L'ATP-métrie

1. L'ATP-métrie Dossier réalisé par Justine Oliger et Julien Saez. BTS bio analyses et contrôles Ambérieu en Bugey

2. Introduction L'ATP-métrie permet une approche plus pratique de cette molécule essentielle dont les élèves entendent parler tout au long de leur cursus sans jamais constater concrètement son existence. Nous vous proposons donc une approche de ses différentes techniques de dosages ainsi que leurs principes.

3. Qu'est-ce que l'ATP-métrie? • Technique permettant d'effectuer une mesure simple et rapide du taux d'ATP (Adénosine TriPhosphate) cellulaire sur une surface qui sert a quantifier le nombres de microorganismes. • Utilisée également en industrie agro alimentaire pour évaluer la contamination microbienne dans un aliment.

4. La bioluminescenceApplication de l'ATP métrie • L'ATP metrie est un technique de dosage instantanée de l’ATP (Adénine Triphosphate), molécule de stockage d'énergie présente dans les organismes vivants. La technique basée sur le principe de bioluminescence, est une réaction enzymatique traduisant une quantité d'ATP en quantité de lumière. Appliqué aussi au nettoyage désinfection elle permet la détection de résidus alimentaire et de développement microbien.

5. La Bioluminescence: PRINCIPE • Cette technique utilise une enzyme, la luciférase. • Elle a pour substrat la luciférine qui, avec de l'ATP, produit de la lumière quantifiable grâce à un bioluminomêtre. Une relation permet de connaître la concentration en ATP en fonction de la lumière.

6. Mesure de l'ATP Une relation permet d'établir un lien entre la luminescence émise et la concentration en ATP. Nous pouvons constater que la limite de détection de cette technique est très faible, de l'ordre de 10-14 moles d'ATP.

7. Présentation de l'enzyme : la LUCIFÉRASE Cette enzyme est une transférase d'un groupement pyro-phosphate.

8. DEMARCHE QUALITE • Identifier rapidement les zones sensibles en matière de nettoyage et désinfection. • Déterminer un seuil de tolérance en fonction des exigences du site ou de l'entreprise. • Interpréter immédiatement les résultats et permettre la validation du nettoyage et de la désinfection de l'atelier en une heure. • Permettre des actions correctives immédiates en cas de problème. • Sensibiliser et responsabiliser le personnel à l'hygiène par une formation complémentaire.

9. CONFORMITE AU PRINCIPE HACCP • La directive européenne recommande, aujourd'hui, le recours au principe du HACCP pour la maîtrise de la qualité microbiologique des aliments. • L'ATP métrie entre dans le cadre de cette démarche, car elle est un outil d'autocontrôle rapide du nettoyage désinfection, permettant de réaliser une surveillance et de décider d'actions correctives immédiates. • On peut ainsi garantir au produit une sécurité optimale.

10. Conclusion:Utilisation de l'ATP métrie • Vérification de nettoyage désinfection des surfaces en laboratoire. • Vérification de la flore microbiologique dans les aliments. • Oenologie : Conformité du vin.(flore microbienne)

11. Conclusion:méthodes utilisées en laboratoire • Bioluminescence . • Dosage des nucléotides (colorimétrie) contenant l'ATP.

12. Bibliographie http://www.silliker.fr/home/microbiologie.htm#analyse http://www.liste-hygiene.org/arckits.html http://www.didier-pol.net/3ATP&BL.html http://www.pasteur-lille.fr/fr/expertise/alimentaire/pdf/atpmétrie.pdf