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Presentation Transcript


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IgG

p24

Ag

IgM

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Semaines

Sensitivit des diffrentes gnrations tests de dpistage

ARN VIH

4me Gn ou

T. combin 1997

Fentre srologique

3me Gn 1989

2me Gn 1988 (P. recombinantes )

1re Gn 1985 (viral lysat)


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Problme de Sensitivit des premiers tests combins

Les tests combins apparus entre 1997 et 2000 prsentent un seuil de dtection lev par rapport au test dantigne p24

  • Laperche et al., Transfus Clin Biol. 2000

  • Ly et al., Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2001

  • Weber, B. 2003. AIDS

Problme de Spcificit des premiers tests combins

99,5 99,6 % moins bonne que les tests de dtection danticorps

  • Grtler et al., J. Virol. Methods. 1998

  • Weber et al., J. Clin. Microbiol. 1998

  • Ly et al., J. Clin. Microbiol. 2000


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Sensitivit de la dtection dAg p24

(panel dAg VIH SFTS : LAI sous-type B)


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  • Ly et al, Journal of Clinical Microbiology, 2000 Contribution of combined detection assays of p24 antigen and anti-human immunodeficiency virus (HIV) antibodies in diagnosis of primary HIV infection by routine testing.

Sroprvalence leve Population : 1.6%

  • 5 laboratoires

  • 29 657 chantillons 3me gnration et VIDAS HIV DUO

VIDAS HIV DUO / 3rd Gen EIApos/pos pos/neg neg/pos

453 160 42

Western blot positif 449 0 0

p24Ag positif 17

Suivi Western blot positif 4/4 17/17 0

29 002 ngatifs

17/470 (3.6%) VIH infection dtecte par VIDAS HIV DUO

Spcificit VIDAS Duo : 99.51% ;

Spcificit 3meGen EIA: 99.85%


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20 tests de dpistage ELISA disponibles en Europe 2008


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Could the new HIV combined p24 antigen and antibody (Ag/Ab) assays replace p24 antigen specific assays ?

Ly et al.J. Virol. Methods 2007


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Spcificit

1 005 chantillons ngatives en VIH provenant de 4 laboratoires privs franais


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Sensitivit analytique: Limite de dtection dAg VIH-1

(panel dAg VIH SFTS : LAI sous-type B)


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Panel BBI PRA 801

- pgVIH/ml(panel de rfrence franaise SFTS ou Afssaps)

- pg p24/ml(DuPont)

- mIU/ml (W.H.O: Worth Health Organization)

x 3,6


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Sensitivit clinique

23 VIH-1 Seroconversion Panels

  • 9 panels BBI :

    • 923, 932, 941, 944, 952, 953, 954, 957, 958,

  • 11 panels de NABI :

    • SV-0251, 261, 281, 321, 331, 371, 401, 404, 4888,

    • 37748, 122399,

  • 3 panels de BCP :

    • 9013, 9016, 6243


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0

1

2

3

4

5

6

7

8

Semaines

Importance du choix des panels de sroconversion

dans lvaluation des tests Combins

1

2

3

Test combin

ou 4me gnration

IgG

Test danticorps

ou3me gnration

Ag p24

IgM


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Retard par joursen moyenne vis vis de PCR

< 20 pg/ml

5 6 jours

2004-2005

Detect HIV v.4

< 30 pg/ml

2001-2002

PCR

VIDAS DUO Ultra

4.04

VIDAS Ultro Quick

5

Coulter HIV-1 Ag

5.13

ARCHITECT HIV Combo

5.17

Genscreen HIV Ultra

5.5

AxSYM HIV Ag/Ab Combo

5.78

Cobas Core HIV Combi

6.17

6.78

Murex HIV Ag/Ab Combo

2004

7.76

Modular HIV Combi

VIDAS HIV DUO

8.09

8.29

Genscreen Plus HIV Ag/Ab Combo

Genscreen HIV 1/2 v2

8.78

< 2000

Enzygnost HIV Integral

9.37

Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab

10

Ortho HIV-1/HIV-2 Ab Capture

10.25

0

2

4

6

8

10

12

Days

Classic Method: Maximum delay method

Format Microplaque


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Retard par joursen moyenne vis vis de PCR

PCR

3.5 4.5 jours

VIDAS DUO Ultra

2.35

ARCHITECT HIV Combo

2.74

2004-2005

VIDAS Ultro Quick

2.83

Coulter HIV-1 Ag

3.04

3.35

Genscreen HIV Ultra

3.48

AxSYM HIV Ag/Ab Combo

2001-2002

Murex HIV Ag/Ab Combo

3.86

Cobas Core HIV Combi

4.09

Genscreen Plus HIV Ag/Ab Combo

4.05

2004

4.73

Modular HIV Combi

5.17

VIDAS HIV DUO

< 2000

6.15

Genscreen HIV 1/2 v2

6.25

Enzygnost HIV Integral

6.6

Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab

6.81

Ortho HIV-1/HIV-2 Ab Capture

Jour

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Microplate format

Paul Erhlich Institut (PEI) calculation method (negative + 1 day)


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Sensibilit de la dtection des anticorps: Panel BCP9017

Ratio (s/co)= > 1 : Positif - < 0,9 : Ngatif


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Importance de la qualit des anticorps monoclonaux utiliss dans les trousses pour la dtection dAg p24.

