STERILISASI ALAT DAN PEMBUATAN MEDIA AGAR

1. STERILISASI ALAT DAN PEMBUATAN MEDIA AGAR PRAKTIKUM BIOINDUSTRI Fitriyah 125100301111008 KELOMPOK 08

2. AlatdanBahan • Autoklaf • Bunsen • Hotplate • Kompor • Rakdantabungreaksi • Gelasukur • Timbangan digital • Alkohol 95% • Tisu • Agar bacteriological • Laktofenol • Aluminium foil • Kertaspayung • Karet • Plastikpetromax • Kapas

3. TAHAPAN STERILISASI ALAT Adapunlangkah-langkahuntuksterilisasialatmeliputi: 1.) Siapkanalatdanbahan yang akandigunakan 2.) SemprotalatdenganAlkohol 3.) Bersihkandengan lap sampaibersih 4.) BungkusdengankertasCokelat 5.) Masukkandalamplastikpertomax 6.) IkatdenganKaret 7.) Selanjutnya, siapkanAutoklafdandiisidengan air

4. 8.) Masukkanalat yang akandisterilisasi 9.) Panaskandenganmenggunakankompor 10.) Tungguhinggasuhumencapai 121,1oC 11.) Kemudiantunggu 15 menitdengansuhukonstan 121,1oC 12.) Dinginkansampaisuhu 0oC 13.) Dan keluarkanAlatdariAutoklaf

5. Padasterilisasi, alat yang akandisterilisasiharusterlebihdahuludisterilkandenganalkohol(padacawanpetri). Kemudiandisiapkan pula kapas, tabungreaksi, kertascoklat, plastikpetromax, karetgelang. Setelahsemuadibersihkandenganalkohol, cawanpetridibungkusdengankertascolklatdengancaramelipatnyapadacawantersebut. Sedangkantabungtersebutdiberitutupdengankapashinggarapatdandapatdipastikanudaratidakdapatmasukdalamtabung. Setelahsemuadiakukan, keduanyadimasukkankedalaplastikpetromax yang berfungsisebagaibahan yang tahanakanuap.

6. Padakertascokelatuntukpembungkusanterdapatduasisi, yaitusisihalusdansisi yang kasar. Padasisi yang halusdiletakkanpadabagianataspembungkusan. Hal inibertujuanuntukmeminimalisir air dariluartabungdanuntukmenahanuap air masukdalamtabungreaksi. Sedangkanbagiankasardibungkuskandibagianbawah (wadah) dengantujuan agar dapatmenyerapuapmaupun air yang terdapatpadabagiandalamtabungataucawanpetri.

7. TAHAPAN PEMBUATAN MEDIA AGAR Sebelumnya, perludiketahuibahwadalampembuatan media agar inidigunakan 2 perlakuanyaitudibuat media agar tegakdan media agar miring. Adapunlangkah-langkahpembuatan media agar sebagaiberikut: 1.) Timbang Agar Bacteriological sebanyak 0,672 gr 2.) Masukkankedalamgelasukur 3.) Aduk 4.) Panaskandenganmenggunakan hotplate 5.) Masukkandalamtabungreaksi 7 ml 6.)Tutupdengankapas

8. 7.) Bungkusdengankertascokelat 8.) Masukkandalamplastikpetromax 9.)Ikatdenganmenggunakankaret 10.) Kemudian, masukkandalamautoklaf 11.)Panaskandengankompor 12.) Tunggusampaisuhu 121,1oC 13.) Tunggu 15 menitdengansuhukonstan 121,1oC 14.) Dinginkanhinggasuhu 0oC 15.) Keluarkan media agar

9. STERILISASI MEDIA AGAR • Fungsipenambahanaquadesdigunakanuntukmengencerkanlarutan, penambahanaquadesinimengakibatkankonsentrasiberubahdan volume diperbesartetapijumlah mol zatterlaruttetap. Sedangkanpemanasandengan hotplate sepertibiaasadigunakan agar dapatmembuatlarutantercampursecarahomogen.

10. Padapembuatansterilisasi media agar periksadulubanyak air dalamautoklaf, kemudiandimasukkan media yang akandisterilkan yang ditutupdengansekruppengamanpadaautoklaf. Lalunyalakanapipadakompor. Padasaatautoklafditletakkandiataskompor, katupuapdibiarkanterbukahinggaudaradigantiuap. Setelahuadaratergantiolehuapkatupuapnyaditutup.

11. Kemudiandistterilisasimedianyasekitar 15-20 menit, kemudianmatikanapinyadandibiarkanmenuruntekanannyahingga nol. Dibukatutupautoklafnya,laludiambiltabungnyadengansarungtangantahanpanas.Kemudianmemasukkankertassporestripdalamautoklafdandilakukansterilisasi. Padaprosestersebut, dimasukkansporestripdalam dextrose tryptone broth yang diinkubasipadasuhu 55-60oC. Kemudiandiamatiperubahannya.

12. Padapembuatan media agar perludidiamkanselama 24 jam setelahprosesstrelisasi agar supaya media dapatberkembangsehingganantinya media dapatmembentukteksturseperti agar danpendiamaninijugadilakukankarenamikrobaataubakteridapatberkembangbiakdengancepatdanbaikdalamwaktu 24 jam.

13. GAMBAR HASIL STERILISASI ALAT

14. GAMBAR HASIL MEDIA AGAR