?
      • 中大猪?
    • 保护抗体可以持续多长时间?
      • 母猪?
      • 保育仔猪?
      • 中大猪?
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猪瘟-如何免疫?
  • 所用的疫苗没有资料
    • 唯一的办法就是自己做实验!
  • 哪些试验?测什么?用什么方法测?
    • ELISA抗体检测仍然是重复性最好的方法!
    • 3项试验
      • 抗体产生规律试验:
        • 免疫前的抗体水平、免后是否产生抗体?产生时间?
        • 母猪、仔猪、大猪
      • 母源抗体的水平及消失规律:
        • 连续测定
      • 不同年龄段猪的抗体检测:
        • 群体抗体检测
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猪瘟-如何免疫? 3项试验
  • 1 抗体产生规律试验:
    • 免疫前、后是否产生抗体?时间?
      • 母猪、仔猪、大猪

1)各选30头猪

2)接种前测ELISA抗体-是否已经有抗体?

3)接种15天、30天、45天测

考察疫苗的效果

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猪瘟-如何免疫? 3项试验
  • 2 母源抗体的水平及消失规律:
    • 对确定仔猪的最佳首免时间极为重要

1)纪录母猪的免疫时间

2)选40头未吃初乳的仔猪(野毒感染的风险?),不接种猪瘟疫苗,连续采血测ELISA抗体

3)出生后7天、14天、21天(断奶时)、28天、42天、63天(出保育)测

建议ELISA阻断率30%以下的仔猪占20%时(认为猪群已受到明显威胁)做首免。

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猪瘟-如何免疫? 3项试验
  • 2 母源抗体的水平及消失规律:
    • 仍有80%的仔猪有母源抗体
    • 20%低过0.3的阻断率,是为了覆盖这部分的‘受威胁’的猪,应该评估你的猪场所受的威胁,可能有80%时作首免也不迟。
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猪瘟-如何免疫? 3项试验
  • 3 不同年龄段猪的抗体检测:群体抗体监测
      • 首免日龄前,抽检25头
      • 首免后(最好在某饲养阶段末,如出保育,生长I期结束)20天抽25头
      • 根据妊娠母猪的免疫方案(普防?跟胎?)抽2组各25头即可。
      • 如果是同一分场内,总计约75-100头
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猪瘟:结语与建议
  • 不要轻易怀疑是猪瘟发病-
      • 正常免疫猪场的野毒阳性率可能非常低;
      • 多数猪场尚未科学检测、科学抽样;
      • 临床症状+PCR确诊。
  • 送检PCR/ELISA
      • 有重复样;
      • 相同猪连续监测抗体是好办法。
  • 更换疫苗必须评估
      • 磨刀不误砍柴工
      • 建议母猪产前/配种前接种,没必要一年3次以上普防;
      • 根据母源抗体消失情况,仔猪免疫1-2次已非常充分。
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枝原体肺炎
  • 攻击、破坏气管上皮的纤毛,破坏了呼吸系统抵御有害微生物入侵的机制
  • 主要影响 :
    • 生长猪的饲养成本
      • 平均日增重、饲料转换率、肺成品率、药物成本
    • 死亡率
      • PRRS活跃场、SIV时
    • 更易继发感染其他呼吸系统病
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使用疫苗的盈亏平衡点

平均肺部病变评分

总成本

疫苗成本

疾病成本

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枝原体肺炎-何时免疫?
  • 大部(?)猪感染之前,应有疫苗保护
  • 又能避开母源抗体的干扰
    • 母源抗体有干扰吗?
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枝原体肺炎-何时免疫?
  • 大部(?)猪感染之前,应有疫苗保护
    • 但是文献及试验数据表明,血清抗体转阳的时间可能是11-24周龄,很大的范围,
    • 究竟我的猪场肺炎枝原体感染的时机主要是哪个年龄段呢?
      • 不测不知道!
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枝原体肺炎-何时免疫?
  • 又能避开母源抗体的干扰
    • 母源抗体有干扰吗?
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枝原体肺炎-何时免疫?