Tersmette et al., Virology, 1989Detection and subtyping of HIV-1 isolates with a panel of characterized monoclonal antibodies to HIV p24 gag : problme de dtection dAg p24 avec les anticorps monoclonaux sur certaines souches virales.

Maniez et al, Spectra biologie, 1997valuation des trousses de dpistage de lAg p24 du VIH: 7 trousses dAg p24 avec problme de sensibilit vis--vis de certaines souches VIH-1.


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Diversit du VIHConsquences pour la dtection dAg p24

  • 31 surnageants de culture de sous-types VIH-1:

    1 A; 8 CRF01_AE (circulating recombinant ); 7 B; 5 C;3 D; 3 F; 1 G; 1 O; et 2 CRF02_AG

    Chaque surnagent ayant 4 concentrations diffrentes titres avec la trousse Innotest HIV Antigen (Innogenetics):

    4 - 24 pg VIH /ml

    10 - 75

    22 - 150

    61 - 356


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Limite de dtection de lAg VIH avec 31 panels dAg

Arcitect

AxSym

Murex

Vidas Ultra

Vidas Duo

Modular

Cobas

Genscreen Ultra

Genscreen Plus

6,6-41,2

15,2-110

12-72,7

6,3-83,5

29,2-456

86,9-280,7

29,7-234,5

7,3-180,7

42,3-> 500


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Sensibilit de dtection des anticorps anti-VIH-1/2 chez les patients infects dans diffrentes rgions du monde (n=669)

  • 553 chantillons VIH-1-M :

    113sous-type A: Cameroun, Ghana, Uganda, Grande Bretagne, France

    75 sous-type B: Brsil, Cameroun,Thalande, Afrique du Sud, Grande Bretagne, France

    71 sous-type C: Afrique du Sud, Uganda, Grande Bretagne, France

    40 sous-type D: Cameroun, Afrique du Sud, Uganda, Grande Bretagne, France

    11 sous-type F: Argentine, Brsil, Cameroun, France

    9 sous-type G: Cameroun, Ghana,

    83 CRF01-AE: Thalande

    92CRF01-AG: Cameroun, Grande Bretagne

    59 Mosaques : Argentine, Brsil ,Cameroun, Ghana, Uganda, Grande Bretagne, France

  • 6 chantillons VIH-1-O (France, USA, Espagne, Cameroun: ESP2, 08692A, ABB009/96, ABB141/98, Ess, Rue)

  • 110 chantillons VIH-2 (Afrique de lOuest)


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VIDAS DUO 1 VIH-1 sous-type F,

Genscreen v.2 1 VIH-1 groupe O,

Enzygnost 1 VIH-1 sous-type C

Genscreen Plus 1 VIH-1 sous-type B

chantillons pr-sroconversions


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Nouveaux tests Combins apparus aprs 2000

Spcificit: nette amlioration trouve dans certains tests

Sensibilit de dtection dAg: nette amlioration.

Presque tous ont un seuil de dtection infrieur 50 pg VIH/ml

Problme de dtection dAg des diffrents sous types VIH-1

Sensibilit de dtection dAc: peut tre moins bonne dans la dtection des taux trs faibles


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Biomnis: Paris et Lyon

Aot 2007-juillet 2008


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Consquence de Recommandation HAS sur 20 tests de dpistage ELISA


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Seuil de dtection de lAg VIH-1SFTS (souche LAI sous-type B)

Vidas Duo Ultra 11,5 pg VIH/ml

Vidas Duo Quick 13

Genscreen Ultra HIV Ag/Ab 13

Architect HIV Combo 18

Axsym HIV Combo 21

Murex HIV Ag/Ab Combo 29

Modular HIV Combi 126,5

Vironostika Uniform II Ag/Ab 150 50 ? version 2006

Enzygnost HIV Integral II < 50? 23 version 1

Detect HIV (v.4) 31 19,5


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Existence dune variabilit du seuil de dtection dAg p24 dun lot lot des tests combins ?

Architect Combo : < 50 pg/ml

  • Rle de lAfssaps dans lapplication de la recommandation HAS ?

  • -Liste officielle des tests combins

  • Contrle des lots : fabricants ou Afssaps ?


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Remerciements

S. Laperche, INTS

S. Gonzalo, Biomnis Lyon

A. Bianchi, Laboratoire Dpartemental de Bondy

B. Lcolier (CEF)

J. Lupu (Centre Suchet, Paris)

J.Y. Mascart, AJ Morvan (Laboratoire Morvan Mascart, Paimpol)

J.P. Trguier, JJ Lemoine (Laboratoire Trguier Lemoine, Lannion)

S. Devare, P. Leroux, C. Brennan,(Abbott Laboratories)

L. Santucci, J.M. Jego, S. Gadelle, (Bio-Rad Laboratories)

O. Paour, (BioMrieux)

T. Vidalenc, B. Studer (Dade Behring)

F. Eberle, (Roche Diagnostics Laboratories)


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