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“ DETECÇÃO MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS À URS – SAGRADA FAMÍLIA - PBH”

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DETEC O MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS URS SAGRADA FAM LIA - PBH - PowerPoint PPT Presentation


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“ DETECÇÃO MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS À URS – SAGRADA FAMÍLIA - PBH”. Vanessa Carla de Moraes Gonçalves Cirino Orientadora: Profa. Annamaria Ravara Vago PAD – Departamento de Morfologia - ICB – UFMG Laboratório de Biologia das Interações Celulares.

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PowerPoint Slideshow about ' DETEC O MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS URS SAGRADA FAM LIA - PBH ' - Antony


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“DETECÇÃO MOLECULAR DO HPV

EM PACIENTES ENCAMINHADAS

À URS – SAGRADA FAMÍLIA - PBH”

Vanessa Carla de Moraes Gonçalves Cirino

Orientadora: Profa. Annamaria Ravara Vago

PAD – Departamento de Morfologia - ICB – UFMG

Laboratório de Biologia das Interações Celulares

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INCIDÊNCIA DO CÂNCER DO COLO DO ÚTERO

15% DE TODAS AS CATEGORIAS DE CÂNCER FEMININO

2O TIPO DE NEOPLASIA MAIS COMUM ENTRE AS MULHERES

MAIOR INCIDÊNCIA ENTRE MULHERES DE 40 A 60 ANOS

40.000 NOVOS CASOS SÃO DIAGNOSTICADOS A CADA ANO

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Estimativas para o ano 2005 das taxas brutas de incidência por

100.000 e de número de casos novos por câncer, em mulheres,

segundo localização primária.

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HISTOLOGIA

Connective

Tissue

Stratified Squamous

Epithelium

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Nova Classificação Bethesda System.

NIC I » lesão escamosa intra-epitelial de baixo grau (LSIL)

NIC II, III e carcinoma in situ » lesão escamosa intra-epitelial de alto grau (HSIL)

Células escamosas atípicas de significado indeterminado » ASCUS

Células glandulares atípicas de significado indeterminado » AGUS

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FATORES DE RISCO

Infecção por HPV

Paridade elevada

Início precoce da vida sexual ativa

Multiplicidade de parceiros sexuais

Tabagismo

Uso de contraceptivo oral

Casos de imunossupressão

Baixo nível socioeconômico

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VIAS DE TRANSMISSÃO

Sexual

Neonatal

Através de pinças, luvas, roupas,

equipamentos, etc.

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VÍRUS DO PAPILOMA HUMANO(HPV)

baixo risco : 1, 2, 6, 11, 26, 40, 42,

53- 55, 57, 59, 66 e 68;

médio e alto risco: 5, 8, 16, 18, 31,

33, 35, 39, 45, 51, 52, 56 e 59;

1, 2, 5 e 8

Câncer de pele

16, 18, 31 e 45

Câncer de mucosas

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O GENOMA DO HPV

Dupla Hélice de DNA circular,

8000 pb, 3 segmentos:

“Early-region” (E) – E1, E2, E4,

E5, E6, E7

“Late-region” (L) – L1 e L2

“Long control region” (LCR)

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MÉTODOS DE DETECÇÃO

CLÍNICO - LABORATORIAIS

Citopatológico

Colposcópico

Histopatológico

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MÉTODOS DE DETECÇÃO

MOLECULARES

Captura Híbrida

Hibridização com sondas

PCR – Reação em Cadeia da Polimerase

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OBJETIVO

Realizar a extração do DNA e detecção de um fragmento do genoma viral amplificado por PCR das amostras cervicais coletadas de pacientes na

URS – Sagrada Família.

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DESENHO EXPERIMENTAL

PACIENTES

ENCAMINHADAS

n = 82

COLETA DE AMOSTRAS

ECTO E ENDOCERVICAIS

Proteinase K

Fenol: Clorofórmio: IAA

EXTRAÇÃO DE DNA

PCR

ELETROFORESE

GEL DE POLIACRILAMIDA

COLORAÇÃO

Ag+

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PCR – fragmento de 450 pb do genoma viral ( Região de L1)

Primers : MY09 e MY11

Programa de 40 ciclos

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PRODUTO DE AMPLIFICAÇÃO DO

FRAGMENTO

DE 450 pb DO GENOMA DO HPV

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PRODUTO DE AMPLIFICAÇÃO DO

FRAGMENTO DE 110 pb

DO GENE DE β–GLOBINA HUMANO

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OBJETIVOS FUTUROS

Realizar a comparação entre os achados

clínico-colposcópicos, citológicos,

histopatológicos e moleculares obtidos

nas amostras analisadas.

Realizar a detecção dos subtipos de HPV.

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BIBLIOGRAFIA

Ministério da Saúde/ Instituto Nacional do Câncer, 1996, Viva

Mulher. Programa Nacional do Câncer do Colo Uterino – Manual

Informativo, RJ.

Villa, L. , Caballero, O. L. , Levi, J. E. , Pena, S. D. J. , Simpson A. J. G.

An approach to Human Papillomavirus indentification using low

stringency single specific primer PCR.

Franco, E. L. The sexually transmitted disease model for cervical

cancer: incoherent epidemiologic findings and the role of

misclassification of human papillomavirus infection. Epidemiology,

v.2, p.98 – 106, 1991.

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AGRADECIMENTOS

Professora Annamaria Ravara Vago

Equipe do Serviço de Patologia da URS – Sagrada Família

(Médicos, Enfermeiros e Auxiliares de Enfermagem).

Pacientes participantes deste Projeto de Pesquisa

Professora Cleida A. Oliveira

Lucas Henrique, Sandra Moraes (Mãe) e Altair Cirino (Pai)

Amigos do Laboratório ( Alan, Soraya, Daniela, Alexandre

e Carla)

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