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DETEC O MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS URS SAGRADA FAM LIA - PBH - PowerPoint PPT Presentation


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“ DETECÇÃO MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS À URS – SAGRADA FAMÍLIA - PBH”. Vanessa Carla de Moraes Gonçalves Cirino Orientadora: Profa. Annamaria Ravara Vago PAD – Departamento de Morfologia - ICB – UFMG Laboratório de Biologia das Interações Celulares.

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PowerPoint Slideshow about ' DETEC O MOLECULAR DO HPV EM PACIENTES ENCAMINHADAS URS SAGRADA FAM LIA - PBH ' - Antony


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Presentation Transcript

DETECÇÃO MOLECULAR DO HPV

EM PACIENTES ENCAMINHADAS

À URS – SAGRADA FAMÍLIA - PBH”

Vanessa Carla de Moraes Gonçalves Cirino

Orientadora: Profa. Annamaria Ravara Vago

PAD – Departamento de Morfologia - ICB – UFMG

Laboratório de Biologia das Interações Celulares


INCIDÊNCIA DO CÂNCER DO COLO DO ÚTERO

15% DE TODAS AS CATEGORIAS DE CÂNCER FEMININO

2O TIPO DE NEOPLASIA MAIS COMUM ENTRE AS MULHERES

MAIOR INCIDÊNCIA ENTRE MULHERES DE 40 A 60 ANOS

40.000 NOVOS CASOS SÃO DIAGNOSTICADOS A CADA ANO


Estimativas para o ano 2005 das taxas brutas de incidência por

100.000 e de número de casos novos por câncer, em mulheres,

segundo localização primária.


HISTOLOGIA por

Connective

Tissue

Stratified Squamous

Epithelium





Nova Classificação por Bethesda System.

NIC I » lesão escamosa intra-epitelial de baixo grau (LSIL)

NIC II, III e carcinoma in situ » lesão escamosa intra-epitelial de alto grau (HSIL)

Células escamosas atípicas de significado indeterminado » ASCUS

Células glandulares atípicas de significado indeterminado » AGUS


FATORES DE RISCO por

Infecção por HPV

Paridade elevada

Início precoce da vida sexual ativa

Multiplicidade de parceiros sexuais

Tabagismo

Uso de contraceptivo oral

Casos de imunossupressão

Baixo nível socioeconômico


VIAS DE TRANSMISSÃO por

Sexual

Neonatal

Através de pinças, luvas, roupas,

equipamentos, etc.


VÍRUS DO PAPILOMA HUMANO por (HPV)

baixo risco : 1, 2, 6, 11, 26, 40, 42,

53- 55, 57, 59, 66 e 68;

médio e alto risco: 5, 8, 16, 18, 31,

33, 35, 39, 45, 51, 52, 56 e 59;

1, 2, 5 e 8

Câncer de pele

16, 18, 31 e 45

Câncer de mucosas


O GENOMA DO HPV por

Dupla Hélice de DNA circular,

8000 pb, 3 segmentos:

“Early-region” (E) – E1, E2, E4,

E5, E6, E7

“Late-region” (L) – L1 e L2

“Long control region” (LCR)


MÉTODOS DE DETECÇÃO por

CLÍNICO - LABORATORIAIS

Citopatológico

Colposcópico

Histopatológico


MÉTODOS DE DETECÇÃO por

MOLECULARES

Captura Híbrida

Hibridização com sondas

PCR – Reação em Cadeia da Polimerase


OBJETIVO por

Realizar a extração do DNA e detecção de um fragmento do genoma viral amplificado por PCR das amostras cervicais coletadas de pacientes na

URS – Sagrada Família.




DESENHO EXPERIMENTAL por

PACIENTES

ENCAMINHADAS

n = 82

COLETA DE AMOSTRAS

ECTO E ENDOCERVICAIS

Proteinase K

Fenol: Clorofórmio: IAA

EXTRAÇÃO DE DNA

PCR

ELETROFORESE

GEL DE POLIACRILAMIDA

COLORAÇÃO

Ag+



PCR – fragmento de 450 pb do genoma viral ( Região de L1)

Primers : MY09 e MY11

Programa de 40 ciclos


PRODUTO DE AMPLIFICAÇÃO DO

FRAGMENTO

DE 450 pb DO GENOMA DO HPV


PRODUTO DE AMPLIFICAÇÃO DO

FRAGMENTO DE 110 pb

DO GENE DE β–GLOBINA HUMANO




OBJETIVOS FUTUROS

Realizar a comparação entre os achados

clínico-colposcópicos, citológicos,

histopatológicos e moleculares obtidos

nas amostras analisadas.

Realizar a detecção dos subtipos de HPV.


BIBLIOGRAFIA

Ministério da Saúde/ Instituto Nacional do Câncer, 1996, Viva

Mulher. Programa Nacional do Câncer do Colo Uterino – Manual

Informativo, RJ.

Villa, L. , Caballero, O. L. , Levi, J. E. , Pena, S. D. J. , Simpson A. J. G.

An approach to Human Papillomavirus indentification using low

stringency single specific primer PCR.

Franco, E. L. The sexually transmitted disease model for cervical

cancer: incoherent epidemiologic findings and the role of

misclassification of human papillomavirus infection. Epidemiology,

v.2, p.98 – 106, 1991.


AGRADECIMENTOS

Professora Annamaria Ravara Vago

Equipe do Serviço de Patologia da URS – Sagrada Família

(Médicos, Enfermeiros e Auxiliares de Enfermagem).

Pacientes participantes deste Projeto de Pesquisa

Professora Cleida A. Oliveira

Lucas Henrique, Sandra Moraes (Mãe) e Altair Cirino (Pai)

Amigos do Laboratório ( Alan, Soraya, Daniela, Alexandre

e Carla)


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