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1. Les membranes 2. La surface cellulaire 3. Les mitochondries 4. Le réticulum endoplasmique 5. L’appareil de Golgi-exoc

Biologie Cellulaire. 1. Les membranes 2. La surface cellulaire 3. Les mitochondries 4. Le réticulum endoplasmique 5. L’appareil de Golgi-exocytose 6. Les lysosomes-endocytose. Objectifs particuliers: Chapitre 4 et 5 Le réticulum endoplasmique et l’appareil de Golgi.

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  1. Biologie Cellulaire 1. Les membranes 2. La surface cellulaire 3. Les mitochondries 4. Le réticulum endoplasmique 5. L’appareil de Golgi-exocytose 6. Les lysosomes-endocytose

  2. Objectifs particuliers: Chapitre 4 et 5 Le réticulum endoplasmique et l’appareil de Golgi. 1. De décrire et de différencier la structure et la composition du réticulum endoplasmique rugueux et lisse. 2. De décrire la structure et les fonctions des ribosomes et des polysomes. 3. De décrire les principales fonctions physiologiques du réticulum endoplasmique rugueux et lisse. 4. De décrire la biogénèse du réticulum endoplasmique rugueux et lisse. 5. De préciser l’emploi d’inhibiteurs tels la cycloheximide et le chloramphénicol pour différentier les protéines synthétisées au niveau des mito- et cytoribosomes.

  3. Objectifs particuliers (suite): 1. De décrire la composition, la structure et l’isolation de l’appareil de Golgi. 2. De préciser les fonctions physiologiques et la biogénèse de l’appareil de Golgi. 3. De décrire le mécanisme de l’exocytose. 4. De montrer comment l’autoradiographie a permis de résoudre ce mécanisme. 5. De décrire la biogénèse de la membrane plasmique. 6. De décrire le rôle du calcium dans l’exocytose. 7. De montrer comment les ionophores du calcium ont permis de mieux comprendre le mécanisme par lequel le calcium stimule certaines étapes de l’exocytose.

  4. Les membranes du noyau et du réticulum endoplasmique forment un continuum

  5. Figure 5-43

  6. Cytosol Cavités du réticulum RÉTICULUM ENDOPLASMIQUE RUGUEUX POLYSOMES ATTACHÉS AU RER RÉTICULUMENDOPLASMIQUE LISSE Polysome et ribosomenon attachés au RER MEMBRANES NUCLÉAIRES Système vacuolaire cytoplasmique

  7. Ribosomes HOMOGÉNISATION DÉTERGENTS Microsomes rugueux Microsomes lisses Obtention de microsomes lisses et rugueux Réticulum endoplasmique rugueux

  8. - Mg2+ 60 S 40 S 30 S 50 S + Urée 28 S 18 S 23 S 16 S 5.8 S 5 S 5 S 31 Protéines 21 Protéines 50 Protéines 33 Protéines Composition des ribosomes EUCARYOTES PROCARYOTES 80 S 70 S

  9. Structure des ribosomes de procaryotes et d’eucaryotes Figure 4-32

  10. Le rôle de l’ARN dans la synthèse protéique Figure 4-20

  11. Protéine attachée au RER Protéine non attachée au RER Protéines du tunnel Peptide signal Excision 60 S 60 S 40 S Codons de la séquence signal Codon stop 40 S Codon initiateur Structure dynamique des polysomes attachés au RER CAVITÉ DU RÉTICULUM ENDOPLASMIQUE RUGUEUX 3' UAG 5’AUG ARNm

  12. } 60 S réutilisables 40 S Structure dynamique des polysomesnon attachés au RER 3' UAG 5' AUG

  13. mRNA Ribosomes A morphologists view of translation Polypeptide chains

  14. Survol du triage des protéines encodées au noyau Figure 17-1

  15. A. RER Biosynthèse des protéines secrétées ou constitutives de la membrane plasmique (les protéines non secrétées sont synthétisées au niveau des polysomesnon attachés au RER) B. REL 1. Biosynthèse des phospholipides et du cholestérol (chylomicrons, lipoprotéines etc.) Fonctions physiologiques du RER et du REL 2. Détoxication des drogues liposolubles (foie) - hydroxylation + OH (cyto P-450)(phénobarbital) - conjugaison + (acide glucuronique) - démethylation - CH3 3. Biosynthèse des hormones stéroides - androgènes, oestrogènes, glucocorticoïdes etc 4. Concentration ionique - Cl- dans les cellules à HCl de l' estomac - Ca2+ dans les cellules du muscle 5. Réactions de glycosylation (peu important par rapport au Golgi) 6. Production de glucose à partir de glucose-6-Ppar la glucose-6-phosphatase (dans le foie mais pas dans les muscles)

  16. L’appareil de Golgi • Modifie et trie les produits du RE • Caractéristiques: • Serie de compartiments plats et vésicules • Composé de 3 régions: cis (entré), medial, trans (sortie) • Chaque région contient différentes enzymes Figure 5-49

  17. Les protéines de sécrétion sont synthétisées dans le RE et passent à travers le Golgi vers l’environnement extracellulaire Figure 5-48

  18. Trans-Golgi - Face interne - Face de maturation } ~ 20 nm 6-7.5 nm ---> Cis-Golgi - Face externe - Face de formation L’appareil de Golgi et les dictyosomes • L'appareil de Golgi se compose de plusieurs dictyosomes • Un dictyosome se compose de 4 à 8 saccules

  19. MEMBRANE PLASMIQUE VÉSICULES et GRAINS DE SÉCRÉTION Face de maturation (trans) DICTYOSOME Face de formation (cis) VÉSICULES DE TRANSITION RÉTICULUM ENDOPLASMIQUE RUGUEUX Participation des dictyosomes dans l’exocytose

  20. • N-acétylglucosamine • Galactose • Mannose • Fucose GLYCOSYLTRANSFERASES RER DICTYOSOME Synthèse des glycoprotéines Exemple de la thyroglobuline

  21. Récepteur de l’insuline Transporteur du glucose GOLGI Biogénèse de la membrane plasmique

  22. Temps (min., heures) Séquence d’incorporation de dérivés tritiés au coursde l’exocytose suivie par autoradiographie N-acétylglucosamine Mannose REL ----> RER ---- > Golgi ----> Grains de sécrétion Galactose Fucose Leucine + autres AA Choline Inositol Ethanolamine Sérine (pas spécifique)

  23. Exemple de l’insuline Ilôts de Langerhans Insuline Étude de l’exocytose par périfusion 95% O2 - 5% CO2 Pompe péristaltique Liquide physiologique

  24. Régulation de la sécrétion de l’insulinepar le glucose et le calcium extracellulaires Glucose (mg %) 300 50 Calcium (mM) 1 1 O Insuline (µU / min) Phase 2 Phase 2 Phase 1 Phase 1 80 0 10 20 30 40 60 70 50 Temps (min)

  25. L’ionophore du calcium reproduitla phase 1 de la sécrétion de l’insuline Glucose (50 mg %) Ionophore du Calcium (µM) 0 5 Insuline (µU / min) Phase 1 seulement 0 10 20 30 40 50 60 70 Temps (min)

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