art cientifico

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental Rendimiento de polihidroxialcanoatos (PHA) en microorganismos halófilos aislados de salinas Presentado por : Valdivia Gutierrez Victor Andre-2019205146 Valdivieso Vera Nicoll Andrea-2019205134

2. Rendimiento de polihidroxialcanoatos (PHA) en microorganismos halófilos aislados de salinas Materiales y Métodos Resumen Introducción se polihidroxialcanoatos (PHA) producido por microorganismos suelo y aguas de las salinas de Morrope, Lambayeque, rendimiento p/x fue de 0.270 a 0.725 gg-1, destacando con más de 60% los microorganismos AE2019 (63.10%) y AE228 (72.52%). Estos microorganismos considerados promisorios producción de PHA. determinó el rendimiento de La degradación del plástico, sumado a su versátilidad, lo han convertido en una materia prima utilizada ampliamente en la producción de productos. durabilidad y resistencia a la Para aislar microorganismos halófilos productores de PHA se recolectaron de forma aleatoria, 54 muestras de suelo y agua de las lagunas salinas ubicadas en el distrito de Lambayeque aislados de Muestreo Mórrope, región Perú. El Los PHA son poliésteres sintetizados intracelularmente microorganismos como reserva de carbono y energía y que una vez extraídos de la propiedades físicas similares a los petroplásticos Aislamiento de microorganismos halófilos.- AE222 (60.73%), por los microorganismos halófilos de suelo y agua: • enriquecidas depositando 1 g o 1 mL en tubos de 15 x 150 mm conteniendo 9 mL de caldo HM1 con glucosa • se incubaron a 30 °C • fueron caracterizadas macroscópicamente, registrándose la textura y el color son para la célula, presentan Se especies acumulan halófilas que alcanzan más del 70% de rendimiento han reportado de microorganismos PHA, destacando más de 300 que los Detección y cuantificación de células con gránulos de PHA se sembraron en 5mL de caldo HM2 con glucosa (30 gL-1) se incubaron a 30 °C, en agitación constante (125 rpm), por 144 horas. se realizaron tinciones con Sudan Negro B y la presencia de gránulos negros o grisáceos en el interior de células rosadas se consideró positiva para la detección de PHA • • • Entre los microorganismos halófilos podemos encontrar especies capaces de acumular grandes cantidades del polímero, con un crecimiento rápido bajo diversas nutricionales y en sustratos de bajo costo. Obtención de la curva patrón para la cuantificación de la biomasa condiciones Se tomaron submuestras de 10 mL de cada cultivo, totalizando 200 mL. se tomaron por triplicado 2 mL, uno para determinar la absorbancia a 600 nm (tubo 1) y otro para realizar diluciones decimales hasta 10-3 (tubos 2, 3, 4) El sedimento o biomasa se lavó rápidamente con solución salina (0.85% NaCl) esterilizada, se centrifugó y deshidrató a 45 °C, hasta obtener peso constante. • • • Rendimiento de biomasa y PHA La concentración de biomasa de cada microorganismo fue determinada por turbidimetría , cada 24 horas durante 5 días después de observar turbidez por el crecimiento bacteriano Con la biomasa, se recuperó y cuantificó el PHA producido por cada microorganismo . El polímero fue identificado como PHA cuando se observó un pico máximo de 235 nm . • . • •

