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免疫检测法来检测食品中的三聚氰胺

免疫检测法来检测食品中的三聚氰胺. 第 3 小组 组长：邱玉兰 PPT制作：平亚东 邱玉兰 成员：凌瑞雪 董才 倪智敏. 2007 年 3 月 , 美国发生多起因食用宠物食品而导致宠物中毒死亡事件。 2008 年 9 月 , 中国发生因食用三鹿婴幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾结石病症的严重事件。 两起事件的原因都是在食品或饲料中非法添加大剂量三聚氰胺。. 三聚氰胺.

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免疫检测法来检测食品中的三聚氰胺

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Presentation Transcript

  1. 免疫检测法来检测食品中的三聚氰胺 第3小组 组长：邱玉兰 PPT制作：平亚东 邱玉兰 成员：凌瑞雪 董才 倪智敏

  2. 2007年3月, 美国发生多起因食用宠物食品而导致宠物中毒死亡事件。 • 2008 年9月, 中国发生因食用三鹿婴幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾结石病症的严重事件。 • 两起事件的原因都是在食品或饲料中非法添加大剂量三聚氰胺。

  3. 三聚氰胺 三聚氰胺（化学式：C3H6N6），俗称密胺、蛋白精，被用作化工原料。它是白色单斜晶体，几乎无味，微溶于水（3.1g/L常温），可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等，不溶於丙酮、醚类、对身体有害，不可用於食品加工或食品添加物。

  4. 主要检测方法 一、三聚氰胺酶联免疫检测法 二、胶体金免疫层析实验方法

  5. 酶联免疫法 • 酶联免疫法(ELISA)是在免疫荧光和组织化学基础上发展起来的新技术。其主要是利用抗原与抗体的高特异性反应，通过合适的载体，使酶标抗原或抗体与待测样品反应，形成酶标抗原抗体复合物，在相应的酶底物参与下，复合物上的酶催化底物使之水解成有色物质。一定条件下，呈色物质与待测物的含量直接相关，因此可以根据呈色物质颜色的深浅，对待测样品进行定性定量分析。

  6. 酶联免疫法原理 采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被三聚氰胺抗原，样本残留的三聚氰胺和微孔条上预包被的抗原竞争抗三聚氰胺抗体，加入TMB底物显色，样本吸光值与其残留物三聚氰胺成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。

  7. 酶联免疫法的缺陷 酶联免疫法方法由于高通量简单快速，在食品检测中应用非常广泛，但是该方法存在一定的假阳性，只能作为一种筛选方法，其阳性结果必须经相应的确证方法确证。因此虽然验证结果显示酶联免疫法方法检测乳制品和肉类中三聚氰胺都可以满足1mg/kg，但是检出的阳性结果必须经过液相色谱质谱质谱( lc-ms/ms) 确证。

  8. 三聚氰胺酶联免疫检测试剂盒 该试剂盒是利用免疫学竞争法的原理，在酶标板微孔上预包被三胺卵清蛋白偶联物聚氰。检测时，加入三聚氰胺标准品或待测样品溶液及特异性的抗三聚氰胺抗体，包被在微孔板上的三聚氰胺卵清蛋白偶联物和标准品或样品中的三聚氰胺竞争性地与抗体结合，再加入酶标二抗， 形成抗原抗体复合物；用TMB底物显色；加入反应终止液后在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的三聚氰胺浓度与吸收光强度成反比。

  9. 胶体金免疫层析技术-----介绍 • 胶体金免疫层析技术（GICA)是以胶体金为标记物的免疫层析技术，免疫层析( IC)技术是20世纪80年代发展起来的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的快速免疫分析方法。

  10. 胶体金免疫层析技术原理 其原理是以条状纤维层析材料为固相,借助毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,同时,使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异、高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带) ,通过酶促显色反应或直接使用可目测的着色标记物(如胶体金) ,短时间(5～10min内)便可得到直观的实验结果。

  11. 三聚氰胺胶体金速测卡的检测原理 将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移, Ag- Ab1 复合物被固相化在质控线处的抗Ab1 抗体(Ab2)所结合,形成Ab1- Ag- Ab2 复合物,使质控线显色。

  12. 胶体金免疫层析技术的优势及应用 • 胶体金免疫层析技术不需进行结合标记物与游离标记物的分离,省去了繁琐的加样、洗涤步骤。因而这种分析技术操作简单快速,分析结果清楚,易于判断,且无须仪器。 • 三聚氰胺胶体金速测卡检测灵敏度高，结果直观，操作方便、快捷，携带、储存方便，成本低，非常适合于基层执法部门对三聚氰胺的快速筛查。 • 胶体金免疫层析技术在医学上应用较多,在食品检测领域的应用在近几年才发展起来。有多种应用胶体金免疫层析技术的商业化产品面世，三聚氰胺胶体金速测卡就是其中之一。

  13. 从以上两种方法中，我们可以得出要检测食品中是否有三聚氰胺，可以用免疫检测的方法。而且可以达到快速、简便的目的。相信以后对于食品中三聚氰胺的检测方法有更加简便、快速的免疫检测方法。从以上两种方法中，我们可以得出要检测食品中是否有三聚氰胺，可以用免疫检测的方法。而且可以达到快速、简便的目的。相信以后对于食品中三聚氰胺的检测方法有更加简便、快速的免疫检测方法。

  14. 谢谢欣赏 试问几人精免疫 可怜老师苦教导

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