不同周龄、不同母源抗体水平下疫苗接种的效果

  • 16周攻毒,21周评肺.Jayappa, H., Davis, R., (2001)
  • 母源抗体降低时再接种更好!

肺变评分

接种前母源抗体水平

实验组

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枝原体肺炎-何时免疫?

枝原体免疫周龄、母源抗体水平对单针免疫的影响

14周攻毒,18周屠宰评分肺脏

  • Thacker et al (2002)
  • 母源抗体降低时在接种要好(6-9周龄)!

母猪免疫

母猪未免疫

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枝原体肺炎-何时免疫?
  • 母源抗体降低时接种好!
  • 产前免疫过母猪的猪场,根据不同的断奶日龄,仔猪枝原体免疫可能应该推迟
        • 可能推迟到出保育时
        • 根据新的免疫学研究,美国的不少专家认为即便母猪不接种,仔猪的首免也应是10-12周龄。
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枝原体肺炎-免疫有效吗?
  • 每个猪场都是不同的!
  • 断奶日龄及猪舍通风质量可能是影响枝原体流行程度的最重要因素。
  • 饲料越贵,越应考虑免疫接种。
  • 只有用自己的猪群做过试验才知道,而且要定期做。
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枝原体肺炎-免疫有效吗?
  • 只有用自己的猪群做过试验才知道,而且要定期做。
  • Excel 案例1
    • 2个保育生长肥育场,蓝耳病阳性但稳定场的后代
    • 各2次重复
    • 共约900猪,用3种疫苗免疫方案,统计自断奶到肥育一期,称重5次
    • 分析死亡率、平均日增重的差异
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枝原体肺炎-免疫有效吗?

正确的结果解释:2005年,

该猪场一胎母猪的后代仔猪,

7、21日龄免疫2针某品牌的

枝原体苗可以提高平均日增重59克

(p<0.01)

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枝原体肺炎-免疫有效吗?
  • 只有用自己的猪群做过试验才知道,而且要定期做。
  • Excel 案例2, 同一公司
    • 3个保育-肥育场,1个来自蓝耳病隐性群,2个来自蓝耳病阳性、但稳定场的后代
    • 共约1,200猪,用4种疫苗免疫方案,统计自断奶到肥育一期,称重5次
    • 分析死亡率、平均日增重的不同猪场、性别、胎次差异
    • 使用了复杂的单变量一般线性模型分析处理间的差异,皮尔孙检验分析死亡率
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枝原体肺炎-免疫有效吗?
  • 结论:
  • 各个免疫方案之间及其
  • 与对照组之间均无差异。
  • 这家公司、目前的猪群,是否免疫枝原体疫苗没有区别。
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枝原体肺炎-免疫有效吗?
  • 只有用自己的猪群做过试验才知道,而且要定期做。
  • Excel 案例3, 广西-更大规模、更系统的实验已进入数据处理阶段
    • 2个生长肥育群;
    • 用5种疫苗免疫方案,统计自断奶到肥育2期;
    • 分析死亡率、平均日增重、饲料效率、咳嗽指数、屠宰肺部评分、不同时间的抗体水平变化。
    • 敬请期待!
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枝原体肺炎
  • 是否打苗要做试验看有没有改善平均日增重、饲料转化率及死亡率。
  • 饲料贵、猪价好可能是用枝原体苗的最佳时机
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结语
  • 怀疑猪瘟发病一定要有依据!
  • 无论是猪瘟还是肺炎枝原体,母源抗体高对免疫接种都有影响。检测自己猪场仔猪群的母源抗体消失规律对确定首免时机是十分必要的。
  • 是否免疫、免疫接种频率只有用自己的猪群做了实验才知道。
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谢谢!

闫之春

美国谷物协会

010-6505 1314

[email protected]

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