3. Rendimiento de polihidroxialcanoatos (PHA) en microorganismos halófilos aislados de salinas Diferentes halófilas de salinas con 25% de sal y su coloración observada por Flores Aislándolos y desarrollando colonias de color naranja, crema ,blanco, melón consistencia es mucosa indicando la posible producción de exopolisacáridos autores obtuvieron bacterias La producción de PHA con glucosa como fuente de carbono por los microorganismos halófilos AE 228, AE 219 y AE 222 en rendimiento Y (P/X) de 60.74 a 72.52 ??−1demostró que constituyen una alternativa para la obtención de PHA en sustratos de bajo costo, y producción mejoradas La concentración del cloruro de sodio facilito el aislamiento del microorganismos considerando criterios; aislando microorganismos halófilos moderados y extremos. Resultados mayor número de Conclusiones diversos En las muestras evaluadas se arrojo : • Cloruro de Sodio: 27.9 % • Conductividad Eléctrica:558 ???−1. Cuya división en muestra fue de : • Suelo :55.56 % • Agua : 62.96% Siendo óptimas microorganismos presentando : • turbidez : 53.13% • Película blanquecina 38.38% • Coloración anaranjado-rojizo : 25% Cuyo tiempo fue : • Agua :10 a 14 días • Suelo : 9 a 14 días y rojo , cuya El rendimiento Y (p/x) , presentó el mayor valor biomasa y el menor rendimiento . Para que el proceso sea rentable es necesario un 60% de masa celular en PHA. Cuanto mayor es el PHA menor es el costo de insumos. Si las condiciones de fermentación mejoran es posible el incremento de PHA . Y estos pueden genéticamente viabilidad económica • de El colorante lipofílico sudan negro B resultó adecuado para la detección de gránulos de PHA , sin embargo no son completamente efectivos para la selección • Hubo turbidez , película blanquecina, típica de microorganismos aerobios Coloración anaranjado pigmentos carotenoides incremento evidenciado por su condiciones de para crecimiento de rojiza ; por los Autores • superficial: Discusión ser mejorados • Absorbancia:235nm Concentración:0.167??−1 Y(p/x):0.270 gg Porcentaje:72.52% • • • • aumentando la Anasilvia Del Pilar Flores Vásquez Terminando debido a que los gránulos de PHA son intracelulares se extrajo celular , con hipoclorito permitiendo el 86 % de pureza .Teniendo como valor máximo : 0.500 gL−1siendo óptima para la industria el proceso fermentativo y 44.44 % -Suelo 59.26% - Agua salina • • Obteniéndose halófilas mucosa anaranjada. Dónde el 39.74 % presentaron gránulos de PHA de color negro en el interior de células vegetativas rosadas mayormente de forma bacilar .Su aislamiento fue : • 32% en el suelo • 68% en el agua Su absorbancia de la biomasa osciló entre 0.020 a las 72 horas con AE334 0242 a las 240 horas con AE450. Para determinar la naturaleza del polímero, se seleccionaron correspondiendo: • Mayor número de células con gránulos de PHA • menor tiempo • Pero menor biomasa la membrana sodio Carmen Carreño- Farfan de , 234 microorganismos consistencia con coloración aislados ,pastosa cuya y es cinco cultivos Anasilvia Del Pilar Flores Vásquez Mediante Fernández este no es un reflejo directo del numero de células .El valor de la ??600da la idea inicial del crecimiento y producción de PHA , siendo afectados por el número de células y por la cantidad del polímero acumulado turbidimetria,sin embargo para Su síntesis en el caldo y glucosa con fuente excesiva de carbono y déficit de nitrógeno. Presentan : Grupo 1 : Límite de nutriente esencial para sintetizar PHA Grupo 2 :acumula grandes cantidades de polímero. Siendo estos sintetizados haloarqueas y siendo constitutivas El ácido crotonico se cuantificó por espectrofotometría UV a 235 nm Los gránulos de PHA presentes en microorganismos superó 4.17% , estos siendo utilizados carbono y energía. Su respuesta endógena de las bacterias , permite hidrolizar sus reservas de carbono a hidroxialcanoatos,mediante despolimersas ,lo que representa la respuesta de la célula a un ambiente metabólico cada vez menos permisible. como fuente de Con obtuvo :y=0.069x + 0.020y se acepto porque ?2fue mayor a 0.9( Mantilla 2007) estos valores de absorbancia, se monómeros por enzimas las las